C57BL/6小鼠胆结石形成中固醇载体蛋白2的mRNA水平和胆固醇饱和指数增高

目的观察C57BL/6鼠胆囊结石形成过程中肝固醇载体蛋白2(SCP2)mRNA水平及胆囊胆汁中胆固醇饱和指数的变化。方法C57BL/6鼠20只,分为结石组和对照组。对照组喂普通饲料,结石组采用1%的胆固醇饮食4周;RT-PCR方法检测肝SCP2 mRNA水平的变化;全自动生化仪检测胆脂,并计算胆固醇饱和指数。结果胆囊结石组肝SCP2 mRNA水平显著升高,胆汁胆固醇饱和指数亦显著增加。结论肝SCP2的表达及胆汁CSI的增高呈正相关。     

胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆囊结石的形成

1材料与方法1·1动物模型C57BL/6小鼠30只,雄性,10周龄,由北京大学医学部实验动物中心提供。分笼饲养,控制光照12h(06∶00AM~18∶00PM),普通饲料饲养2w后,随机分为3组(每组各10只)。对照组:每日喂普通颗粒饲料,同时给予等量空白液灌胃;结石组:每日喂饲15%脂肪、1%胆固醇、0·5%胆酸饲料,同时给予等量空白液灌胃;胡椒碱组:每日喂饲15%脂肪、1%胆固醇、0·5%胆酸饲料,同时给予胡椒碱30mg/kg灌胃。实验前,动物禁食12h,3%戊巴比妥(35mg/kg body weight)麻醉,剖腹,结扎胆囊管,迅速取肝组织置液氮中冷冻,-80℃冰箱内保存备用。摘取胆囊,观察成…     

胡椒碱对C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响

目的观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响。方法C57BL/6小鼠30只,对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;用药组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30mg/kg体重)。4周后分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织Scp2mRNA水平和胆脂的变化,胆固醇饱和指数(CSI)用Carey表计算。结果结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶,胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低。结论胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,显著降低肝Scp2mRNA水平和胆汁CSI,这是否与胡椒碱的防止结石形成有关有待进一步的研究。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循环抗原

应用特异性单克隆抗体作DOT－ELISA和竞争ELISA检测65例脑囊虫病患者血清和脑脊液中游离循环Ag（FCAg）和循环免疫复合物抗原（CICAg）。血清FCAg阳性率分别为81．3％和81．5％（0．20～87．0μg／ml）,CICAg阳性率为95.4％和92．3％（0.19～120.0μg／ml）,脑脊液测定FCAg阳性单为78．5％和86.2％（0．32～25.0μg／ml）,CICAg阳性率为90.8％和93.8％（0.19～46.4μg／ml）。结果表明检测总循环抗原（包括游离部分和复合物部分）有利于提高脑囊虫病的诊断。     

胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆囊结石形成的研究

目的 观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响.方法 将C57BL/6鼠30只,随机分为3组.对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;胡椒碱组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30 mg/kg体重).4周后,分别利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织固醇载体蛋白(Scp2)mRNA水平和胆酯的变化,胆固醇饱和指数用Carey表计算.结果 结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶;胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2 mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低.结论 胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,能显著降低肝Scp2 mRnNA水平和胆汁胆固醇饱和指数.     

曲匹地尔对培养大鼠血管平滑肌细胞的有丝分裂素激活蛋白激酶(MAPK)和P34~(cdc2)激酶的影响

目的：研究曲匹地尔（Ｔｒａ）对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的细胞增殖周期及对有丝分裂素激活蛋白激酶（ＭＡＰＫ）和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶的表达及活性的影响。方法：以流式细胞术测定细胞周期,免疫印迹法测定ＭＡＰＫ和Ｐ３４ｃｄｃ２的表达,免疫沉淀后测定ＭＡＰＫ和Ｐ３４ｃｄｃ２对其特异性底物髓脂质碱性蛋白（ＭＢＰ）和ＨｉｓｔｏｎｅＨ１的磷酸化活性。结果：Ｔｒａ降低细胞周期中Ｓ期比例和细胞分裂增殖指数,能明显抑制给血清刺激后ＭＡＰＫ的表达和活性,明显抑制Ｐ３４ｃｄｃ２激酶活性而对其表达无明显影响。结论：Ｔｒａ对细胞周期的影响与其抑制ＭＡＰＫ和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶活性和ＭＡＰＫ的蛋白表达有关。     

大鼠谷氨酸受体2抗体制备及其与Caspase 3相互作用分析

目的克隆大鼠谷氨酸受体2(GluR2)基因片段,构建重组表达质粒,在原核系统诱导表达,制备多克隆抗体,分析GluR2与caspase3的相互作用。方法从大鼠脑组织提取总RNA,实时聚合酶链反应(RT-PCR)扩增GluR2基因抗原性较强的一段,定向克隆入表达载体pGEX-4T1,构建GST-GluR2融合蛋白表达质粒,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达GluR2蛋白。用SDS-PAGE方法分离目的蛋白,免疫家兔,制备抗血清。用Western Blot方法鉴定抗体的特异性,用Co-IP实验分析GluR2和caspase3的相互作用。结果SDS-PAGE显示GST-GluR2融合蛋白诱导表达成功;Western Blot显示制备的多克隆抗体具有较高的特异性;Co-IP显示大鼠脑组织中GluR2和caspase3存在相互作用。结论成功获得兔抗鼠GluR2特异性抗血清;脑组织中GluR2和caspase3存在相互作用,为进一步研究神经毒作用导致GluR2下调的分子机制奠定基础。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循…

应用特异单克隆抗体作ＤＯＴ－ＥＬＩＳ和竞争ＥＬＩＳＡ检测６５例脑囊虫病患者血清和脑脊液中前淳离循环Ａｇ（ＦＣＡｇ）和循环免疫复合物抗原（ＣＩＣＡｇ）。血清ＦＣＡｇ阳性率分别为８１．３％和８１．５％，ＣＩＣＡｇ阳性率为９５．４％和９２．３％（０．１９－１２０．０ｇ／ｍｌ）脑脊液测定ＦＣＡｇ阳性率为７８．５％和８６．２％，ＣＩＣＡｇ阳率率为９０．８％和９３．８％。结果表明检测总循环抗的有利于提高脑囊虫     

免疫脂质体作为阿苯达唑载体治疗小鼠光球蚴病实验研究

本文观察以抗泡球蚴抗体制备免疫脂质体作为阿苯达唑载体治疗小鼠继发性泡球蚴病的疗效。阿苯达唑免疫脂质体对小鼠泡球蚴抑制率为７９．８％，既高于单用阿苯达唑的抑制率（１５．４６％，Ｐ〈０．０１），也高于阿苯达唑脂质体的抑制率（４２．７８％，Ｐ〈０．０１）。组织学检查表明载药免疫脂质体对泡球蚴损伤程度最强，坏死及纤维化比例最高。这些结果提示免疫脂质体做载体可提高阿苯达唑对泡球蚴的治疗效果。     

八氯腺苷对 A549和 H1299细胞周期的影响及机制探讨

目的：八氯腺苷对肺癌细胞株A549和H1299细胞增殖及细胞周期的影响及其机制探讨。方法 A549和 H1299经10．0μmol/L 八氯腺苷处理后,MTT法检测细胞生长和增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测DNA-PKcs、γ-H2AX、Ku80、Ku70及 Topo Ⅰ的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,用10．0μmol/L八氯腺苷分别处理 A549、H1299细胞24、48、72 h后,A549、H1299细胞生长被抑制;流式细胞分析则显示,A549、H1299细胞G2/M 期细胞数增多;Western blot结果表明,γ-H2AX的表达均增加,DNA-PKcs蛋白的表达均下降,而Ku80、Ku70的表达未见明显变化;经八氯腺苷处理后Topo Ⅰ蛋白在A549细胞中的表达逐渐增加,而在 H1299细胞中的表达却逐渐下降。结论八氯腺苷可抑制A549和 H1299细胞生长,诱导细胞发生G2/M 期阻滞,其机制可能与DNA-PKcs表达下调有关。在A549细胞中Topo Ⅰ可能通过p53依赖途径介导DNA损伤修复,从而引发对细胞的毒性作用;而在p53缺失的H1299细胞中可能是通过其它途径调控细胞周期。