抗肿瘤坏死因子单抗对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞TRAIL和TNF-α的影响

目的: 观察脂多糖对人牙周膜成纤维细胞(HPLFs )肿瘤坏死因子(TNF)受体相关凋亡诱导配体(TRAIL) 和TNF-α的诱导作用及抗肿瘤坏死因子单抗(抗TNF单抗)对其的影响,探讨TNF超家族参与牙周病的可能作用机制。方法: HPLFs培养至第6代, 加入不同浓度的脂多糖(0、0.1、1、10、100 μg/mL)培养 24 h,分为命名为Z₀组、Z_0.1组、Z₁组、Z₁₀组、Z₁₀₀组,并取Z₁组浓度的脂多糖,在加药的同时加抗TNF单抗 75 μg/mL( Z₁+75组)。分别采用实时荧光定量PCR法或Western blot法测定TRAIL 和TNF-α mRNA或蛋白的表达。结果: Z₁组、Z₁₀组HPLFs TRAIL mRNA的表达水平显著高于Z₀组或Z_0.1 组(均P<0.05),Z₁组与Z₁₀组之间差异无统计学意义(P>0.05); Z₁₀₀组显著高于Z₀组(P<0.05)且与Z_0.1组、Z₁组和Z₁₀组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。Z₁组或Z₁₀组TNF-α mRNA的表达水平显著高于Z₀组或Z₁₀₀组(均P<0.05);Z₁组与Z₁₀组之间,Z₀组、Z_0.1组和Z₁₀₀组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。HPLFs TRAIL 蛋白的表达水平在Z₁₀₀组0组0.1组1组(均P<0.05 或<0.01);Z₁₀组显著高于Z₀组或Z₁₀₀组(均P<0.01),但与Z_0.1组或Z₁组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。抗TNF单抗治疗后TRAIL mRNA及蛋白和TNF-α mRNA的表达水平显著低于Z₁组(P<0.05 和P<0.01)。TRAIL和TNF-α mRNA的表达水平呈显著直线正相关(r=0.819,n=30, P<0.01)。结论: HPLFs经脂多糖诱导后,其TRAIL和TNF-α的表达呈现先升高后下降,且随脂多糖的浓度变化而相应地变化,这种诱导作用能被抗TNF单抗所抑制。