肠出血性大肠杆菌0157:H7 LexA蛋白的表达、纯化及鉴定

目的 对EHEC 0157:H7 lexA达、纯化,并检测其免疫活性.方法 lexA基因片段插入表达载体pET22b( ),在E..coli BL21(DE3)中表达.包涵体经洗涤并用8 mol/L尿素溶解,Heparin Agrose亲合柱层析为第-步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第二步精细纯化,HPLC测定LexA蛋白的浓度,将纯化的kxA蛋白经注射途径免疫家兔,制备兔抗lexA血清,采用免疫双扩、ELISA及Western blot分析LexA的免疫活性.结果 lexA以包涵体形式表达,表达产量高达总菌体蛋白的40%左右,经Heparin Agrose亲合柱层析和凝胶过滤层析两步组合纯化目的 蛋白,经HPLC测定目的 蛋白的最终纯度为98%,表达及纯化的lexA具有良好的免疫活性.结论 在E.coli BL21(DE3)中表达的LexA蛋白具有良好的免疫活性.     

单纯心理应激小鼠模型的建立及对行为、内分泌免疫功能的影响

目的 建立Balb/c小鼠单纯心理应激模型及其评价体系,观察单纯心理应激对机体内分泌免疫功能的影响.方法 采用旁观电击实验建立心理应激模型,20只Balb/c小鼠随机分为正常对照组10只和心理应激组10只,另外准备10只小鼠仅接受足部电击,作为应激源,不进入实验处理.记录并分析正常对照组和心理应激组小鼠行为学指标,检测血清皮质酮水平,血清IL-2、IL-4含量,评价Balb/c小鼠单纯心理应激模型.结果 心理应激组小鼠旷场试验指标、血清IL-2水平较对照组有显著降低(P＜0.05);血清皮质酮、IL-4水平较对照组有显著增高(P＜0.05).结论单纯心理应激小鼠模型建立成功,该心理应激模型能激活下丘脑-垂体-肾上腺轴,抑制小鼠的细胞免疫功能.     

《临床免疫学及免疫检验》实验课教学改革初探

积极探索实验课的教学改革,是推进《临床免疫学及免疫检验》教学改革的重要环节.笔者针对《临床免疫学及免疫检验》实验课存在的问题,采取了一系列的改革措施,取得了良好的教学效果.     

过敏儿童进行变应原特异性免疫治疗的不良反应预防及处理

变应原特异性免疫治疗（SIT）是唯一针对过敏性疾病病因治疗的治疗方法［1］,目前已经广泛应用于变应性鼻炎及哮喘的治疗,多项随机双盲对照的临床试验已证实免疫治疗的疗效［2－4］。但是变应原注射过程中可能发生不良反应,严重者甚至可能出现致死性的不良反应。本院自2011年7月成立儿童脱敏中心开展 SIT 疗法以来,至2014年4月已经有39例进行脱敏治疗,现对 SIT 过程中发生的不良反应进行分析总结,旨在为今后治疗过程中防止不良反应的发生提供一定参考。     

幽门螺杆菌沙鼠感染模型的定量分析研究

目的　建立幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)蒙古沙鼠感染模型 ,并通过比较定量培养、快速脲酶试验和ELISA三种方法 ,确定Hp动物模型的最佳评判指标。方法　采用临床分离的Hp强毒株对 2 0只蒙古沙鼠进行感染 ,4周后剖杀。取血按常规ELISA法检测抗Hp抗体 ;分别剪取胃窦、胃体和胃底粘膜组织作定量培养 ;其余组织作快速脲酶试验及病理检查。结果　经定量培养结果显示沙鼠的Hp感染率达到 80 % (16/ 2 0 ) ,胃窦、胃体和胃底的Hp定植密度的对数均值分别为 5 2 4± 1 5 0、4 11± 3 2 2、和0 97± 2 3 9;16只Hp阳性沙鼠中脲酶试验有 4只阳性 ,ELISA有 7只阳性 ,阳性鼠的感染均值显著高于阴性鼠。结论　经筛选的Hp强毒株成功感染沙鼠后 4周 ,Hp主要定植于胃窦和胃体部 ;定量培养仍是评价Hp动物模型的最有效方法     

龋齿主要致病菌变形链球菌的生物免疫防治新进展

世界卫生组织调查显示,在全球超过50亿人患过龋齿.龋齿已成为威胁人类口腔健康的全球性问题,而其主要致病菌变形链球菌的生物免疫防治研究如火如荼.到目前为止,在全球除奥丽汀健齿露外,还没其他任何预防龋齿的生物免疫防治产品上市和进入临床阶段.众所周知,大规模的生物免疫防治是治疗和预防龋齿的一种有效途径.了解近年来国内外在变形链球菌生物免疫防治中的主动防疫、被动免疫研究新进展研究可为后期研发出能进入临床试验,并能成功上市的龋齿生物免疫制剂提供指导意义和借鉴.     

病毒脑患儿脑脊液β-内啡呔的变化及临床意义

应用放射免疫分析法分别测定了 2 1例病毒性脑炎患儿和 10例无任何神经系统疾患的患儿脑脊液中 β EP含量。以探讨 β 内啡呔在病毒性脑炎发病过程中的作用 ,并为纳络酮治疗病毒性脑炎提供理论依据。发现病毒脑组脑脊液中β EP含量明显高于对照组。     

幽门螺杆菌长期感染蒙古沙鼠模型的建立

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)在胃炎、消化性溃疡、胃癌及胃淋巴瘤的发生中发挥着重要的作用 ,但是 ,Ｈｐ的动物感染模型一直未获成功。国内外虽有报道建立了小鼠及大鼠感染模型〔1,2〕,但或者是稳定性较差 ,或者是都采用特定的Ｈｐ菌株 Ｓｙｄ ｎｅｙｓｔｒａｉｎ 1(ＳＳ1) ,对于进一步研究Ｈｐ的致病机理和疫苗存在着一定局限性。 1996年起 ,国外陆续有学者〔3 ,4〕报道用沙土鼠建立Ｈｐ感染模型并取得较好效果的实验研究。为此 ,我们采用临床分离的Ｈｐ菌株对蒙古沙鼠 (Ｍｏｎｇｏｌｉａｎｇｅｒｂｉｌ)进行…     

静注长春新碱发生渗漏时的护理

长春新碱(VCR)是目前较广泛应用的一种广谱抗癌药物,对局部有刺激作用,特别在静脉注射发生渗漏时,患者即感注射部位持续刺痛、烧灼感,致使局部组织出现炎症和坏死。我科在1983～1985年间共有234例患者(约1000余人次)接受 VCR 治疗,其