产虾青素酿酒酵母工程菌的构建

目的 对酿酒酵母固有的β-胡萝卜素代谢途径进行扩展,构建能够合成虾青素的酿酒酵母工程菌。 方法 对不同来源的虾青素合成基因 crtZ（β-胡萝卜素羟化酶）与 crtW （β-胡萝卜素酮化酶）进行随机组合,采用overlap PCR 技术构建串联表达质粒,并将其导入产β-胡萝卜素酿酒酵母工程菌内,发酵产物经 HPLC 和 UPLC-MS鉴定,确定其成分。 结果 构建出8种 TEF1p-crtZ-ADH1t-PGK1P-crtW-CYC1t组合的串联表达模式,其中基因组合分别为 crtZ1-crtW1, crtZ1-crtW4工程菌 HCCB08571、HCCB08572产生了虾青素;工程菌 HCCB08566、HCCB08568、HCCB08573未检测到产物虾青素,而出现了中间产物玉米黄质和斑蝥黄质。 结论 成功构建了产生虾青素及其中间体的酿酒酵母工程菌。