人工牛黄对实验性惊厥大鼠脑内海马及门区神经元丢失的抑制和GAD免疫反应阳性细胞的保护作用研究

目的:研究人工牛黄对致痫大鼠行为的影响，海马及门区神经元丢失情况和谷氨酸脱羧酶(GAD)免疫反应阳性细胞数目的改变，探讨该药的抗惊厥作用。 方法: 采用戊四唑急性惊厥模型，参照Racine标准观察行为学表现，用Nissl染色作海马及门区神经元计数，用免疫组织化学方法作GAD免疫反应阳性细胞计数。 结果: 牛黄防治组惊厥发作的潜伏时间较对照组长，发作次数较惊厥组少，而在海马及门区的神经元和在海马的GAD阳性细胞的丢失数量较惊厥组的少。 结论:人工牛黄能延长惊厥发作的潜伏期，减少发作次数，减轻神经元丢失和保护GAD免疫反应阳性细胞。     

地菍总黄酮体外抗小鼠肝线粒体脂质过氧化作用的研究

目的:研究地菍总黄酮(Melastoma dodecandrum flavonoids,MDF)清除氧自由基与抗脂质过氧化作用.方法:以黄嘌吟-黄嘌吟氧化酶系统产生的超氧阴离子自由基,研究MDF对氧自由基的清除作用;分别以NAPDH-维生素C和Fe2 -半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化的产物,研究MDF抗脂质过氧化的抑制作用.结果:MDF能有效地清除氧自由基,其IC50为46.4mg/L;能抑制小鼠肝匀浆自氧化,能有效地抑制NAPDH-维生素C和Fe2 -半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化作用,对肝线粒体有保护作用,并呈浓度依赖作用.结论:MDF对氧自由基有清除作用,并能预防性对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤,对肝线粒体的氧化性损伤有保护作用.     

枸杞多糖对大鼠海马缺血再灌注损伤的干预作用

目的:观察枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对大鼠海马缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性和白介素6(interleukin 6,IL-6)含量的影响。方法:选用健康成年SD大鼠,雌雄不拘,随机分成3组:对照组、缺血再灌注组和枸杞多糖组。脑缺血模型采用线栓法致大脑中动脉阻闭,2h后抽出栓塞线,再灌注24h后处死大鼠,测定海马SOD活性和IL-6的含量。结果:(1)枸杞多糖对缺血再灌注大鼠海马SOD活性的影响:缺血再灌注组大鼠海马SOD活性显著低于对照组(P<0.01),枸杞多糖组大鼠海马SOD活性低于对照组,但显著高于缺血再灌注组(P<0.01)。(2)枸杞多糖对缺血再灌注大鼠海马IL-6的影响:枸杞多糖组大鼠海马IL-6含量与正常对照组相比差异没有统计学意义,而与缺血再灌注组大鼠相比明显下降(P<0.05)。结论:枸杞多糖可提高缺血再灌注大鼠海马SOD活性,降低IL-6的含量,对缺血再灌注损伤有保护作用。     

辛伐他汀对局部脑缺血大鼠线粒体的抗氧化效应

目的:观察辛伐他汀对局部脑缺血损伤大鼠的神经保护作用及其线粒体机制。方法:实验于2005-03/08在广州医学院生理实验室进行。取72只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、缺血模型组、辛伐他汀组3组,每组24只。辛伐他汀组大鼠灌胃辛伐他汀20mg/kg,1次/d,连续7d,最后一次灌胃1h后缺血模型组和辛伐他汀组大鼠线栓法复制左侧脑缺血2h再灌注模型,正常对照组仅分离动脉,不缺血。观察各组大鼠术后24h神经功能评分(3～18分,评分越高越好)、脑含水量、脑梗死体积以及脑组织线粒体超氧化物歧化酶、丙二醛、NO和Na -K ATPase的改变。结果:经补充后72只大鼠进入结果分析。①神经功能评分:辛伐他汀组明显高于缺血模型组(15.87±0.83,14.25±0.71,P<0.01)。②脑含水量:辛伐他汀组明显低于缺血模型组[(79.56±1.14)%,(81.13±1.36)%,P<0.05]。③脑梗死体积:辛伐他汀组明显低于缺血模型组[(173.7±15.92),(239.94±22.01)mm3,P<0.01]。④脑组织线粒体超氧化物歧化酶和Na -K ATPase活性:辛伐他汀组明显高于缺血模型组(P<0.05)。⑤脑组织线粒体丙二醛和NO含量:辛伐他汀组明显低于缺血模型组(P<0.01)。结论:辛伐他汀可能通过抑制大脑中动脉阻断后引起的脑内线粒体脂质过氧化反应,减少自由基的生成,稳定线粒体功能,增加ATP的生成,从而对缺血脑组织产生保护作用。     

大鼠GAD65基因慢病毒载体的构建及其在MSCs中的表达

目的构建谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase 65,GAD65)重组慢病毒表达载体,感染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行鉴定。方法 PCR法扩增GAD65基因,构建LV5-GFP-GAD65慢病毒载体;与包装质粒共转染293T细胞包装病毒;将慢病毒感染大鼠MSCs,荧光显微镜鉴定转染率,Western blot检测GAD65的表达。结果双酶切及测序结果表明LV5-GFP-GAD65慢病毒载体构建成功;包装病毒产生的病毒液滴度为5×107TU/ml;慢病毒感染大鼠MSCs的转染率高于90%,Western blot结果显示GAD65蛋白表达比对照组明显升高。结论 GAD65重组慢病毒载体构建成功,包装得到高浓度病毒液,感染大鼠MSCs能稳定过表达GAD65蛋白,为进一步探索侧脑室注射基因化的MSCs治疗癫痫奠定实验基础。     

抽动障碍儿童EEG 样放电的临床意义

目的:探讨抽动障碍的视频脑电图(V EEG)异常率及样放电的临床意义.方法:对588例抽动障碍患者进行V EEG检查并分析其波形特征.结果:该组抽动障碍患儿V EEG中,正常范围EEG575例,占97.8%,异常EEG(棘尖波发放)13例,占2.2%.结论:抽动障碍患儿的V EEG异常率并不高,而其中明确与癫相关的样放电更是少数;抽动障碍患儿中的样放电很可能属于正常非癫人群中极少数人所具有的临床下放电的情况.     

虚拟动物实验教学软件在机能实验学教学中的应用研究

本文回顾了虚拟现实技术在医学领域中的应用现状,介绍了虚拟动物实验教学软件在机能实验教学中的应用方法,并对应用效果进行了分析和讨论。     

JNK信号转导通路在NGF抗6-OHDA诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的： 以6-羟基多巴胺(6-OHDA)作用于大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12 cells)以诱导其凋亡,然后在其中分别加入神经生长因子（NGF）及c-Jun氨基端激酶（JNK）阻断剂SP600125,研究在加入NGF后JNK的活性与凋亡的关系。方法: 实验分为对照组、6-OHDA组、NGF组、6-OHDA+NGF组、6-OHDA+JNK阻断剂SP600125组,以流式细胞分析法检测各组PC12细胞的凋亡率,以免疫印迹（Western blotting）法检测各组PC12细胞JNK的活化情况。结果: 6-OHDA导致PC12细胞凋亡,JNK1活性提高;预孵SP600125或NGF15min后再加入6-OHDA则PC12细胞凋亡率及JNK1活性均降低。结论: JNK1参与了6-OHDA致PC12细胞凋亡作用,NGF抗6-OHDA所诱导的PC12细胞凋亡作用与其抑制JNK的活化有关。     

四逆汤对多器官功能障碍综合征大鼠炎症介质和氧化应激的影响

目的 建立大鼠多器官功能障碍综合征(MODS)模型,观察四逆汤(SND)对MODS大鼠炎症介质和氧化应激的影响.探讨SND对MODS器官损伤的保护作用.方法 通过可逆性失血性休克以及静脉注射脂多糖两次打击以建立大鼠MODS模型,将大鼠随机分为空白对照组、MODS模型组和SND治疗组.采用常规病理检查,快速抽取主动脉血作血气分析和心、肝、肾功能有关酶学指标的检测,测定血清SOD、NO含量,以及ELISA法测定血清TNF-α和IL-6的含量.结果 病理检查显示模型组大鼠造模1 d后各重要脏器都有全身炎症反应综合征表现,3 d后更明显,而SND治疗组病变明显减轻;心、肝、肾功能生化指标在模型组明显升高(P<0.01),而治疗组较模型组有显著改善(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比较,模型组大鼠血清SOD水平显著下降而NO水平显著升高,而治疗组除灌胃1 d后血清NO水平仍显著高于空白对照组(P<0.05)外,血清SOD和NO水平与对照组相比无显著差异;模型组和治疗组大鼠血清TNF-α和IL-6含量与空白对照组比较显著升高(P<0.05或P<0.01),且治疗组大鼠治疗3 d后血清TNF-α含量显著低于相应时间的模型组(P<0.05),治疗组大鼠治疗1 d后血清IL-6含量亦显著低于模型组(P<0.05).结论 四逆汤能有效防治MODS的发生和发展,其机制可能与其下调过度的炎症反应、提高机体的抗氧化能力以及减轻自由基损伤有关.     

地心芩总黄酮体外抗小鼠肝线粒体脂质过氧化作用的研究

目的:研究地心芩总黄酮(Melastomadodecandrumflavonoids,MDF)清除氧自由基与抗脂质过氧化作用。方法:以黄嘌吟-黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧阴离子自由基,研究MDF对氧自由基的清除作用;分别以NAPDH-维生素C和Fe2+-半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化的产物,研究MDF抗脂质过氧化的抑制作用。结果:MDF能有效地清除氧自由基,其IC50为46·4mg/L;能抑制小鼠肝匀浆自氧化,能有效地抑制NAPDH-维生素C和Fe2+-半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化作用,对肝线粒体有保护作用,并呈浓度依赖作用。结论:MDF对氧自由基有清除作用,并能预防性对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤,对肝线粒体的氧化性损伤有保护作用。