MUTYH基因多态性与大肠癌的关系

目的探讨MUTYH基因多态性与大肠癌之间的关系。方法应用测序技术、变性高效液相色谱（DHPLC）对200例大肠癌患者及400名正常对照者的MUTYH基因6个外显子区域进行变异筛查。结果在3个外显子区域筛查出突变或变异。Exon14区域为错义突变,即Exon14＋74T〉A,p．V463E。Exon 10区域变异位于Intron10-2A〉G,病例组变异者的平均年龄高于对照组（P〈0．01）。Exon 1区域的变异位点是Exon1-316G〉A、Exon1-292G〉A和Intron1＋11C〉T,病例组变异危险性是对照组的10．23倍。结论MUTYH多态性可能会导致结直肠癌的发生。没有筛查到高加索人群中最常见的Exon 7区域的变异,显示出人种间变异的差异性。     

应用多重连接依赖性探针扩增和变性高效液相色谱技术筛查Peutz-Jeghers综合征家系致病基因突变

目的 联合应用多重连接依赖性探针扩增(MLPA)和变性高效液相色谱(DHPLC)技术快速筛查Peutz-Jeghers综合征家系致病基因的突变.方法 收集家系成员的外周血,采用MLPA、PCR-DNA测序等方法分别检测了LKB基因大片段缺失、碱基突变、碱基插入和缺失.同时收集250名正常人外周血,PCR-DHPLC筛查验证突变位点在正常人群中的分布.生物信息学分析突变位点对编码蛋白质结构和功能的影响.结果 2名家系受累成员均携带LKB基因924G＞C点的突变,这一突变位点在家系正常人和正常人群中都不存在.突变导致位于功能结构域的第308位编码氨基酸由色氨酸变为半胱氨酸,变异蛋白质结构和功能发生改变.结论 c.924G＞C位点的突变是一种病理性胚系突变,编码氨基酸的改变(Trp308Cys)是此家系的致病性因素.     

散发性Peutz-Jeghers综合征患者LKB1基因突变情况

目的研究LKB1基因突变和甲基化在散发性Peutz-Jeghers综合征(P-J综合征)患者中的作用。方法提取5例散发性Peutz-Jeghers综合征患者外周血和其中3例的大肠息肉组织DNA,采用PCR法分析其序列的突变情况,MSP法检测基因启动子区域甲基化情况。结果在所有患者外周血和大肠息肉组织DNA中均未发现有病理意义的突变位点,在1例发生癌变的息肉组织DNA中检测到LKB1基因的甲基化。结论并非所有P-J综合征的患者都出现LKB1基因的序列突变,P-J综合征的发病可能存在其他的分子机制,但甲基化状态的改变可能是其息肉发生癌变的机制。     

家族性腺瘤性息肉病家系中一种新的APC基因的胚系突变

目的研究1个家族性腺瘤性息肉病家系的腺瘤样息肉病基因（adenomatous polyposis coli，APC）的胚系突变。方法经结肠镜、组织病理学检查和家族史的调查，确定了1例家族性腺瘤性息肉病（familial adenomatous polyposis，FAP）患者。应用多重连接依赖性探针扩增（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）、变性高效液相色谱（denaturing high-performance liquid chromatography，DHPLC）测序等技术对这一家系的成员进行系统的APC全基因筛查。结果在此家系中发现一个新的APC基因的胚系突变c。1999 C〉T（Q667X），这一突变造成了APC基因终止密码子的形成，从而形成有功能障碍的截短蛋白。临床上，此突变可引起严重的FAP症状，早发结直肠腺瘤和腺癌。结论Q667X胚系突变是引起该家系临床表型的原因，受累成员可考虑大肠预防性切除手术。     

家族性Peutz-Jeghers综合征患者LKB1基因胚系突变的分析

目的 研究家族性Peutz-Jeghers综合征患者中LKB1基因胚系突变特征.方法 收集11个Peutz-Jeghers综合征家系,各家系先证者均有典型的黏膜黑斑以及肠道错构瘤性息肉.提取先证者外周血DNA,PCR扩增LKB1基因的9个外显子及其侧翼的部分内含子序列,测序并分析其变异情况和突变性质.收集250名正常人外周血并提取DNA,聚合酶链反应-变性高效液相色谱筛查验证.结果 11个家系先证者中有8例患者LKB1基因外显子及侧翼碱基序列存在杂合性变异,变异类型共9种,包括7种点突变,1种外显子区域小片段碱基缺失以及1种侧翼内含子小片段碱基插入.其中4种考虑为病理性突变,还有4种仅为基因多态性表现,另外有1种变异性质未定.结论 LKB1基因病理性突变是中国人家族性Peutz-Jeghers综合征患者的常见病因,且以点突变为主.     

MYH基因变异与散发性大肠癌发病风险的初步研究

背景与目的：初步探讨MYH（MutY homologue,MYH）基因的变异与散发性大肠癌发病风险的关系。材料与方法：应用变性高效液相色谱（denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC）和测序技术,对140例大肠癌患者及280名正常对照人群的MYH基因16个外显子区域中的7个（外显子1、7、9、11、13、14和16）区域进行变异筛查,用SPSS统计软件进行数据分析。结果：Exon1区域的变异位点为Exonl-316 G〉A、Exonl-292 G〉A和Intronl＋11 C〉T,3者同时出现在所有变异样本中,且病例组变异危险性均为对照组的8．16倍（P=0．04;OR=8．16,95％C／为1．01—203．70）;Exon16区域的变异为nt1678—80delGTF,病例组中直肠癌患者的变异危险性为结肠癌患者的7．18倍（P=0．04;OR=7．18,95％C／为1．102～165）;Exon11区域查出4例Intron10—2A〉G变异;Exon13区域筛查出2例In．on13＋12C〉T变异;Exon14区域筛查出1种错义变异,即Exon14＋74T〉A,P．V463E;Exon7和Exon9区域未筛查出任何变异。结论：MYH变异可能会增加结直肠癌发病风险,应进行监测管理;未筛查到高加索人群中最常见的Exon7区域的变异,提示人种之间变异存在差别。     

E-Cadherin(CDH1)基因胚系突变与胃癌风险的研究

背景与目的： 检测E_Cadherin (CDH1) 基因在家族性胃癌中的突变情况以探讨CDH1基因胚系突变在家族性胃癌中的作用。 方法： 采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)、变性高效液相色谱分析(Denaturing high_performance liquids chromatography, DHPLC)和直接测序法对CDH1基因进行全基因筛查,检查80名胃癌患者的CDH1基因突变情况,其中62例有家族史。同时检测80例正常人CDH1基因,进行分析比较。 结果： 2.5％(2/80)的胃癌患者检出CDH1基因错义突变Thr340Ala(杂合型),在80例正常人中未检出这一突变;第13外显子上游(内含子)第13位碱基检出多态位点IVS(13)_13T→C,这一多态性存在于12.5％(10/80)的胃癌患者和15.0％(12/80)的正常对照,两组差异无统计学意义;23.8％(19/80)的胃癌患者中检出同义突变Asn751Asn,相同的突变存在于8.8％(7/80)的正常对照。统计结果表明,胃癌患者中CDH1基因 Asn751Asn检出率高于正常人群(P<0.05),这种差异主要表现在高年龄组胃癌患者(P<0.01)。 结论： CDH1基因胚系突变在家族性胃癌中不是频发事件,但多态位点Asn751Asn的存在可使携带者胃癌发病风险增高,可能是部分癌高发家族癌症发生的原因之一。     

通尿仙口服液的制备及临床应用

目的 研究中医药辨证施治、标本兼治多种原因所致尿潴留的治疗手段,通过多靶点作用于尿潴留的病理机制,探索迅速修复膀胱的气化功能的药物组合的治疗效果.方法 应用通尿仙口服液治疗观察206例多种原因所致尿潴留患者的治疗效果.结果 治愈178例,显效23例,无效3例,总有效率98.8%.结论 通尿仙口服液符合临床上对安全性高、疗效好,治疗成本低的治疗制剂要求.     

应用变性高效液相色谱技术研究肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82多态与结直肠癌发病及转移的相关性

Objective To investigate the correlation of polymorphism of intron 8 (IVS-8) 6C11A /6T11G of metastasis suppressor gene KAI1/CD82 with the occurrence and metastasis of colorectal cancer.Methods From 135 healthy individuals and 115 patients with colorectal cancer, genomic DNA was extracted from peripheral blood, and their clinical data and pathological findings were retrieved.Correlation of the polymorphism at gene splicing region of the KAI1 IVS-8 with the occurrence and metastasis of colorectal cancer was analyzed in a case-control study by denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC) analysis.Results Mutant allelotype 6T11G of KAI1/CD82 gene IVS-8 was detected in 30.9% of healthy individuals (84/135) and 31.3% of colorectal cancer patients (72/155) , with no significant difference between the two groups (P=0.963).The genotypes did not differ between younger (＜50 years) and older patients (=50 years) (P>0.05), between male and female(P>0.05), or among common pathological types including tubular or tubulopapillary adenocarcinoma and mucinous adenocarcinoma (P=0.633).The prevalence of genotypes differed among pathological stages, but without statistical significance (P=0.267).However, a statistical difference was shown between patients with and without lymph node invasion [6C11A detected in 62.5% vs 76.5% of patients with (80/128) and without metastases (78/102); 6T11G detected in 37.5% vs 23.5% of patients with (48/128) and without metastases (24/102) ; (P=0.032) ].Conclusion The genetic polymorphism of IVS-8 in KAI1/CD82 gene may not be related with occurrence, pathological types of colorectal cancer but may play a role in lymph node metastasis, implicating that screening of 6C11A /6T11G polymorphism can be used to identify the prognosis of colorectal cancer patients.     

非小细胞肺癌组织与癌旁组织SEMA3B基因甲基化分析

目的分析非小细胞肺癌组织与癌旁组织SEMA3B基因启动子区甲基化状况。方法用甲基化特异PCR(MSP)法检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织及癌旁组织标本23例,用克隆测序验证。结果非小细胞肺癌组织标本中SEMA3B基因启动子区有19例(82.6%,19/23)发生异常甲基化,相对应的癌旁组织标本中有18例(78.3%,18/23)发生异常甲基化,但与发病年龄、性别、病理分化无关。结论非小细胞肺癌组织与癌旁组织都表现出SEMA3B基因启动子区异常甲基化,癌旁组织细胞中发生SEMA3B基因启动子异常甲基化可能要早于细胞的恶性增生。