河北省首例人感染H7N9禽流感突发事件公共卫生风险评估

目的通过风险评估以确定H7N9禽流感疫情在廊坊市扩散、流行的可能性,为终止突发公共卫生事件Ⅳ级响应提供科学依据。方法检验方法为实时荧光PCR法,评估方法为专家会商法,对此次人感染H7N9禽流感疫情的风险因素进行识别、分析,做出风险评价。结果此次人感染H7N9禽流感疫情在廊坊市传播流行的风险等级为低,不排除再发生病例的可能性。结论近年来突发公共卫生事件逐步引起重视,风险管理的核心环节是进行风险评估。风险评估工作已成为预警、评价突发公共卫生事件的一种有效手段。当风险评估内容还没有可依据的固定的评估工具或评估框架时,无法进行较为准确的定性、定量的评价,专家会商法成为突发事件公共卫生风险评估的首选方法。此次廊坊市在处理河北省首例人感染H7N9禽流感疫情中,运用专家会商法开展突发事件公共卫生风险评估,指导疫情防控工作,取得了很好的实效。     

保妇康栓对人乳头状瘤病毒抑制作用的实验研究

目的:探讨中药制剂保妇康栓对人乳头状瘤病毒(HPV)16亚型的抑制作用。方法:以不同浓度的含保妇康栓培养基体外培养宫颈癌细胞系CaSki和宫颈永生化细胞H8,相差显微镜下观察活细胞形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝比色法以及流式细胞术技术检测不同浓度保妇康栓对细胞增殖的影响;应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测人乳头状瘤病毒HPV16亚型E6E7的表达。结果:不同浓度的保妇康栓可以抑制细胞的增殖;在药物作用下,CaSki细胞G1期细胞增加(P<0.05),G2、S期细胞减少(P<0.05),CaSki细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),而对H8细胞周期和凋亡率影响不明显;两种细胞HPV16E6E7基因片段mRNA表达均明显低于对照组(P<0.01)。结论:保妇康栓在体外抑制宫颈癌细胞系CaSki和宫颈永生化细胞H8增殖,其机制可能是通过抑制HPV16E6E7表达而抑制肿瘤细胞生长。     

循环肿瘤DNA定量方法的建立及其临床应用的初步研究

目的 建立荧光核酸染料PicoGreen用于循环肿瘤DNA定量的方法并以乳腺癌为例初步探讨其在肿瘤辅助诊断中的作用. 方法 采用QIAamp DNA blood kit提取血清中的循环肿瘤DNA并分析其提取效率,分析PicoGreen荧光分光光度法对微量DNA进行精确定量的范围和可靠性.以受试者工作特征曲线(ROC)判断循环肿瘤DNA应用于乳腺癌辅助诊断的可行性. 结果 QIAamp DNA blood kit提取血清中DNA的效率在37.8%～46.2%,平均43.4%.用PicoGreen荧光法,可检出低至1 ng的循环肿瘤DNA,并且在1～500 ng范围内呈现良好的直线关系.用此法检测乳腺癌组血清DNA浓度为(169.70±124.10)μg/L,对照组乳腺良性病变为(51.70±29.04)μg/L,健康人为(54.30±36.84)μg/L.经Mann-Whitney检验二者差异有统计学意义.ROC下面积为0.899(95%CI为0.848～0.951),当DNA诊断界值为96.0/μg/L时,灵敏度为78.2%,特异度为90.0%,提示血清DNA浓度有较好的诊断应用价值. 结论 应用PicoGreen荧光分光光度法可有效检测微量的血清循环肿瘤DNA,且乳腺癌组循环肿瘤DNA浓度明显高于对照组,提示循环肿瘤DNA为有价值的乳腺癌辅助诊断指标之一.     

低温细胞生存系统长期保存CHO细胞的初步研究

目的验证基因工程细胞空间搭载系统在低温 ( 18℃ -3 0℃、无源等条件下保存细胞的可行性 ,观察此系统对生物工程细胞CHO(dhfr-)生长特性的影响。方法将CHO (dhfr-)生物工程细胞株在空间搭载系统中培养 2 5d后 ,利用光镜、MTT法、FCM分析、3 H掺入法及染色体分析观察细胞生长特性。结果细胞低温培养 2 5d后 ,CHO(dhfr-)细胞呈多种形态 ;细胞周期变化差异不显著 ;染色体无断裂 ;细胞生长速度显著减慢 ;大分子生物合成显著增加。结论空间搭载系统搭载CHO(dhfr-)细胞进入空间后 ,虽然细胞产生了许多生理性变化 ,但能使CHO(dhfr-)细胞生存下来。利用空间搭载系统搭载细胞是完全可行的。     

返回式卫星搭载肿瘤细胞和生物工程细胞的初步研究

目的初步探讨空间环境对细胞生长特性的影响。方法利用细胞生存装置将肿瘤细胞及生物工程细胞于我国第 18颗返回式卫星返回舱内进行无源搭载。对返回细胞进行单克隆化 ,光学显微镜观察细胞形态 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,MTT法测定细胞生长曲线。结果空间飞行后 ,肿瘤细胞与生物工程细胞存活率相比明显不同 ,均出现多种细胞形态 ;单克隆株与地面对照相比 ,倍增时间及增殖速度出现快慢不一的变化 ;细胞周期分布改变 ,G1期细胞增多 (P <0 0 5 ) ,S期细胞减少 (P <0 0 5 )。结论空间环境可导致细胞产生多种变异 ,但并非均为可遗传性变异 ,是否能够筛选出所需要的细胞株 ,需做进一步研究。     

龙葵碱诱导人宫颈癌细胞HeLa凋亡的体外实验研究

目的 研究龙葵碱对人宫颈癌细胞系HeLa的凋亡作用及其抑癌机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测龙葵碱对HeLa细胞生长的影响;通过Hoechst33258染色及DNA Ladder研究龙葵碱诱导HeLa细胞凋亡的作用;RT-PCR法检测龙葵碱对环氧合酶(COX-2)表达的影响.结果 龙葵碱可剂量依赖性地抑制HeLa细胞生长,作用48h时,IC50=260μg·mL-1;可诱导HeLa细胞凋亡,荧光染色可见凋亡小体,DNA Ladder显示典型的细胞凋亡梯形条带;可降低COX-2的表达水平.结论 龙葵碱可抑制人宫颈癌细胞HeLa的增殖.诱导细胞凋亡,这可能是龙葵碱抑癌作用的机制之一.     

胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶、p53蛋白的表达与幽门螺杆菌的关系

目的：探讨胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶（hTERT）和p53蛋白的表达状况及其与幽门螺杆菌（Hp）根除前后的关系。方法：采用实时定量荧光RT-PCR方法检测胃粘膜中hTERT,将hTERT与GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）拷贝数之比的100倍作为标准化hTERT（NhTERT）,用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp,同时用免疫组化检测p53蛋白的表达。结果：Hp阳性组hTERTmRNA和p53蛋白的表达率均显著高于Hp阴性亚组的表达率（均P〈0.05）。Hp根除组hTERTmRNA的表达率显著低于未根除组（P〈0.05）,未根除组与阴性对照组之间无显著性差异。结论：在胃癌前病变阶段,Hp感染与端粒酶表达水平及p53蛋白之间有直接关系,提示端粒酶、Hp感染、p53蛋白在胃癌的发生、发展中起重要作用及Hp根除的必要性。     

石嘴山地区道路交通事故伤特点分析

为了解道路交通事故伤特点,按事故发生原因分类,选择１９８０例道路交通事故伤的资料进行统计分析。结果道路交通伤占各类创伤之道（８０．４６％）年龄以１８－５０岁居多,伤者以工人（３０．５５％）和农民（２３．４５％）居多,学生较少（３．２０％）;男性伤员以机动车乘员（２８．７９％）明显高于女性（１５．７０％）,女性非机动车剩员（３９．５９％）明显高于男性（２６．７１％）;发生时间以７、８两月较多（１４．     

太空环境对生物工程细胞CHO(dhfr-)的影响

目的 探讨空间环境对细胞的影响. 方法 利用基因工程细胞的航天搭载装置将细胞进行无源搭载,将生物工程CHO（dhfr-）细胞搭载于第18颗返回式卫星.随机选取3株诱变细胞株,MTT法测定细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,同时观察诱变细胞染色体变化,检测细胞周期调控相关基因p21Cip1/Waf1表达情况. 结果 太空诱变CHO（dhfr-）细胞增殖速度出现快慢不一的变化;细胞周期分布改变,G1期细胞显著增多（P〈0.05）,S期细胞明显减少（P〈0.05）;细胞染色体异常核型增加;p21^Cip1/Waf1基因表达上调,mdm2基因没有明显变化. 结论 太空环境可导致细胞产生多种变异,为改造、筛选优化哺乳动物宿主细胞表达系统提供了新手段.     

黑色素瘤细胞经太空环境诱变后致瘤性和基因表达变化

目的 筛选经太空环境诱变后B16细胞致瘤性改变的细胞株,观察其基因表达的改变,寻找与黑色素瘤发生及转移密切相关的基因.方法 将小鼠黑色素瘤B16细胞搭载于第20颗返回式卫星,返地后克隆化,随机选择5株克隆细胞株（1^#、5^#、6^#、7^#和8^#）,接种C57BL/6J小鼠,分别观察细胞致瘤性、荷瘤小鼠生存期及瘤体病理变化,用基因表达谱分析其中2株初筛致瘤性改变细胞株（1^#和8^#）的基因表达情况。结果 与对照组比较,1#细胞株接种小鼠后,肿瘤潜伏期延长（P＜0.05）,1^#和8^#细胞株移植瘤瘤体重量减小（P＜0.01）,且荷瘤小鼠生存期延长（P＜0.01）;病理诊断结果显示：1^#和8^#细胞移植瘤内血管不及对照组丰富,坏死区较少,瘤体内浸润淋巴细胞较对照组有不同程度的增多,瘤旁组织内有较多淋巴细胞;基因芯片分析结果表明：与对照B16细胞相比,2株诱变细胞（1^#和8^#）分别有145和125个基因表达水平发生改变（P＜0.05）,其中9个基因为共同变化基因,前列腺素D2合成酶基因在2株细胞中的表达均明显增高,与对照相比,差别在5倍以上。结论 1^#和8^#细胞株致瘤性减弱,且2株细胞的移植瘤肿瘤新生血管及癌旁浸润减少,癌旁组织中有较多淋巴细胞,推测可能与前列腺素D2合成酶等多种肿瘤相关基因表达的改变有关。