组织、血液、尿中DA、NE和E的高效液相与荧光分光光度计联机检测法探讨

本文是利用高效液相与荧光分光光度计联机测定组织、血液、尿中的DA、NE和E的一种方法,取样量少,结果精确。     

微粒体制备技术的实验改进

本实验用改良密度梯度离心法对细胞各组份进行了逐级分离,成功地分离了微粒体并制备了较纯的粗面内质网和滑面内质网。在分级分离的各个阶段均进行了形态学观察及生化学检定,特别是最后得到了电镜证实。经分离纯化的滑面内质网杂蛋白显著减少而标志酶活性明显增高。在离心系统中,用KBr代替昂贵的CsCl,SDS代替去氧胆酸钠取得满意的分离效果。从而为滑面内质网及粗面内质网的分离和纯化建立了一种简单、经济、准确、可靠的方法。该技术的建立将为细胞的超微结构,生物工程,生物膜功能及酶促合成反应动力学等重要课题的深入研究提供了有效的手段。     

高效液相色谱柱的原理、性能与选用方法

<正> 高效液相色谱是在气相色谱的理论基础上发展起来的新技术。它采用高压泵组及密度梯度调配器输送流动相,经色谱柱把样品中各组分进行分离,再结合紫外、荧光、示差等不同检测器,通过微型机自动调控与计算数据,最后把分析结果显示与记录下来。此项技术的关键是掌握国外厂家出产的各种液相色谱柱的特性并从繁多的种类中选出最佳柱子供所分析的样品使用。为此我们参照Beckman,LKB、Waters等公司的产品资料结合实际从原理到应用阐述如下。     

大鼠内生致热原性发热时不同脑区精氨酸加压素和亮氨酸脑咖啡肽含量的变化

本实验用大鼠静脉注射内生致热原（ＥＰ）复制发热模型。观察发热反应及发热不同时相、不同胞区精氨酸加压素（ＡＶＰ）和亮氨酸脑啡肽（Ｌ－ＥＫ）含量的变化。结果表明：大鼠ＥＰ双相热时下丘脑组织ＡＶＰ含量在双峰热的两个高峰期和体温恢复期均明显高于对照组，ＡＶＰ含量与发热第一时相和第二时相体温升高有相关关系。而脑干和大脑皮质组织中ＡＶＰ含量则无明显变化。下丘脑组织、脑干组织中Ｌ－ＥＫ含量在双峰热的两个高峰期均高于对照组，恢复期脑干组织中Ｌ－ＥＫ含量仍高于对照组。大脑皮质组织中Ｌ－ＥＫ含量无明显变化。提示ＥＰ性发热时中枢的ＡＶＰ和Ｌ－ＥＫ可能参与体温调节反应。     

密度梯度离心技术

<正> 密度梯度离心技术的发展,为进一步分离纯化亚细胞组分、染色体、病毒、RNA、DNA及其它生物大分子提供了有效的方法,它已成为细胞生物学、超微结构、分子生物学、免疫学、生物工程学等实验研究的得力手段。     

各类型转子不同离心半径的通用计算公式

本文提出了高速与超速离心机所用各类不同型号转子的离心半径的通用计算公式。同时对国内外60多种转子进行了计算和验证。并把结果列成两张表以便实际应用。     

微型机在超速离心技术中的应用

<正> 在超速离心技术中,计算转子的各项分离特性参数,和各种不同颗粒的沉降时间,是常规性的工作。这些参数的数值比较庞大,以水平型转子RPS65T为例,当每分钟转数(RPM)为65,000转时,其角速度ω~2=46.33×10~6,它的Pi=49.8×10~8.如此大的数字用笔和计算器计算,既繁琐又容易发生错误。采用微型机计算后大大地节省了时间,并能把所有计算程序和结果全部打印出来,录存在磁盘上备用,效果令人满意。     

维生素D_3体外羟化反应的实验研究

本文利用肝脏羟化酶及肾脏羟化酶,对维生素D_3的体外25位羟化作用及1α位羟化作用进行了初步研究。结果表明:应用佝偻病鸡的肝线粒体及微粒体悬液,分别与维生素D_3、NADPH孵化系统在体外进行孵育,均可得到羟化产物—25-OH-D_3,线粒体维生素D_3-25羟化酶的活性为0.49Pmol 25-OH-D_3/2h·10mg pr,微粒体为0.28 pmol 25-OH-D_3/2h·10mg pr。二者转化率分别为11.9％与5.8％,线粒体25-羟化酶活性明显高于微粒体。应用佝偻病鸡的肾线粒体悬液,与25-OH-D_3、NADPH孵化系统在体外进行孵育,可以获得羟化产物-1a,25-(OH)_2-D_3,其转化率为37.5％。     

光电黑度计

我校本着“独立自主,自力更生”的原则,试制成一台光电黑度计。该仪器是专为采用组织放射自摄影法研究放射性物质在动物组织器官中分布、蓄积情况而设计制作的。主要用于测定组织放射自摄影胶片的黑度。最小测量面积可达0.5毫米,适用于对组织器官微细结构中的放射性物质进行定量测定。如采用胶片法进行放射性防护时,也可应用此仪器对胶片黑度进行测定。在工业上亦可用于测定金相法放射自摄影的胶片。     

大鼠内生致热原双相热各期不同脑区神经降压素含量的变化

用粗制家兔内生致热原（ＥＰ），给大鼠静脉注射复制双相热模型。通过放射免疫测定方法（ＲＩＡ）观察了大鼠ＥＰ双相热各期不同脑（下丘脑，中脑，皮质）组织神经降压素（ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ，ＮＴ）的含量变化。结果表明：ＥＰ所致大鼠双相热各期下丘脑组织ＮＴ含量均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。中脑组织，在发热间歇期和发热第二时相ＮＴ含量高于对照组（Ｐ＜０．０５）。皮质ＮＴ含量在发热第一时相高于对照组（Ｐ＞０