人参皂苷Rh2对肝癌SMMC-7721细胞增殖和细胞骨架的影响

目的: 探讨人参皂苷Rh₂(Rh₂)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长和细胞骨架的影响。方法: 应用MTT法及流式细胞仪检测不同浓度Rh₂对SMMC-7721细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用;激光共聚焦显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的分布状态;整装细胞电镜术观察细胞核基质-中间纤维系统的变化。结果: MTT法和流式细胞仪分析结果分别显示,40 mg/L Rh₂ 作用SMMC-7721细胞4 d时的抑制率及细胞凋亡率明显高于对照组及10、20 mg/L组,显著差异(P＜0.05);激光共聚焦显微镜下,SMMC-7721细胞经Rh₂处理4 d,F-actin分布均匀,细丝排列整齐,数量增多;而对照组细胞F-actin细丝在细胞内排列紊乱,多呈斑点状分布。整装电镜结果显示,与对照组相比,实验组细胞的中间纤维丰富,均匀地满布细胞中,呈网架状连接的结构。结论: Rh₂能有效抑制SMMC-7721细胞的增殖,增加SMMC-7721细胞的凋亡,并且诱导SMMC-7721细胞骨架发生变化。     

螺内酯对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞P-p38MAPK和TGF-β1变化的影响

目的：研究糖尿病肾病（diabetic nephropath,DN）大鼠肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的表达及螺内酯对其的影响。方法：以高糖孵育大鼠肾小球系膜细胞（mesangial rell,MC）24h,用细胞免疫荧光法检测MC的磷酸化p38MAPK（P-p38MAPK）活性,并用ELISA检测转化生长因子-β1（TGF-β1）分泌状况。p38MAPK特异性抑制剂SB203580及不同浓度螺内酯预处理对其影响。结果：高糖激活p38MAPK,增加RMC的P-p38MAPK活性和TGF-β1的表达;SB203580显著抑制TGF-β1表达（P〈0.01）;螺内酯抑制P-p38MAPK的活化并减少TGF-β1的蛋白表达（P〈0.01）,并随浓度增高,抑制作用增强。结论：p38MAPK可能是糖尿病肾病发生的始动信号之一,螺内酯可能通过抑制p38MAPK磷酸化而减少TGF-β1分泌。     

Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其相关性*

目的：探讨Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及相关性。方法：应用Western blot及免疫组化检测肝癌及相应的癌旁组织中Prdx1、Spy1、p27kip1的表达；免疫共沉淀分析Prdx1、Spy1的相互作用；Western blot分析Prdx1、Spy1相互结合对p27kip1蛋白表达的影响。结果：Prdx1、Spy1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达，与p27kip1表达呈负相关；Prdx1、Spy1相互结合使p27kip1的表达水平下调，此作用与Prdx1的抗氧化物活性无关。结论：Prdx1、Spy1蛋白的表达与肝细胞肝癌的发生发展有关，两者的表达可能在肿瘤的恶性进展中起协同作用，而与p27kip1的表达呈拮抗作用。     

果糖-1,6-二磷酸酶1在食管鳞状细胞癌的表达及意义

目的探讨果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)在人食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及临床意义。方法用western blot检测8例ESCC患者癌组织和配对的癌旁组织中FBP1的表达水平;免疫组化法检测98例ESCC及35例癌旁组织(部分配对)石蜡切片中FBP1的表达水平,并分析FBP1在ESCC和癌旁组织中表达水平的差异及与临床病理参数的关系。结果western blot结果表明,FBP1在ESCC癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P0.05);免疫组化法结果显示,ESCC中FBP1的表达与TNM分期差异有统计学意义(χ2=40.66,P0.01),但与性别、年龄、肿瘤大小等无明显统计学意义(P均0.05)。结论 FBP1表达与ESCC进展有关,可能为食管癌的治疗提供新的思路。     

螺内酯对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1、FN分泌的影响

目的探讨螺内酯对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖的抑制作用及转化生长因子β1（TGF-β1）、纤维黏连蛋白（FN）分泌的影响。方法将大鼠GMCs置于低糖、高糖及高糖＋不同浓度螺内酯中传代培养,并以此分组。采用噻唑蓝法检测各组大鼠GMCs增殖情况,采用ELISA法检测各组TGF-β1、FN分泌情况。结果高糖培养组大鼠GMCs增殖明显高于低糖培养组（P〈0.05）。加入螺内酯后,GMCs增殖受到抑制,与低糖、高糖组比较P〈0.05或〈0.01,且随着螺内酯剂量增加细胞增殖抑制递增。螺内酯可明显减少TGF-β1、FN的分泌（P〈0.05或〈0.01）,并随浓度增高、时间延长抑制作用增强。结论高糖能刺激大鼠GMCs增殖;螺内酯能抑制大鼠GMCs增殖,并可抑制TGF-β1、FN分泌。