5个家系δβ地中海贫血的家系分析及产前诊断

目的 对5个δβ地中海贫血家系进行分析及产前诊断. 方法 采集家系成员外周血进行血细胞分析,应用毛细管电泳技术对血红蛋白进行分析,采用裂隙聚合酶链反应(Gap-PCR)以及PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)方法对来自外周血及羊水、绒毛的αβ珠蛋白进行基因突变鉴定.结果 检测到中国型Gγ+(Aγδβ)0地中海贫血携带者5例,中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫复合β地贫导致的重型地中海贫血1例,3个胎儿为中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫复合β地贫. 结论 对高风险家庭进行产前诊断避免重型地贫患儿的出生,对于优生优育具有重要意义.     

用聚乙二醇分离富集microRNA的方法探讨

目的 探讨用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)溶液分离富集miRNA的操作方法和分离富集效果,并与Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果进行比较.方法 用PEG溶液和Ambion公司的miRNA分离试剂盒从肝脏组织总RNA中分离富集miRNA,用变性琼脂糖和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定分离效果,并在富集的miRNA中用RT-PCR扩增miR-122以鉴定是否有效地回收了miRNA.结果 PEG和Ambion公司的miRNA分离试剂盒都能有效地富集miRNA,PEG富集的RNA片段比Ambion公司的试剂盒的大.结论 PEG溶液能有效地分离富集miRNA,和Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果相当,并具有操作简便、快捷及成本低廉的优点.     

中国型~Gγ~+(~Aγδβ)~0地中海贫血的基因诊断和临床特征分析

目的对42例中国型~Gγ~+(~Aγδβ)~0地中海贫血患者进行基因诊断并分析其临床特征。方法所有患者的外周血标本进行血红蛋白毛细管电泳和包括平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV),平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)等红细胞参数的分析,应用Gap-PCR、PCR-RDB的方法进行地中海贫血基因检测。结果 40例患者为中国型~Gγ~+(~Aγδβ)~0杂合子,血红蛋白正常或轻度下降,血红蛋白分析显示Hb F为10.6%~20.6%;2例为中国型~Gγ~+(~Aγδβ)~0合并其它常见的β地中海贫血,表现为中重度的贫血,Hb F为80.8%~93.1%。结论中国人群中中国型~Gγ~+(~Aγδβ)~0是比较常见的缺失型β地中海贫血类型,其杂合子临床症状较轻,当合并其他地中海贫血时可改变原有的血液学表现。     

小鼠子宫内膜胚泡着床点及旁组织白血病抑制因子基因表达研究

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)基因在小鼠胚泡着床窗口期了宫内膜表达的特定部位.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对20只孕期第4天的小鼠子宫内膜着床点和旁组织的LIF mRNA进行检测.结果:20只孕期第4天的小鼠着床点LIF mRNA表达平均水平为0.5316,旁组织LIF mRNA表达平均水平为0.3711.统计处理t检验差异具有显著性(P＜0.05).结论:在胚泡着床窗口期,小鼠子宫内膜胚泡着床点和旁组织LIF基因表达存在差异.     

UriSed全自动尿沉渣分析仪的应用与评价

UriSed全自动尿沉渣分析仪是匈牙利77 Elektronika公司产品,它采用全自动智能显微镜,对特制沉渣板中的有形成分在几个不同的高倍镜视野下进行摄影,然后采用计算机图像识别技术进行形态判别并定量报告,该仪器采用自动进样和混匀系统,     

脐血血红蛋白电泳Hb A值辅助诊断胎儿β-地中海贫血及鉴定母血污染的价值

目的探讨胎儿脐血血红蛋白电泳Hb A值在孕中、晚期诊断β-地中海贫血以及母血污染鉴定的应用价值。方法收集父母双方为β-地中海贫血携带者作为指征进行产前诊断且孕周为24²8 w的胎儿54例。应用全自动毛细管电泳系统对胎儿脐带血进行电泳分析,且采用反向点杂交法检测β地中海贫血基因。结果 12例β-地中海贫血基因型正常的胎儿脐带血Hb A的平均值为(6.3%±1.9%);31例β杂合突变的Hb A值范围为2.6%28 w的胎儿54例。应用全自动毛细管电泳系统对胎儿脐带血进行电泳分析,且采用反向点杂交法检测β地中海贫血基因。结果 12例β-地中海贫血基因型正常的胎儿脐带血Hb A的平均值为(6.3%±1.9%);31例β杂合突变的Hb A值范围为2.6%³.7%;10例基因纯合突变或双重杂合突变中有6例胎血Hb A为0,4例为0.4%3.7%;10例基因纯合突变或双重杂合突变中有6例胎血Hb A为0,4例为0.4%⁰.7%;母血污染1例。结论脐血血红蛋白电泳Hb A值可辅助诊断轻型、中间型及重型胎儿β-地中海贫血,并可以作为母血污染鉴定的一种方法。     

血清sFlt-1/PLGF比值与重度子痫前期的相关性及其预测价值研究

目的探讨和研究可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)和胎盘生长因子PLGF水平的比值变化与重度子痫前期发病的相关性及其预测价值,从而对重度子痫前期的诊断和预测提供参考依据。方法应用电化学发光法对临床上诊断为重度子痫前期的56例患者血清标本作为观察组进行sFlt-1和PLGF水平的检测并计算sFlt-1/PLGF比值,成功检测54例标本,其中有2例标本因溶血无法检测。采集24例正常妊娠的孕妇血清标本作为对照组。采集32例未知妊娠结果的孕妇血清标本作为观察组,预测将来子痫前期发病的情况。结果观察组标本血清中sFlt-1水平明显高于对照组(P<0.001),PLGF水平明显低于对照组(P<0.001),sFlt-1/PLGE值显著高于对照组(P<0.001)。观察组采用ROC曲线确定sFlt-1/PLGF比值的截断值,与最终妊娠结果做对比,灵敏度为80.0%,特异度为92.6%,符合率为90.6%。结论可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)和胎盘生长因子PLGF的比值与重度子痫前期的发病有明显的相关性,在预测重度子痫前期发生方面有一定的价值。     

广东省地贫基线调查中影响地贫高风险夫妇进一步干预的因素分析

目的了解广东省地贫基线调查中地贫高风险夫妇进一步干预的因素分析。方法以广东省2012年地贫基线调查中81对地贫基因同型携带夫妇为调查对象,采用问卷方式调查地贫产前检查情况及未完成的原因等。结果 81对夫妇中,17对完成了产前地贫规范化检查及产前诊断,64对未完成,其主要原因有医生建议不足和患者对地贫了解不足。结论加强医务人员的地贫预防控制知识和技能培训,做好地贫健康教育宣传,是地贫防控工作中重要环节之一。     

瘦素及其受体系统在小鼠胚泡着床过程中子宫内膜的表达

目的:探讨瘦素(leptin)及其受体(Ob-Rb)在小鼠胚泡着床过程中子宫内膜的表达规律,以明确其在胚泡着床过程中的可能作用.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测小鼠胚泡着床过程中子宫内膜leptin及其受体(Ob-Rb)的表达.结果:leptin在胚泡着床过程中在小鼠子宫内膜也都有表达,各时期的表达水平差异不明显(P＞0.05);Ob-Rb在胚泡着床过程中在小鼠子宫内膜也都有表达,各时期的表达水平差异(P＜0.01),且在孕期第4天表达水平最高,在5到7天仍然维持在一定水平.结论:瘦素及其受体(Ob-Rb)可能在胚泡着床过程中发挥作用,同时也可能参与着床后胚胎的生长发育.     

HPLC法测定尿免疫化学非反应性白蛋白及其在早期诊断儿童糖尿病肾病中的意义

目的： 研究尿免疫化学非反应性白蛋白的检测对早期诊断儿童糖尿病肾病的意义,探讨HPLC法测定尿白蛋白的应用价值。方法: 收集58份糖尿病患儿的随机尿标本,分别用高效液相色谱法（HPLC）和免疫比浊法对其进行微量白蛋白检测。结果: 标准品和尿液标本的白蛋白出峰时间均为14.3min,58例糖尿病患儿尿液中,由HPLC法和免疫比浊法测定的尿白蛋白分别为9.6-195.1 mg/L和0-158.6 mg/L,在每份标本中HPLC法的测定结果均高于免疫比浊法（P<0.05）。HPLC法检出的微量白蛋白尿41例（70.7%）,免疫比浊法检出22例（37.9%）。结论: HPLC法能检出全部的尿白蛋白,比免疫化学法检测出更多的尿微量白蛋白,可更早期诊断糖尿病患儿是否伴有持续性白蛋白尿。