尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I对人肺癌 A549细胞增殖抑制作用

目的：研究尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I（ AAVC-I） 对人肺癌A549细胞增殖抑制及凋亡的作用。方法： 采用MTT法检测不同浓度的AAVC-I对A549细胞的24 h 与48 h 抑制率;应用HE染色、Hoechst33258荧光染色,从形态学观察细胞凋亡;采用免疫组化的方法,检测bax蛋白表达的变化。结果： MTT显示,AAVC-I能抑制A549细胞增殖,呈时间和剂量依赖性;AAVC-I处理24 h 后,镜下可见细胞核固缩,核深染及凋亡小体;免疫组化显示,随药物浓度增加,平均光密度值呈递增趋势,表明bax蛋白表达相应上调。结论：尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I对人肺癌A549细胞具有抑制作用,并诱导其凋亡,可能与bax表达上调有关。     

柴胡注射液对内毒素大鼠弥散性血管内凝血多器官损伤的影响及作用机制

目的观察柴胡注射液对内毒素大鼠弥散性血管内凝血(DIC)多器官损伤及磷酸化ERK 1/2(p-ERK 1/2)表达的影响。方法利用内毒素(脂多糖,LPS)复制大鼠DIC多器官损伤模型,将大鼠按给药不同随机分为柴胡低、高剂量组(分别腹腔注射0.2,0.4 g/kg柴胡注射液)、模型组和对照组。并于注射后5 h后取血,利用全自动血凝仪及生化仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素(BUN)及肌酐(Cr)等指标,光镜下观察心肝肾组织病理学改变,免疫组化检测p-ERK 1/2在肝组织中的分布。结果模型组APTT、LDH、ALT、AST、BUN及Cr均较对照组明显延长或升高(P<0.01),FIB较对照组显著降低(P<0.01),并出现典型DIC的病理学特征,免疫组化显示肝组织阳性细胞明显增高。柴胡注射液处理后各生化指标均显著改善(P<0.01),病理学可见各脏器损伤减轻,免疫组化显示肝组织阳性细胞密度减低。结论柴胡能够减轻内毒素DIC多器官损伤,其机制可能与ERK1/2信号通路的阻断有关。     

蝮蛇毒蛋白C激活物对败血症大鼠心脏血流动力学的作用研究

目的:研究蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)组分对败血症大鼠心脏血流动力学的影响。方法:取SD雄性大鼠24只随机分成对照组、PCA组、LPS组和LPS+PCA组四组,对照组尾静脉注射生理盐水,PCA组尾静脉注射蝮蛇毒蛋白C激活物,LPS组腹腔注射LPS(10 mg/kg,4 h)的方法建立败血症休克的实验动物模型,在建立败血症的实验动物模型的基础上,尾静脉注射PCA(0.4 mg/kg)为LPS+PCA组,每只大鼠均于药后30 min时运用Medlab生物信号采集处理系统记录平均动脉压(MAP)和左心室功能指标,并测定心肌中乳酸脱氢酶(LDH)活性、诱导性一氧化氮合酶(i NOS)活性及心肌病理切片。结果:PCA能明显减轻LPS诱导的心功能受损,并抑制心肌LDH的释放和i NOS活性的升高(P<0.05)。结论:PCA对败血症大鼠心脏血流动力学有明显的改善作用,其机制可能与通过保护血管内皮功能,改善微循环,稳定心肌酶活性和膜相结构等途径有关。     

皖南蝮蛇毒蛋白C激活物的急性毒性作用的研究

目的:探讨蛇毒蛋白C激活物(protein Cactivator,PCA)对大、小鼠的急性毒理反应。方法:大鼠采用上下剂量增减法,小鼠采用半数致死量法,观察实验动物症状、体征、死亡时间和累积死亡率。结果:PCA尾静脉注射大鼠(剂量17.5～175mg/kg)、小鼠(剂量为6.25～11mg/kg)的中毒表现为不同程度的口鼻泡沫状出血、呼吸困难、心率加快、走路不稳、蜷缩、昏厥性抽搐;大、小鼠尾静脉注射PCA的LD50及其95%可信限分别为29.57(17.5～55)mg/kg和8.05(7.55～8.54)mg/kg;大体解剖可见双肺有片块状出血,病理镜检显示出血主要累及肺泡、支气管等。其他器官未见明显异常。结论:皖南蝮蛇毒PCA的毒性主要是抗凝过度导致的出血,肺出血引起的急性呼吸衰竭是实验动物死亡主要原因。     

细胞外信号调节激酶1/2抑制剂PD98059对弥散性血管内凝血大鼠多器官损伤的保护作用

目的:研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)抑制剂PD98059对大鼠内毒素弥散性血管内凝血(DIC)多器官损伤的保护作用。方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、DIC组及抑制剂组。DIC组通过腹腔注射6mg/kg脂多糖(LPS)建立内毒素DIC模型,抑制剂组腹腔注射6mg/kg LPS和10mg/kg PD98059。5h后取血,利用全自动血凝仪及生化仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素(BUN)及肌酐(Cr)等指标;并留取心肝肾组织,光镜下观察其形态学变化。结果:与对照组相比:DIC组APTT、LDH、ALP、ALT、AST、BUN及Cr均延长或升高(P<0.01),FIB较对照组降低(P<0.01),心、肝、肾组织病理学检查均有明显的血管扩张充血;PD98059预防性用药后,除Cr外各指标均有明显改善(P<0.01),心、肝、肾组织血管充血减轻。结论:ERK1/2抑制剂PD98059能够减轻内毒素DIC时的多器官损伤,其机制与ERK1/2信号通路的抑制有关。     

二氧代哌嗪苯磺酰环己脲降糖作用的研究

目的:研究观察二氧代哌嗪苯磺酰环己脲对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠血糖血脂的影响以及刺激SMMC7721细胞对3H-2-脱氧葡萄糖吸收影响。方法:以高脂高热量饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素复制小鼠2型糖尿病模型,采用酶比色法测定糖尿病小鼠的空腹血糖、甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,CHO)等相关生化指标;利用液闪计数法检测细胞对3H-2-脱氧葡萄糖的吸收。结果:二氧代哌嗪苯磺酰环己脲可明显降低血糖水平,改善甘油三酯、胆固醇(P<0.01);与对照组比较,二氧代哌嗪苯磺酰环己脲可显著增加SMMC7721细胞对葡萄糖的吸收(P<0.01),3H-2-脱氧葡萄糖的吸收值增加近2倍,并且显著增强胰岛素刺激的葡萄糖吸收作用。结论:二氧代哌嗪苯磺酰环己脲有改善2型糖尿病小鼠血糖血脂的作用;并且具有刺激葡萄糖吸收以及增加胰岛素刺激的葡萄糖吸收作用。     

蝮蛇毒血小板抑制因子减轻LPS诱导的内皮细胞损伤

目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)对体外脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及其作用机制。方法:体外培养HUVECs,运用LPS(1 mg/L)诱导HUVECs炎症损伤模型,实验分为空白对照组、LPS组、AHV-PI组和AHV-PI+LPS组。MTT比色法检测HUVECs的活力,倒置显微镜观察HUVECs的形态变化,筛选出AHV-PI最适浓度为5 mg/L。流式细胞术检测细胞凋亡;免疫组化法观察胞内组织型纤溶酶原激活物(T-PA)以及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达情况;ELISA法检测HUVECs上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和组织因子(TF)含量;免疫荧光染色检测胞核内NF-κB亚基p65激活转位情况。结果:LPS组细胞明显梭形化,长宽比增大,呈成纤维细胞状,胞浆出现颗粒样物质。AHV-PI浓度低于5 mg/L时对HUVECs的活性和形态没有明显影响,但可减轻LPS引起的HUVECs的活力抑制和形态改变。与对照组比较,LPS组上清液中TF和ICAM-1含量升高,胞内T-PA和PAI-1表达减少;与LPS组相比,AHV-PI+LPS组上清液中TF和ICAM-1的含量显著降低,细胞内T-PA和PAI-1表达增多,细胞核内NF-κB p65表达减少。结论:AHV-PI能减轻HUVECs损伤,其保护机制与抑制细胞因子分泌及NF-κB活化有关。     

五步蛇咬伤致肢体肿胀与淋巴循环关系的初步研究

目的:初步探讨五步蛇咬伤后肢体肿胀与淋巴循环的关系。方法:复制蛇伤肿胀大鼠模型,记录肠系膜集合淋巴管的运动频率。行大鼠乳糜池插管获取淋巴液,经离心、超滤后,应用毛细管电泳对淋巴浆进行分析。结果:大鼠左后肢注射五步蛇毒30 min时明显肿胀,30 min后变化不明显,且大鼠在480 min内未死亡。与正常大鼠相比,模型组大鼠肠系膜集合淋巴管的运动频率显著降低(P<0.05),模型组淋巴浆中出现了多种活性组分。结论:五步蛇咬伤后,淋巴循环功能障碍且推动了蛇伤肿胀的发生发展。     

牛磺酸对心肌缺血再灌注损伤的血液流变学影响

目的 观察牛磺酸对家兔心肌缺血再灌注损伤血液流变学的影响。方法 将30只家兔分为3组,即正常对照组、缺血再灌注组、牛磺酸预处理组,分别于缺血前缺血30min、再灌注60min采血,测定血液流变学指标。结果 与缺血再灌注组比较,牛磺酸预处理组能明显降低缺血再灌注所致的红细胞聚集指数及刚性指数的升高(P<0.05),并降低全血粘度、血浆粘度。结论 牛磺酸可以显著改善缺血再灌注损伤后的红细胞流变学性状,从而为缺血再灌注心肌提供保护作用。     

木犀草素对STZ诱导的糖尿病肾脏的保护作用

目的:探讨木犀草素对糖尿病肾脏的保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、糖尿病模型组、木犀草素低、中、高剂量组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,生化方法测定血糖、尿蛋白、血及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及肾组织丙二醛(MDA)的含量;W estern blotting检测肾皮质转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组相比,木犀草素治疗组大鼠血糖水平明显降低(P0.01)、24 h尿蛋白明显减少(P0.01),血清及肾组织SOD、CAT活性升高(P0.01),肾组织MDA含量显著降低(P0.01),木犀草素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:木犀草素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用及降低肾组织TGF-β1、PAI-1的蛋白表达有关。