抗HPT单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定

目的：制备抗潮霉素B磷酸转移酶(HPT)的单克隆抗体(McAb)，建立一种快速检测转基因作物中该选择标记基因HPT编码蛋白的方法。方法：用基因重组潮霉素B磷酸转移酶(HPT)抗原免疫BALB/C小鼠，采用杂交瘤技术制备McAb。选择不同的抗原决定簇与兔抗HPT多抗配对，建立双抗夹心ELISA检测HPT抗原。结果：筛选出四株稳定分泌抗HPT单抗的杂交瘤细胞株，IgG亚类鉴定均为IgG1，ELISA检测证实单抗可特异性识别细胞培养上清、重组子菌体裂解产物中及纯化出的HPT蛋白。结合位点测定实验表明4株单抗是针对不同的抗原决定簇，与多克隆抗体组成双抗夹心ELISA法，均可较好地检测到HPT抗原。检测的灵敏度为30ng／ml，且与别的无关抗原无交叉反应性。结论：4株杂交瘤细胞株特异性好，亲和力强，组成双抗夹心ELISA法可用于快速、灵敏检测HPT抗原。     

多元化健康教育对血液透析患者健康知识掌握及运动耐量的影响

目的分析多元化健康教育对血液透析患者的影响。方法回顾性分析2018年10月至2019年12月期间在我院接受治疗的50例血液透析患者的临床资料,依据护理模式的不同,将上述入选者进一步划分为对照组(常规护理,25例)与观察组(多元化健康教育,25例),对比两组患者健康知识掌握情况及运动耐量。结果观察组对疾病自我监测、药物治疗、运动锻炼知识掌握率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预前,两组6 min步行距离对比,差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组6 min步行距离长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液透析患者采用多元化健康教育,可提高健康知识掌握度,增加运动耐量,临床效果显著。     

耳针治疗痔瘘术后疼痛40例临床观察

痔瘘术后疼痛是外科最常见症状之一，大多数患者在术后3日内发生疼痛，引起疼痛的主要原因是手术创伤、术后切缘水肿、肛门括约肌痉挛、创面感染、瘢痕形成压迫神经等。除此之外患者的精神心理、个体差异等因素也会产生影响。在临床上我们看到：疼痛剧烈的甚至还会出现患者体力衰竭，导致严重后果。我们对术后疼痛的40例患者运用耳针止痛，取得显著效果，现报道如下。     

附子不同程度的水解对毒性及药理作用的影响

附子系毛莨科植物乌头（Aconitum carmicha-eli Debx）的子根，是常用中药。性大热，味辛；具有回阳、温中、止痛、祛风除湿等作用，但有大毒。重要的有效成分主要为乌头碱类生物碱，其毒性成分主要为乌头碱（Aconitine），海帕乌头碱（Hypa-conitine），美沙乌头碱（Mesaconitine），均属双酯型生物碱。据报导，人口服乌头碱2—3mg，肌注0.2—2.3mg即能中毒致死。常规用水解法（即长时间煎煮）减缓毒性，但具盲目性，水解时宜很难掌握，特别在制备含有附子、乌头的中药制剂中，水解程度难于控制。为此，我们制备了不同水解程度的4个样品，每个样品保持总乌头碱含量一致，而有毒成分含量不同，然后作毒性及药理作用比较，以期找到附子不同程度水解对毒性及药理作用的影响规律，确定最佳水解程度，用以指导临床用药及含有附子、乌头的中药制剂的制备工艺。     

血液净化中心设备管理研究进展

血液净化中心是医院血液透析患者开展血液净化治疗的主要场所。在血液净化中心开展血液净化治疗的患者通常来说免疫功能低下,容易发生感染,并且对设备具有较强的依赖性。因此血液净化中心设备管理质量直接影响着血液透析中心的血液净化治疗效果。这便要求血液净化中心应该不断加强设备管理,提高设备管理质量,为患者的治疗提供更好的服务。因此近些年人们对于血液净化中心设备管理的重视程度不断提高,很多专家关于血液净化中心的设备管理开展了很多研究工作,本文将近些年的研究进展进行综述,以期为血液净化中心的设备管理提供借鉴。     

血液净化中心设备管理研究进展

血液净化中心是医院血液透析患者开展血液净化治疗的主要场所。在血液净化中心开展血液净化治疗的患者通常来说免疫功能低下,容易发生感染,并且对设备具有较强的依赖性。因此血液净化中心设备管理质量直接影响着血液透析中心的血液净化治疗效果。这便要求血液净化中心应该不断加强设备管理,提高设备管理质量,为患者的治疗提供更好的服务。因此近些年人们对于血液净化中心设备管理的重视程度不断提高,很多专家关于血液净化中心的设备管理开展了很多研究工作,本文将近些年的研究进展进行综述,以期为血液净化中心的设备管理提供借鉴。     

转基因水稻中标记基因hpt表达行为的研究

目的探讨转sck基因水稻中标记基因hpt的表达行为。方法对经潮霉素抗性筛选的转基因水稻4个生长发育时期、不同组织的hpt基因进行PCR检测;提取4个生长发育时期PCR检测阳性植株的叶片总RNA,以hpt基因片断为探针进行Northernblot分析,并对不同生长时期的叶片和成熟期的茎部、根部、种子进行双夹心ELISA检测,以同种非转基因水稻M86相应时期的相应部位作阴性对照。结果转基因水稻不同生长时期、不同组织中均能扩出特异的hpt(832bp)片段;Northernblot结果显示,在4个生长发育时期的hpt基因在转录水平均有表达,但是表达水平较低,且不同生长发育时期之间无明显差别;ELISA检测结果显示HPT蛋白在4个生长时期的叶片和成熟期的茎部和根部均有表达,种子中HPT蛋白的含量不超过负对照,不能被检测。结论不同生长发育时期的叶片中hpt基因在转录水平和翻译水平表达均能稳定表达。成熟的种子中不含有可检测水平的HPT蛋白。     

转sck基因水稻中标记基因表达蛋白HPT食用安全性的初步研究

目的针对抗虫转sck基因水稻中标记基因表达蛋白HPT的食用安全性开展初步研究,主要包括该蛋白在大米中的定性、定量研究、可能的膳食摄入量估计及其潜在致敏性评估等。方法将HPT的编码序列插入带有组氨酸标签(His-tag)的原核表达载体PBV222中进行融合表达,通过脲变性和镍柱亲和层析的方法纯化融合蛋白。用纯化后的6His-HPT蛋白免疫家兔和小鼠,分别制备相应的抗HPT多克隆和单克隆抗体,进一步将这两种抗体组成双抗夹心酶联免疫检测体系,用于检测HPT在转sck基因水稻中的表达水平。在致敏性评估方面,首先将HPT序列与已知的致敏原数据库进行比较,再利用模拟的胃肠液环境进行体外消化稳定性实验。结果重组体经表达纯化后获得了高纯度(95%)的6His-HPT融合蛋白,免疫动物后获得了高效价的抗HPT多克隆及单克隆抗体,经免疫印迹检测证明所制备的抗体可与转基因水稻中及纯化出的HPT蛋白形成特异结合带。由这两种抗体组成的双抗夹心酶联免疫检测体系用于检测HPT抗原时的灵敏度为30ng/ml,可检测出转sck基因水稻叶片中HPT蛋白的表达量约为80~150ng/ml;而在相应的转基因大米中未能检出。HPT序列经与已知的致敏原数据库进行比较未见同源性,但在体外消化稳定性实验中,HPT蛋白在模拟的胃肠液环境中均迅速降解。结论就目前的检测水平来看,转sck基因大米中所含的HPT蛋白水平极低,且对消化环境不稳定,推测该标记基因表达蛋白不易引起可观察到的食用安全性问题。但利用表达的HPT蛋白直接进行动物急性毒性及致敏性实验的工作仍有待进行,有关的结果将进一步报道。     

复方三生口服液乌头碱的限量检查

目的　探讨乌头碱限量的检查方法 ,以保障复方三生口服液在临床中的用药安全。方法　筛选几种展开条件 ,确定在最佳展开条件下乌头碱的灵敏度和复方三生口服液中乌头碱的检出限量。结果　氯仿∶甲醇∶水 (80∶2 0∶2 )为展开系统 ;I2 显色 ,在此条件下 ,乌头碱灵敏度为 0 .8μg ,点样量在一定范围内 ,乌头碱检出不受任何影响 ,并可随点样量增加 ,色斑相应增大。在复方三生口服液中 ,乌头碱检出限量实际值在 5 .3mg/L以下。结论　复方三生口服液临床使用安全。     

转基因技术——新的绿色革命

转基因是否安全转基因技术本身是中性,说不上更安全或更不安全。而我认为转什么基因最终造成了转基因本身是否安全,有可能增加安全,有可能产生风险,但是技术本身没有问题。世界上不会有什么绝对安全的东西,科学工作者总是极力量化风险,始终不可能说绝对没有风险,而只能说风险可以忽略,或者说风险几乎为零。公众对风险的理解往往暗含了风险与收益的综合分析。风险的概率越大,大家越不接受。但是争论的背景很复杂,有文化上的背景,商家利益以及国际贸易,尤其是穷国反对富国对穷国基因资源的掠夺等因素。在欧美两个地区,管理理念有很大差别,欧洲…