Experimental Studyon Anti－tumor Effect of SplenocytesInduced by Anti－CD3McAb，PHA and IL－2

（沈张悦）（邵静芳）（王晓林）（朱慧芬）ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉ－ｔｕｍｏｒＥｆｆｅｃｔｏｆＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＡｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ，ＰＨＡａｎｄＩＬ－２￥ＳＨＥＮＧｕａｎ－ｘｉｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｌｉ...     

白血病骨髓瘤单抗对白血病细胞株细胞内环核苷酸的影响

本文应用放射免疫测定法，检测了单克隆抗体作用于相应白血病瘤细胞后细胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ的含量变化。结果发现：抗原、抗体比例在８０：１时经ＭｃＡｂ作用１６－２４ｈ后，瘤细胞内ｃＡＭＰ含量明显高于对照组，ｃＧＭＰ含量明显低于对照组（Ｐ＜０００２－０００１）。从而提示：ＭｃＡｂ可通过对细胞膜作用，调控细胞内ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ的水平。本文还对ＭｃＡｂ作用深度及作用时间进行了探讨。     

可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性

目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。     

白血病骨髓瘤单抗对白血病细胞株细胞内环核苷酸的影响

本文应用放射免疫测定法,检测了单克隆抗体(λ-44-5-15,λ26-4-15,SMb,OKT10和抗B)作用于相应白血病瘤细胞后细胞内cAMP、cGMP的含量变化。结果发现:抗原、抗体比例在80∶1时经McAb作用16～24h后,瘤细胞内cAMP含量明显高于对照组,cGMP含量明显低于对照组(P<0002-0001)。从而提示:McAb可通过对细胞膜作用,调控细胞内cAMP和cGMP的水平。本文还对McAb作用浓度及作用时间进行了探讨。     

肝癌患者T淋巴细胞亚群及红细胞免疫粘附功能的研究

为了解肝癌（HCC）患者的免疫状况,用间接免疫荧光法检测其外周血T淋巴细胞亚群,并用红细胞酵母商花环试验测定了红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）和红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）。结果显示,HCC患者CD3+、CD4+及CD4+／CD8+比值明显低于正常人（P＜0．01）,而CD8+明显高于正常人（P＜0．01）;且HCC患者RBC-C3bRR明显降低（P＜0．01）,而RBC－ICR明显升高（P＜0.01）。结果表明：HCC患者存在,淋巴细胞及红细胞免疫功能障碍,此可作为判断肝癌发生发展的重要指标,并提示对HCC患者可采用免疫调节剂进行治疗。     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

目的：构建高靶向性基因转移及表达系统，并研究其介导HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法： 通过重组技术分别构建antiTfR ScFvGAL4融合蛋白表达载体ScFvGAL4pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列（GAL4rec）的HSVtk真核表达载体pEBAF/tkGAL4rec。IPTG诱导后，利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tkGAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2，SMMC7721及A549。潮霉素筛选后，MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果：双酶切鉴定、SDSPAGE电泳及测序分别证明antiTfR ScFvGAL4融合蛋白及重组pEBAF/tkGAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中，高分泌AFP(845 ng/ml) 的HepG2/tk细胞对GCV很敏感，且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关；而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感；不分泌AFP 的A549/tk细胞则不敏感。结论：双靶向组织特异性HSVtk/GCV抗瘤系统构建成功，并显示出很好的靶向性。     

Effects of Cimetidine on IL－2 and T Suppressor Cell Function in Rats with Obstructive Jaundice

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣｉｍｅｔｉｄｉｎｅｏｎＩＬ－２ａｎｄＴＳｕｐｐｒｅｓｓｏｒＣｅｌｌＦｕｎｃｔｉｏｎｉｎＲａｔｓｗｉｔｈＯｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅＪａｕｎｄｉｃｅＤＩＮＧＸｉａｎ－ｚｈｏｎｇ（丁显仲）；ＬＩＨｕａ（李桦）；ＸＩＯＮＧＳｈｕ－ｔａｏ（熊叔...     

大鼠胰岛细胞转染Wee1Hu基因延长异种胰岛细胞移植后存活时间

目的 探讨大鼠胰岛细胞转染Wee1Hu基因对异种胰岛细胞移植后存活时间的影响。方法 以Wistar大鼠为供者，Balb／c糖尿病小鼠为受者，进行异种胰岛细胞移植。实验分为2组，每组20只。实验组：将转染Wee1Hu基因的1×10^6个供者胰岛细胞悬于0．5ml无菌生理盐水中，注射至受者的腹腔；空白对照组：将1×10^6个空载体胰岛细胞用与实验组相同的方法注射至受者腹腔。实验组和空白对照组的部分受者在移植前1周腹腔注射降植烷0．5ml，并于胰岛细胞移植后开始口服环孢素A30mg／kg，直至实验结束。监测2组胰岛细胞移植后的胰岛素释放功能及存活时间。结果 胰岛细胞移植后，空白对照组的受者均维持高血糖，且体重持续下降，平均生存时间为（18±2．5）d；实验组的受者血糖在2d内均降至正常，且体重增加，生存时间延长（38±3．5）d；两组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。空白对照组维持正常血糖时间为（8±2．3）d，而实验组为（10±2．5）d。实验组中采用免疫抑制剂治疗的受者，长期维持正常血糖，平均维持时间超过30d，与空白对照组中采用免疫抑制剂治疗的受者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 大鼠胰岛细胞转染Wee1Hu基因可延长异种胰岛细胞移植后的存活时间，与免疫抑制剂协同作用时效果更佳。     

PHA、抗CD_3单克隆抗体、LI-2诱导牌细胞培养上清液抗肿瘤效应的研究

本文探讨了PHA、CD_3单克隆抗体、IL-2体外诱导正常人脾细胞培养上清液抗肿瘤效应及其对LAK细胞抗肿瘤效应的增强作用。结果显示，IL-2诱导脾细胞的培养上清液在体外不仅具有直接杀伤肿瘤细胞效应，并且能增强LAK细胞的抗肿瘤作用。PHA、抗CD_3单克隆抗体和IL-2联合刺激可增强脾细胞培养上清液杀伤肿瘤细胞效应。     

肝癌患者外周血LAK细胞活性的临床研究

目的：研究肝癌患者外周血ＬＡＫ细胞活性。方法：作者应用ＭＴＴ法和间接免疫荧光法分别检测２７例肝癌、１９例肝硬化患者和２０例人健康人外周血ＬＡＫ细胞活性和单个核细胞ＩＬ－２Ｒ表达，结果：结果表明肝癌患者外周血ＬＡＫ细胞活性与ＩＬ－２Ｒ表达均显著低于正常人和肝硬化患者（Ｐ〈０．００１）；肿瘤直径〉５ｃｍ的肝癌患者ＩＬ－２ＲＲ表达显著低于≤５ｃｍ者（Ｐ〈０．０５）；有门静脉癌栓者ＩＬ－２Ｒ表达明显低于无