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目的:研究出生后不同发育时期小鼠基底前脑内雌激素β受体(estrogen receptor β,ER—β)的表达,探讨雌激素替代治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的机制。方法:选择出生0,3,7,14d,1,3,12,18个月的小鼠,每个时相点各5只。动物前脑经多聚甲醛-丙烯醛混合固定液固定、冷冻切片后于一抗(兔抗ER-β,sc-8974)内孵育过夜,再行常规的免疫组化并用硫酸镍铵增强DAB的显色。结果:小鼠基底前脑内ER—β免疫阳性物质位于细胞核。新生时在两性基底前脑ER—β免疫阳性细胞数目较少,生后第14天~3月龄时最多,老年(18月龄)时表达显著减少甚至消失,尤其在雌性更明显。ER—β的表达具有一定的性别差异,表现为生后早期和老年时雄性表达强于同期雌性。结论:小鼠生后不同发育时期基底前脑内ER-β蛋白的表达呈现弱-强-弱的变化模式,表明该受体可能参与了雌激素对基底前脑神经结构与功能的调节从而可能对AD的发病产牛影响,也可能是雌激素替代治疗AD的重要机制。 相似文献
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小鼠室旁核内雌激素受体与催产素、加压素表达的免疫组化研究 总被引:1,自引:2,他引:1
目的研究雌激素的核受体ER-α和ER-β以及催产素、加压素在成年雌性小鼠下丘脑室旁核内的表达。方法采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法检测ER-α、ER-β、催产素和加压素在室旁核内的表达。结果雌激素的两种核受体在室旁核内都有表达,但是以ER-β为主(P〈0.001),其免疫阳性产物均在细胞核内,未见核外免疫阳性反应。催产素的免疫阳性产物主要在细胞核周围的胞浆即核周质内,而加压素的免疫阳性物质除了在核周质内有很强的反应外,在突起内也可见很强的免疫反应。ER-α的免疫阳性胞体主要在大细胞部内侧,而ER-β、催产素和加压素的免疫阳性胞体主要在背侧帽部或大细胞部的外侧。结论室旁核内两种雌激素受体可能都参与了对催产素和加压素的调节,但ER-β可能发挥了主要的调节作用。 相似文献
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目的探究免疫电镜不同染色方法对免疫组化阳性实验结果影响的关系。方法组织切片经常规免疫组化(雌激素受体GPR30)并行DAB-硫酸镍铵显色后进行电镜切片,然后分为双氧铀-柠檬酸铅双染、双氧铀单染与未染色3组,以便对不同电子染色结果进行比较。结果GPR30免疫阳性产物位于细胞核外的膜性结构上,在铀-铅双染组显示很高的电子密度,但是背景染色也很深,在铀单染组的反差比较好,而未染色组的反差更好。结论免疫电镜技术中针对不同的免疫阳性反应选用不同的电子染色方法,有利于阳性结果的判断与鉴别。 相似文献
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雌激素β受体在成年雄性大鼠脑内的免疫组化定位研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 为了研究雌激素作用于神经系统的机制,研究了近年发现的雌激素β受体免疫阳性物质在雌性大鼠脑内的分布。方法 应用免疫组化S-P法并结合硫酸镍铵增强显色技术。结果 ①免疫阳性物质主要位于神经元的细胞核内,部分细胞的核周质和突起内也有浅谈的着色;也有部分神经元仅仅胞浆呈阳性;②最强阳性信号见于前嗅核、大脑皮质、斜角带垂直部、小脑浦肯野细胞、上丘各部、动眼神经核、红核、蓝斑、三叉神经运动核以及斜方体内、外侧核;中等强度的染色见于斜角带水平部、终纹床核、视前内侧核、乳头体内侧核以及黑质;较弱的阳性细胞见于下丘脑核团、未定带、杏仁复合体的部分核团以及脑桥网状核后部;微弱的阳性信号见于隔外侧核、苍白球、嗅结节岛、海马。结论 雌激素β受体在成年大鼠脑组织内有广泛的分布,在脑组织内雌激素可能通过β受体这一新的信号途径发挥多种重要的调控作用。 相似文献
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目的探讨细胞骨架重塑对体外大鼠跟腱来源肌腱干细胞(tendon stem cells,TSCs)成脂分化的影响。方法取3周龄雄性SD大鼠跟腱组织,采用酶消化法分离、培养TSCs,取第3代细胞用于实验。将细胞分别以细胞松弛素D(cytochalasin D,CYD)终浓度为0、50、100、500、1 000 ng/m L的含15%FBS的DMEM培养基进行培养,倒置相差显微镜下观察细胞存活及形态变化,纤维肌动蛋白(fibros actin,F-actin)染色观察细胞骨架,Western blot检测F-actin/球状肌动蛋白(globular actin,G-actin)比值,根据结果选择CYD有效使用浓度进行后续实验。取TSCs分别采用成脂诱导培养基(诱导组)、含CYD的成脂诱导培养基(CYD+诱导组)以及普通培养基(普通组)、含CYD的普通培养基(CYD+普通组)培养3、7 d,收集各组细胞行实时荧光定量PCR检测成脂分化相关特异标志性基因表达,包括过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、脂蛋白酯酶(1ipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸结合蛋白(a P2),Western blot检测PPARγ、a P2蛋白表达。结果 CYD浓度为100 ng/m L时既能有效干扰TSCs细胞骨架F-actin的聚合,又不影响TSCs的存活,选择该浓度进行后续实验。实时荧光定量PCR及Western blot检测示,3、7 d时CYD+诱导组PPARγ、LPL和a P2基因及PPARγ、a P2蛋白表达均显著高于诱导组,比较差异有统计学意义(P0.05)。3、7 d时CYD+普通组PPARγ、LPL和a P2基因表达也显著高于普通组,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论细胞骨架重塑是TSCs成脂分化的一个先决条件,抑制F-actin聚合可促进TSCs的成脂分化,对肌腱病的发病机制研究具有重要意义。 相似文献
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医学神经生物学课程体系的建设与实践 总被引:1,自引:0,他引:1
神经生物学是一门综合学科,它覆盖面广、发展迅速。针对神经生物学的特点,运用现代教育技术,从教学内容、教学方法、教学技术和手段、教学基本建设等方面构建了神经生物学课程体系并进行了探索与实践,充分调动了教师教学和学生学习两方面的积极性,有利于学生自主学习获取知识,实现向“学为主体,教为主导”教学方式的转变,有利于对学生创新精神和实践能力的培养。 相似文献
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