CD3／CD28协同刺激诱导抵抗和清除HIV-1感染的检验研究与细胞亚群分析

目的通过CD3／CD28抗体协同刺激活化原代CD4^＋ T细胞,以复制具有抵抗和清除HIV-1能力的“Levine现象”,建立相关机理研究的实验模式,分析效应细胞的亚群特征。方法从外周血单个核细胞中分选高纯度的CD4’T细胞,以PHA／IL-2为对照,经CD3／CD28抗体刺激培养后,以CD45RO、CD62L和CCR7进行单细胞流式分析,鉴定细胞亚群及CCR5、CXCR4表达水平,以实时荧光定量法测定培养上清中的病毒载量。结果CD3／CD28抗体刺激下CD4^＋ T细胞明显增殖活化,原态细胞减少,明显转为记忆细胞表型,特别是M2亚群和TCM亚群细胞增多,未发现典型的TEMRA亚群。与PHA／IL-2相反,CD3／CD28抗体明显下调CCR5,并使早期感染者的病毒载量始终维持低于检出线水平（〈50IU／m1）。结论本研究以“Levine现象”为线索,验证和复制了诱导靶细胞抵抗和清除HIV-1感染的研究体系,为进一步探索新的防治HIV／AIDS的细胞分子机理奠定了基础。