干细胞的研究现状及应用前景

干细胞是一种具有全能性(totipotency)或多向性(pluripotentiality)分化潜能的细胞。根据不同的来源，干细胞的种类是多样的，如胚胎干细胞、神经干细胞、造血干细胞、癌干细胞等。虽然类型不同，但都具有共同的特性及分化的多潜能性、干细胞的自我更新能力。干细胞特性的揭示说明了干细胞在发育生物学、临床医学、家畜育种、分子遗传学等方面有着非常重要的作用，展示了诱人的应用前景。     

大鼠肝癌细胞与Ⅰ型胶原的黏附特性及其与细胞周期的关系

肿瘤细胞和胞外基质之间的黏附特性与肿瘤的侵袭转移有密切关系。作者从细胞周期的角度，采用微管吸吮技术和细胞同步技术研究了不同细胞周期肝癌细胞与Ⅰ型胶原裱衬表面的黏附力学特性．结果表明；胸腺嘧啶脱氧核苷、秋水仙碱顺序阻断和胸腺嘧啶脱氧核苷双阻断后释放培养的方法可分别获得G1期和S期肝癌细胞，平均同步率分别为74．09％和90．39％；在研究剂量和时间范围内，肝癌细胞与Ⅰ型胶原的黏附力具有浓度和时间依赖性；S期肝癌细胞和Ⅰ型胶原的黏附力值与G1期和未同步组（对照组）相应值比较明显降低．结果提示；肝癌细胞经血道转移的侵蚀细胞间质阶段，G1期细胞可能起更重要的作用。这一研究对全面认识肝癌的转移机理有重要意义。     

正交设计优选迭鞘石斛多糖提取工艺

目的:优化迭鞘石斛多糖的提取工艺.方法:以苯酚-硫酸比色法测定的多糖的含量为指标,通过正交设计L9(34)优化迭鞘石斛多糖的提取工艺.结果:迭鞘石斛多糖的最佳提取工艺为A3B2C3,即300mL水,回流3次,每次1.5h.结论:加水量、回流时间、回流次数均对样品提取多糖的含量有显著性影响,其影响的程度依次为回流次数＞回流时间＞加水量.     

微重力效应对骨髓间充质干细胞增殖分化影响的研究进展

力学刺激对细胞的生长和功能起着重要调节作用。随着空间生命科学与空间生物技术的迅速发展,空间条件下细胞的生物学行为特征、规律及其相关分子机理逐渐成为空间生物学研究的热点和前沿。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,在组织修复中起重要作用,是临床细胞治疗的主要材料。近年来,人们利用空间模拟技术在细胞响应微重力环境的生物学特征研究方面取得了重要进展。本文介绍了目前常用的几种地基微重力效应模拟装置,结合相关研究成果对微重力作用下MSCs增殖、分化行为的改变及其相关的分子机理进行简要综述,为预防和治疗微重力相关疾病提供理论参考。     

骨桥蛋白对骨髓间充质干细胞核力学特性的影响及相关分子机制

目的研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)核力学特性的影响及相关分子机制。方法采用Transwell法分析BMSCs迁移能力。利用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)检测细胞核弹性模量,分析OPN作用下BMSCs细胞核硬度的变化。通过Western blot技术检测OPN作用对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK 1/2)的影响,并利用FAK或ERK1/2抑制剂考察FAK-ERK1/2信号通路在OPN影响BMSCs核力学特性中的作用。通过RT-PCR和Western blot技术检测OPN作用下核纤层蛋白Lamin A/C的表达变化。结果 OPN处理组细胞核弹性模量与对照组相比明显降低。OPN作用显著上调FAK、ERK1/2磷酸化水平,加入FAK或ERK1/2抑制剂在一定程度上回救OPN降低的细胞核弹性模量,并显著抑制BMSCs迁移。OPN处理BMSCs后Lamin A/C mRNA和蛋白水平的表达出现下调,但FAK或ERK1/2抑制剂能够抑制OPN诱导的Lamin A/C表达下调。结论 OPN可能通过FAK-ERK1/2信号通路下调BMSCs核骨架蛋白Lamin A/C表达,降低细胞核硬度,促进BMSCs迁移。该研究结果为深入认识OPN调控BMSCs迁移行为的机制及其临床应用提供了实验依据。     

Rho GTPases与骨髓间充质干细胞的迁移和分化

Rho 家族小分子鸟苷三磷酸酶(small GTPases of Rho family, Rho GTPases)是调节细胞许多生理病理活动的关键分子开关,参与细胞骨架、基因转录、细胞周期进程、细胞黏附的调控及多条信号通路的调节.骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞,通过增殖、迁移、分化等途径参与机体损伤组织的修复过程.研究表明,Rho GTPases在MSCs迁移、分化等过程中起着重要的调节作用.     

两阶段法体外诱导人动员外周血CD34~+细胞分化为巨核细胞

本研究提出两阶段法巨核细胞分化模型:首先将人外周血来源CD34+细胞在Cocktail或CC100两种增殖培养液中培养3、4、5或6 d,然后转入含有TPO和SCF的分化培养液中继续培养7、8或9 d。培养结束后通过比较细胞增殖、分化及成熟情况,优化培养条件。结果显示最优的诱导分化条件是,CD34+细胞在Cocktail培养液中扩增3 d后转入分化培养液中继续培养7 d;所获得的CD41+细胞和多倍体细胞数量是起始CD34+细胞的16倍和3倍;该条件下获得的CD41+和多倍体细胞数量显著高于常用的TPO法和TPO+SCF培养法。因此,运用本研究优化的两阶段培养模式能获得比单阶段直接诱导法更多的CD41+细胞和多倍体细胞,为巨核细胞和血小板相关的理论、临床研究提供新的更高效的巨核细胞体外扩增、分化模型。     

肿瘤细胞的糖代谢调控与肿瘤治疗

肿瘤细胞具有独特的糖代谢特征,即高糖吸收、有氧糖酵解与高乳酸生成,具体表现为肿瘤细胞参与氧化代谢的相关蛋白表达下调、葡萄糖转运蛋白及单羧酸转运蛋白表达上调。研究表明,靶向肿瘤细胞糖代谢的药物具有杀死肿瘤细胞的能力,为肿瘤治疗带来了新希望。此外,肿瘤干细胞被认为是肿瘤复发、转移及预后不良的根源,其能量代谢特征目前尚不清楚。有研究表明,逆转肿瘤干细胞的能量代谢可以增加其化疗敏感性。本文综述近年来肿瘤细胞及肿瘤干细胞糖代谢方面的研究进展,以及通过靶向糖代谢进行肿瘤治疗面临的机遇与挑战,期望可为临床上肿瘤治疗提供新的思路与契机。     

基质刚度对肝癌细胞增殖及糖代谢的影响

目的研究不同基质刚度对肝癌细胞HepG2增殖和糖代谢的影响,探究细胞外基质(extracellular matrix,ECM)刚度对肝癌细胞代谢和生物学行为影响的相关性。方法采用CCK8和细胞计数法检测培养在不同刚度基质上HepG2细胞增殖的变化,利用2-(N-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑-4-氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)并通过流式细胞术检测基质刚度对HepG2葡萄糖摄取的影响,利用荧光定量RT-PCR检测基质刚度对HepG2葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut1)表达的影响,并利用糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)阻断糖酵解途径后检测基质刚度对HepG2细胞增殖的影响。结果随基质刚度增加,HepG2细胞增殖能力、葡萄糖摄取和Glut1表达都显著增加。糖酵解途径被阻断后,不同刚度基质上HepG2细胞增殖能力基本相同。结论肝癌细胞所处力学微环境对肝癌细胞的增殖有重要影响;较大的基质刚度可能通过调控糖代谢途径促进肝癌细胞的增殖。研究结果为肝癌的临床治疗以及糖代谢为治疗靶点的药物开发提供相应的实验依据。