常见曲霉菌的实时定量PCR诊断技术的研究

目的 建立常见曲霉菌的实时定量PCR诊断技术.方法 针对黄曲霉菌、烟曲霉菌、构巢曲霉菌、黑曲霉菌和土曲霉菌内转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)保守基因设计引物和探针,通过普通PCR扩增其ITS2基因片段,作为实时定量PCR反应模板,通过实时定量扩增和分析其解链曲线来鉴定常见曲霉菌,同时分析该方法灵敏度.结果 真菌通用引物扩增五种常见曲霉菌ITS2基因DNA片段,大小为350 bp左右.实时定量PCR分析和探针解链曲线分析结果显示土曲霉解链温度(melting temperature,Tm)值为57℃±0.12℃,黄曲霉Tm值为59℃±0.13℃,烟曲霉Tm值为63℃±0.17℃,土曲霉Tm值为66℃±0.15℃,构巢曲霉Tm值为66℃±0.14℃,黑曲霉Tm值为68℃±0.12℃.方法 灵敏度分析显示各曲霉菌最低模板DNA反应浓度分别为烟曲霉51.2· fg/μl,黄曲霉621.3 fg/μl,黑曲霉19.5 fg/μl,土曲霉82.4 fg/μl和构巢曲霉520.8fg/μl.结论 创建一种可快速鉴定五种常见曲霉菌的实时定量PCR诊断技术,该方法特异度好、灵敏度高,符合临床需要,能为侵袭性真菌感染(invasive aspergillosis,IA)提供新的选择.     

常见曲霉菌的反向斑点杂交技术的研究

目的 建立常见曲霉菌的反向斑点杂交诊断技术.方法 针对曲霉菌内转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)保守基因设计引物和杂交探针,对探针标记、固定在尼龙膜,形成一种杂交膜与PCR产物进行斑点杂交,显色.结果 真菌通用引物扩增常见曲霉菌ITS2基因DNA片段,大小为350bp左右.构建了常见曲霉菌的反向斑点杂交膜,与其PCR产物反应特异性好,灵敏度高.结论 利用PCR技术和反向斑点杂交技术鉴定常见的曲霉菌,方法特异性好、灵敏度高,符合临床需要,能为侵袭性真菌感染提供新的选择.     

襄樊市2006年艾滋病疫情分析

我市从1995年到2006年11月底共进行抗-HIV检测近36万人次,发现HIV/AIDS共725人(死亡275人),其中AIDS者621人(死亡270人),HIV者104人(死亡5人)。疫情主要特点是:疫情处于报告发病高峰,年龄以青壮年为主,20-49岁占82.21%,全市7个县(市)均发现艾滋病病毒感染者分布,发现最多的是南漳县339例(46.76%)、其次是襄樊市区191例(26.34%),传播途径日趋多样化,以采供血途径为主,经性途径和母婴传播及共用注射器日趋增多。分析预测:近年艾滋病疫情稳中有降,但是报告发病、死亡率,在2-3年仍内将是一个高峰平台(100例/年左右),艾滋病已经开始从高危人群向一般人群扩散。艾滋病防治工作需要建立一种社会关怀救助体系。     

坚持以人为本 关怀艾滋病人

治疗关怀艾滋病人是艾滋病综合防治措施中的重要环节。我市的治疗关怀艾滋病人工作经过艰苦的努力，各项措施得到较好的落实，管理逐步规范，取得了显著成效。本文从人文关怀方面对艾滋病人进行关怀和护理，在争取、实施、考核、评价、管理艾滋病防治项目，以及项目联动、互补、协同、增效等方面，进行了有益的实践与探索，这也是实施艾滋病关怀工作可运用的有利条件和经验。     

深圳地区铜绿假单胞菌医院感染及耐药性

目的了解铜绿假单胞菌(队)引起医院感染的特点以及对抗生素的耐药性的变化趋势．方法对2001-2003年分离出的317株铜绿假单胞菌选用12种抗生素进行药敏实验，按NCCLS标准判断．结果该菌主要来源于痰液和咽拭子(65％)，主要分布在呼吸科(12％)、脑外科(12％)、ICU(10％)、新生儿科(9％)、呼吸科ICU(7％)、老年病科(7％)．2001年．2003年铜绿假单胞菌对环丙沙星耐药率呈上升趋势，2001年-2002年对头孢噻肟耐药呈直线上升，2003年稍有下降．2001年．2003年对哌拉西林(PIP)、哌拉西林／他唑巴坦(TZP)、庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、头孢吡肟(FEP)、氨曲南(ATM)、头孢他啶(CAZ)耐药率呈下降趋势．2001年-2002年对亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)耐药率呈显著下降趋势，2002年-2003年稍有上升．对头孢曲松(CRO)耐药率相对稳定．结论了解铜绿假单胞菌的耐药现状，有利于为临床合理用药提供依据．     

深圳地区3030例新生儿脐血G6PD结果分析

了解深圳地区新生儿G6PD酶活性基本情况.与其他城市新生儿G6PD酶活性有无差异性.方法采用G6PD试剂盒定量法测定G6PD/6GPD的比值,＞=1为正常,＜1为酶缺乏症.用χ2检验分析比较其他城市新生儿G6PD缺乏症百分率有无显著性差异.结果调查3030例新生儿脐带血,G6PD缺乏的有70例,占总数的2.3%.与有些城市新生儿G6PD酶缺乏症有显著性差异.结论深圳地区G6PD缺乏症是种常见病,多发病,应及早采取有效防范措施,预防出现新生儿高胆红素血症及核黄疸病.     

肺炎克雷伯菌25株PFGE基因分型和药敏表型的比较

目的:探讨肺炎克雷伯菌耐药表型和基因组型之间的关系。方法:临床菌株用VITEK60仪器鉴定,以双纸片协同试验(DDST)筛选出产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌(ESBLs-KP)11株和不产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌(NESBLs-KP)14株;用XbaⅠ酶对各试验菌株进行限制性酶切,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分离酶切片段,FingerprintingⅡ指纹图谱分析软件分析PFGE图谱。结果:菌株间AST结果相差较大,并可在较短时间内发生耐药变迁;筛选出产ESBLs11株,占实验菌株的44%;PFGE图谱分析,将肺炎克雷伯菌分为6群,相似性系数为52.63%～78.24%,还有1株不能分型。结论:在用于ESBLs-KP治疗时,碳青霉烯类抗生素是首选应用的抗生素;PFGE图谱分析,产ESBLs菌株和不产ESBLs分在各个群中,没有发现特异的ESBLs条带,但在同一群中,产ESBLs的菌株常为同一亚群,不产ESBLs的菌株常为另一亚群;肺炎克雷伯菌的耐药表型和PFGE的基因分型可以表现为一致,也可以表现不同。     

117株肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的 了解肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的耐药性分析。方法 药敏试验采用纸片扩散法，确证试验检测产ESBL。同时用脉冲场凝胶电泳（PFGE）实验探讨耐药表型与基因组型间的关系。结果 117株肺炎克雷伯菌对20种抗生素的耐药情况严重，产ESBL肺炎克雷伯菌检出率达到43．6％。PFGE将117株肺炎克雷伯菌分为3群，各群间相似度为37．30％。结论 肺炎克雷伯菌的耐药现象严重，多重耐药现象突出，ESBL检出率高。肺炎克雷伯菌的耐药表型与PFGE基因分型结果可以表现一致，也可以表现为不同。     

襄樊市娱乐场所现场调查工作做法与体会

由于卖淫嫖娼属违法犯罪行为,暗娼的活动就十分隐蔽,她们都不愿公开承认自己的身份,主动监测的调查问卷中又涉及许多很私密的隐私,所以要想取得真实全面的信息,实际操作起来难度较大。为更有效地监测性病/艾滋病流行状况以及性病/艾滋病流行相关行为随时间变化的趋势,为襄樊市娱乐场所100%安全套项目和全球基金艾滋病防治项目暗娼干预工作提供准确的基线和监测资料,2004年以来,襄樊市卫生防疫站经过不断地探索和总结,多次深入宾馆、桑拿洗浴中心、歌舞厅、洗脚屋、美容美发店、路边小店、窝棚屋等性服务者人群活动场所,较出色地完成了有关监…