EZH2基因在肿瘤发生与发展中的研究进展

EZH2(enhancer of zeste homolog 2)是近年来新识别的一种人类基因,是果蝇zeste基因增强子的人类同源基因, Polycomb group基因家族的重要成员之一.     

病理学实验教学中的几点体会

病理学是基础医学与临床医学的桥梁学科,其主要从形态学角度研究疾病的发生、发展及转归规律,具有很强的主观性和实践性.因此,实验教学是病理学重要的一环,同时也是最生动、最直观的教学手段.其对加深学生对理论课知识的理解和掌握,培养学生学习兴趣,提高学生学习能力非常重要.笔者现将病理学实验教学中的体会介绍如下.     

EZH2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨EZH2在肝细胞癌中的表达及临床意义方法采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blotting方法分析肝癌及癌旁组织EZH2mRNA转录和蛋白表达水平及其与临床病理因素的关系.结果 在42例肝癌组织中检出26例EZH2mRNA,而在相应的42例癌旁组织中只检出12例,癌组织EZH2mRNA阳性率高于...     

siRNA干扰沉默EZH2基因对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的探讨小分子RNA(siRNA)干扰沉默靶基因EZH2对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞,分为转染组、阴性对照组及空白对照组,转染组与阴性对照组按照Lipofectamine2000使用说明分别瞬时转染EZH2 siRNA、荧光物FAM,对照组不予任何干预。分别采用MTT法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期;qRealtime-PCR和Western blot方法检测EZH2 mRNA和蛋白表达。结果与阴性对照组相比,转染组细胞增殖明显受抑;与阴性对照组及空白对照组比较,转染组细胞凋亡率明显升高,G0/G1期细胞明显增多,S期明显细胞减少;转染组EZH2 mRNA和蛋白表达明显下调,P均<0.05。结论 EZH2 siRNA可抑制人肝癌细胞增殖活性,是一种潜在基因治疗新方法。     

上调miRNA-101表达对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响

目的通过上调人肝癌HepG2细胞株中miRNA-101表达,探讨miRNA-101抑制靶基因EZH2对肝癌细胞增殖的影响。方法人工合成miRNA-101模拟体并转染至HepG2肝癌细胞株中,利用MTT法检测细胞增殖抑制、流式细胞仪检测细胞周期、实时荧光定量PCR检测EZH2 mRNA表达。结果 miRNA-101模拟体转染组HepG2细胞增殖活性明显低于阴性对照组及空白对照组(P<0.05),miRNA-101模拟体组G0/G1期细胞明显增多,为(74.71±4.6)%,S期细胞减少,为(14.57±1.1)%(P均<0.05);miRNA-101模拟体组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05)。结论上调miRNA-101可抑制EZH2基因表达,对人肝癌细胞增殖活性具有负调控作用。     

EZH2 mRNA在肝细胞癌中的表达及其意义

摘要 目的 研究EZH2在肝细胞癌中的表达及其意义。方法 采用RT-PCR方法检测42例肝癌患者EZH2的mRNA表达情况。结果 EZH2 mRNA在肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中的表达分别为61.9%(26/42) 28.6%(12/42)和22.2%(2/9)。EZH2 mRNA在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P＜0.05）和正常肝组织（P＜0.05）。EZH2 mRNA在肝癌组织中的阳性表达率与病理分级有关（P＜0.05）,而与肿瘤大小、HBV感染、AFP水平、是否伴有静脉癌栓和/或肝内外转移以及是否伴有肝硬化无明显相关(P＞0.05)。结论 对EZH2的检测可能有助于判断肝癌的恶性程度,并且可以作为肝癌潜在的一个治疗靶点做进一步深入研究。     

Sp3对β-catenin基因转录调控作用初探

 目的:观察转录因子Sp3对β-catenin启动子转录活性的影响,探讨Sp3与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:采用脂质体法将Sp1和(或)Sp3转录因子表达质粒单独/共同与β-catenin启动子（-410/-1 bp）报告基因质粒瞬时转染HEK293T细胞;通过双萤光素酶报告基因实验检测报告基因转录活性的变化。结果:（1）Sp1表达质粒在0.4 μg剂量时能提高启动子的活性2.4倍,Sp3表达质粒在0.4 μg剂量时能显著提高启动子的活性5.3倍。（2）0.4 μg总量的Sp1与Sp3表达质粒共转染293T细胞,随着Sp3/Sp1比例的递增,β-catenin启动子转录活性无明显变化。（3）共同转染Sp1 0.3 μg与Sp3 0.1 μg时,启动子活性提高3.5倍,比单独转染的转录活性强。结论: Sp3能促进β-catenin基因启动子（-410/-1 bp）的转录,Sp1的转录激活作用则较弱;在转录过程中Sp1和Sp3可能存在协同作用;Sp3可能在转录水平调控β-catenin的表达从而影响Wnt/β-catenin信号通路。     

EZH2在肝癌中的表达及其临床意义

目的：分析果蝇zeste基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2, EZH2） 在原发性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化非生物素两步法检测HCC42例、癌旁组织42例、正常肝组织19例EZH2蛋白的表达。结果：HCC、癌旁组织和正常肝组织的EZH2蛋白阳性表达率分别是57．71％（24／42）、16．67％（7／42）、10％（1／10）,三者之间的差异有统计学意义（χ^2=8．13,P〈0．01）,且EZH2蛋自在HCC中的表达明显高于癌旁组织以及正常肝组织中的表达（χ^2=14．78,χ^2=7．19,P〈0．01）。EZH2表达与临床病理因素无关（P〉0．05）。结论：EZH2异常表达与HCC的发生密切相关。