超声靶向微泡破坏技术介导报告基因对骨骼肌基因转染及不同给药途径的作用评价

目的 探讨超声靶向微泡破坏(UTMD)对小鼠骨骼肌基因转染的有效性,比较不同给药途径及报告质粒转染效率的差异.方法 实验随机分为单纯质粒注射组(P)、质粒+微泡组(P+MB)、质粒+超声辐照组(P+US)、质粒+微泡+超声辐照组(P+UTMD)4组.将绿色荧光蛋白(GFP)质粒或红色荧光蛋白(RFP)质粒分别与微泡(或生理盐水对照)混合,将混合物分别予以局部注射(单侧鼠胫骨前肌)和尾静脉注射,进行或不进行超声辐照,辐照频率为3 MHz、声强为1.0 W/cm2,辐照2 min,7d后处死小鼠,分别取各组小鼠的肝、心、骨骼肌组织制备冰冻切片.应用激光共聚焦显微镜检测各组小鼠骨骼肌组织荧光蛋白质粒GFP、RFP的转染效率;分析P+UTMD组小鼠肝脏、心脏组织中的荧光素酶活性;苏木精-伊红(HE)染色观察P+UTMD组小鼠肝、心、骨骼肌组织的病理学改变;对比P+UTMD组小鼠局部肌肉注射和尾静脉注射时不同的给药途径下肝、心、骨骼肌组织基因转染的效果.结果 单纯质粒注射组骨骼肌组织每个视野只有少数细胞表达RFP和GFP,表达率为(1.83±1.21)％、(1.18±0.25)％,P+MB组和P+US组的RFP、GFP表达率与单纯质粒注射的效果相当[(2.33±1.39)％、(3.42±1.09)％和(3.48±0.18)％、(2.52±0.33)％];而P+UTMD组RFP、GFP的表达率为(23.96±2.13)％、(25.69±1.98)％,显著高于其他3组(P＜0.05).P+UTMD组小鼠部分肝脏和心脏中均有较微弱的荧光表达,HE染色未发现UTMD对肝、心、骨骼肌组织造成明显的损伤,完整性良好,无感染、出血、水肿及细胞死亡.直接肌肉局部注射质粒联合UTMD能显著增强小鼠骨骼肌局部的基因转染,显著优于尾静脉注射(P＜0.05).结论 UTMD可有效促进基因转移,局部注射联合UTMD能显著增强骨骼肌局部基因转染,是一种安全、高效的基因转染新技术.     

建立某三甲医院高血压门诊随访管理系统

目的通过对医院高血压门诊随访系统的建立,对医院长期就诊的高血压患者进行管理,从而明确医院高血压的达标率及服药依从性、血压控制情况等指标。方法抽取海南医学院第一附属医院于2019年1-12月,此12个月时间段内心血管内科就诊的高血压患者175例(应用高血压门诊随访管理系统后)。同时抽取海南医学院第一附属医院于2018年1-12月,此时间段内心血管内科就诊的高血压患者175例(应用高血压门诊随访管理系统前)。结果相较于高血压门诊随访管理系统应用前,对高血压患者应用高血压门诊随访管理系统后的6个月血压达标率、12个月血压达标率更高(P<0.05);相较于高血压门诊随访管理系统应用前,对高血压患者应用高血压门诊随访管理系统后的饮酒率、吸烟率、超重率降低(P<0.05),健康生活行为明显改善,高血压患者的服药依从明显提高(P<0.05);相较于高血压门诊随访管理系统应用前,对高血压患者应用高血压门诊随访管理系统后的收缩压和舒张压更低(P<0.05)。结论高血压门诊随访管理系统的应用,能够明确高血压管理的相关指标,有针对性的对患者血压波动进行干预,及时纠正或维持治疗方案,可为高血压等相关疾病的治疗提供可靠的参考依据。     

中西医结合治疗肠易激综合征的体会

中西医结合治疗肠易激综合征的体会福建中医学院卫生所（福州３５０００３）郑婉肠易激综合征（ＩＢＳ）是以腹痛、腹胀、腹泻、排便习惯和大便性状异常的肠道功能性疾病，笔者近年来对３０例患者运用中西医结合治疗，获得满意疗效，现报告如下：临床资料１一般资料３０...     

金沙藤石油醚部位化学成分的气相色谱-质谱联斥分析

目的对金沙藤石油醚部位的低极性成分进行分析。方法采用石油醚萃取金沙藤药材总提液中的低极性成分,气相色谱-质谱法分析,面积归一化法测定各组分的相对含量。结果在最佳的分析条件下,经毛细管色谱柱分离,共得到了36个成分,经谱库检索确认了其中的25种成分,占总组分的96．09％。金沙藤石油醚部位中的低极性成分主要为植物甾醇、长链脂肪酸及其酯类。结论本方法具有快速、准确的特点,可有效用于金沙藤药材成分的分析鉴定。     

半乳糖凝集素-3对低氧性肺动脉高压小鼠肺组织氧化应激和纤维化的调节作用及其机制

目的 探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)对低氧性肺动脉高压(HPH)小鼠肺组织氧化应激和纤维化的调节作用及相关分子机制。方法 构建HPH小鼠模型，随机分为模型组(HPH组)、Gal-3抑制剂柑橘果胶(CP)组、CP+TGF-β1/Smad2信号通路激活剂SRI-011381组(CP+SRI-011381组),每组12只。以常氧环境下饲养的12只小鼠作为正常对照组(control组)。4周后，采用右心导管法检测右心室收缩压(RVSP);称重法检测右心室肥厚指数(RVHI);HE染色观察肺组织病理形态学；Masson染色观察肺组织纤维化情况；试剂盒法检测肺组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)]水平；免疫组织化学染色法测定肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)蛋白表达；qRT-PCR法检测肺组织中Gal-3基因表达；Western blot法检测肺组织中Gal-3、转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad2信号通路蛋白表达。结果 与control组比较，HPH组小鼠肺血管壁...     

维生素C联合免疫球蛋白治疗儿童病毒性心肌炎的效果

目的探讨维生素C(Vitc)联合免疫球蛋白治疗病毒性心肌炎患儿的临床效果及心肌重塑情况。方法选取2018年1月-2019年12月海南医学院第一附属医院心内科收治的80例病毒性心肌炎患儿,按随机数字表法将其分为研究组(n=40)和对照组(n=40)。对照组给予常规治疗,研究组在此基础上采用Vitc联合免疫球蛋白进行治疗,两组均治疗2周。比较两组患儿临床疗效,血清炎症因子[白细胞介素-18(IL-18)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)],心肌酶指标[肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)]及心脏功能指标[心脏指数(CI)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF)]变化。结果治疗2周后,研究组治疗总有效率为92.50%(37/40),高于对照组的75.00%(30/40),两组比较差异有统计学意义(χ²=4.501,P=0.034);治疗后,两组血清IL-18、MIP-1α、ICAM-1水平较治疗前均降低(P<0.05),且研究组指标水平均低于对照组(P<0.05);治疗后,两组血清CK、CK-MB、LDH、HBDH水平较治疗前均降低(P<0.05),且研究组指标水平均低于对照组(P<0.05);治疗后,两组心脏功能指标CI、LVFS、LVEF水平较治疗前均升高,且研究组指标水平均高于对照组(P<0.05)。结论 Vitc联合免疫球蛋白治疗病毒性心肌炎,可显著降低患儿血清IL-18、MIP-1α、ICAM-1水平,减轻炎症,并能增强患儿心功能,改善心肌重塑,进而有助于提高疗效。     

鼻塞式同步间歇指令通气在早产儿原发性呼吸暂停中的应用

目的分析鼻塞式同步间歇指令通气(n SIMV)在早产儿原发性呼吸暂停(AOP)中的临床应用效果。方法应用n SIMV模式治疗AOP早产儿共22例,与既往应用鼻塞式持续气道正压通气(n CPAP)模式治疗的AOP早产儿共22例进行分析,比较两组患儿治疗前后临床症状、血气指标、治疗效果及预后的变化。结果经n SIMV模式治疗的婴儿每小时呼吸暂停发生频率以及心率下降频率比经n CPAP模式治疗的早产儿明显降低,差异有显著性意义(P<0.05),n SIMV组需气管插管行呼吸机通气的比率(9.1%)、CO2潴留比率(4.5%)和胃肠道并发症比率(4.5%)明显低于n CPAP组(27.3%、18.2%和13.6%),差异有显著性意义(P<0.05)。结论 n SIMV能更有效地对AOP早产儿进行呼吸支持治疗。     

某院神经内科住院患者肺部感染病原菌分布及耐药性分析

目的调查2008年1月～2010年12月笔者所在医院神经内科肺部感染的病原菌分布及耐药谱的变迁,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对2008～2010年神经内科住院患者痰标本病原菌的分布和抗菌药物敏感性,进行回顾性分析。结果 284株病原菌中依次为革兰阴性杆菌206株(72.5%)、革兰阳性球菌65株(22.9%)、真菌13株(4.6%)。其中排在前6位的致病菌分别为:肺炎克雷伯菌(19.4%)、金黄色葡萄球菌(16.2%)、大肠埃希菌占(12.7%)、鲍曼不动杆菌(12.0%)、铜绿假单胞菌(9.5%)以及阴沟肠杆菌(6.0%);产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为47.2%和43.6%;耐甲氧西林葡萄球菌占69.6%,未发现对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论革兰阴性杆菌仍是神经内科住院患者肺部感染的主要病原菌,肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌其比例呈逐年上升趋势;并且病原菌耐药性高,部分呈多药耐药;神经内科医生应合理选择有效抗菌药物治疗。     

载基因壳聚糖纳米超声微泡转染miRNA诱导Hela细胞凋亡的研究

目的:探讨载Survivin-miRNA的壳聚糖纳米超声微泡对癌细胞凋亡、增殖的影响.方法:实验分为5组,空白对照组、壳聚糖纳米超声微泡组和低、中、高浓度载Survivin-miRNA的壳聚糖纳米超声微泡转染组(分别给予50、100和200 nmol/L miRNA转染).流式细胞术检测各组Hela细胞凋亡指数(AI)和增殖指数(PI),RT-PCR检测靶向Survivin和caspase-3的mRNA表达,荧光分光光度法分析caspase-3活性变化.结果:各浓度转染组细胞AI明显高于对照组(P＜0.05),高浓度转染率最明显(P＜0.05);各浓度miRNA转染组PI明显低于对照组(P＜0.05),高浓度转染组最明显(P＜0.05);各浓度miRNA转染组Survivin mRNA转录水平有不同程度减弱.Caspase-3 mRNA的表达在各组细胞间差异无显著性(P＞ 0.05);各转染组细胞caspase-3活化水平较对照组明显提高(P＜0.01).结论:不同浓度靶向Survivin基因的miRNA能下调Survivin的mRNA表达水平,对caspase-3 mRNA的表达无明显作用,能激活caspase-3无活性前体,从而诱导Hela细胞凋亡,抑制细胞增殖.