我院2012年10月-2013年3月革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法:收集我院2012年10月-2013年3月临床分离出的革兰阴性杆菌。用头孢硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶情况,双纸片法检测产ESBLs情况,头孢西丁三维试验检测产AmpC酶情况,以确定产酶表型。用K-B法进行药敏检测。结果:103株革兰阴性杆菌中,单产AmpC酶菌42株(40.8%),单产ESBLs菌21株(20.4%),同时产ESBLs和AmpC酶菌12株(11.7%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂复方制剂如哌拉西林/他唑巴坦,以及碳青霉烯类抗生素亚胺培南和氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率均较低。非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各抗生素耐药率均较高。结论:各革兰阴性杆菌产酶菌株对多种抗生素的耐药率较高,产ESBLs和AmpC酶可能是导致革兰阴性杆菌耐药的主要机制之一。     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测

目的:了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料.方法:采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,采用PCR检测5类金属β-内酰胺酶的编码基因(IMP家族、VIM家族、GIM-1、SPM-1和SIM-1),利用生物信息学的方法对检测到的金属β-内酰胺酶亚型进行比对分析并制作分子进化树.结果:164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中筛选出22株金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,IMP阳性15株(9.1%),其中11株为IMP-9亚型,另外4株携带一个新的亚型,命名为IMP.25,VIMI阳性5株(3.0%),均为VIM-2亚型,未检测到GIM-1、SPM-1和SIM-1型金属β-内酰胺酶.结论:广州地区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的基因型已经出现多型化的特征,同时存在IMP型和VIM型金属β-内酰胺酶的流行,本次研究发现了一个新的金属β-内酰胺酶亚型(IMP-25),为IMP家族金属p.内酰胺酶的多样性及其分子流行病学资料提供了新的信息.     

8375例泌尿生殖道支原体感染状况及耐药性分析

目的 探讨泌尿生殖道解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH)感染发生率,分析其对抗菌药物的耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 使用商品化试剂盒对8 375例泌尿生殖道感染患者进行支原体培养鉴定和药敏试验.结果 8375例患者中检出支原体2858例,阳性率34.13％,其中UU阳性患者2 358例(28.16％),MH阳性患者107例(1.28％),UU和MH混合感染患者393例(4.69％);女性患者支原体阳性率为44.63％,明显高于男性患者的14.67％,差异有统计学意义(P＜0.05);UU感染者对环丙沙星耐药率最高为69.42％,其次是左氧氟沙星为38.35％;MH感染者对红霉素的耐药率最高为86.37％,其次是克拉霉素为80,67％;UU与MH混合感染者对克拉霉索的耐药率最高为87.54％,其次是罗红霉素为86.02％.结论 泌尿生殖道支原体感染及耐药状况日益严峻,对泌尿生殖道感染患者应及时进行支原体培养鉴定和药敏试验,定期监测支原体的耐药性变迁,指导临床合理选用抗菌药物.     

铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子及携带的耐药基因研究

目的 了解整合子在广州地区铜绿假单胞菌中的分布状况及其主要类型,研究Ⅰ类整合子的结构特征并探讨其与细菌多重耐药之间的相关性.方法 采用PCR检测3类整合子整合酶的编码基因,并扩增整合子的可变区,运用DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因及其排列顺序,利用生物信息学的方法对检测到的可变区基因序列进行比对分析.结果 在20株产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌中,15株检测到Ⅰ类整合子,未检测到Ⅱ类和Ⅲ类整合子,其中一株铜绿假单胞菌整合子全长序列含有Ⅰ类整合子整合酶、Aac A4氨基糖甙乙酰转移酶、IMP-25金属β-内酰胺酶、OXA-30 β-内酰胺酶和Cat B3氯霉素乙酰转移酶的编码基因及其相应的基因重组位点,GenBank登录号为EU588392,其中IMP-25为一个新的金属β-内酰胺酶亚型.结论 广州地区铜绿假单胞菌中存在的整合子类型是Ⅰ类整合子,并且该整合子可变区携带多种耐药基因盒,其中一个是金属β-内酰胺酶新亚型IMP-25,在分子水平上阐述了I类整合子参与铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性和多重耐药性.     

鲍曼不动杆菌在ICU的感染分布与耐药分析

目的 探讨医院ICU科室内鲍曼不动杆菌(Acinetobacter Baumannii,AB)感染情况以及对抗菌药物的耐药情况,为临床抗生素的使用及医院感染控制提供依据.方法 回顾性分析2015年6月至2016年6月本院中心ICU患者不同送检标本中AB菌的分布及其对14种抗生素的耐药情况,并利用WHONET5.6及SPSS22.0软件进行统计学分析.结果 痰标本中检测出AB菌286株,占总检测样本的79.5％,其中检出多重耐药菌株201株,占AB菌株的70.3％;药敏试验结果显示,所分离鉴定出的AB菌对多粘菌素B的耐药性较低(19.82％),而对其他抗菌药物的耐药性均较高.结论 ICU患者的标本AB菌对常用抗菌药物的获得性耐药率极高,且检出的AB菌株中多重耐药菌株占有极高比例,临床应更加合理使用抗生素,加强病原学监测、注意环境卫生和尽量减少介入性治疗,以减少AB菌感染及AB菌耐药性的增强.     

289株医院内感染病原菌特点分析

目的 探讨综合性医院住院患者医院内感染病原菌分布及耐药情况。方法 选取住院患者的医院内感染病原菌共289株,分析其分布、分类特征及耐药情况。结果 289株病原菌中,革兰阴性杆菌占74.05%,革兰阳性球菌占16.96%,真菌占8.30%。革兰阳性球菌中,多重耐药菌占55.10%;革兰阴性杆菌中,多重耐药菌占54.21%...     

广州地区2003-2007年499株铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的 了解广州地区铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药状况,以指导临床合理选用抗生素.方法 收集广州市7家三甲医院2003-2007年分离的499株铜绿假单胞菌,利用VITEK-32全自动微生物鉴定系统对所有收集的菌株进行种属鉴定,参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)推荐的方法 ,分别采用K-B法和琼脂稀释法进行药敏试验,用WHONET5.4软件分析铜绿假单胞菌的耐药性,用SPSS 11.5软件进行统计分析.结果 499株铜绿假单胞菌其抗生素耐药率依次为庆大霉素(42.0%)、阿米卡星(36.6%)、亚胺培南(32.8%)、头孢吡肟(28.3%)、头孢他啶(27.1%)、美罗培南(21.4%)、氨曲南(20.5%)、哌拉西林(8.8%)、哌拉西林/三唑巴坦(8.3%)、左旋氧氟沙星(8.1%)和环丙沙星(7.6%);2003-2007年5年期间铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别是27.7%、25.0%、31.6%、35.2%和34.3%,对美罗培南的耐药率分别是22.2%、21.0%、21.2%、19.7%和24.5%.结论 2003-2007年广州地区铜绿假单胞菌整体耐药现象严重,对氨基糖苷类、碳青霉烯类和头孢菌素类抗生素高度耐药,仅对喹诺酮类和青霉素类抗生素较为敏感.因而加强其耐药性监测不仅可以指导临床合理选用抗菌药物,而且还能为临床提供最新的流行病学和耐药性变迁资料.     

8 375例泌尿生殖道支原体感染状况及耐药性分析

目的探讨泌尿生殖道解脲脲原体（UU）和人型支原体（MH）感染发生率,分析其对抗菌药物的耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法使用商品化试剂盒对8375例泌尿生殖道感染患者进行支原体培养鉴定和药敏试验。结果 8375例患者中检出支原体2858例,阳性率34.13%,其中UU阳性患者2358例（28.16%）,MH阳性患者107例（1.28%）,UU和MH混合感染患者393例（4.69%）;女性患者支原体阳性率为44.63%,明显高于男性患者的14.67%,差异有统计学意义（P〈0.05）;UU感染者对环丙沙星耐药率最高为69.42%,其次是左氧氟沙星为38.35%;MH感染者对红霉素的耐药率最高为86.37%,其次是克拉霉素为80.67%;UU与MH混合感染者对克拉霉素的耐药率最高为87.54%,其次是罗红霉素为86.02%。结论泌尿生殖道支原体感染及耐药状况日益严峻,对泌尿生殖道感染患者应及时进行支原体培养鉴定和药敏试验,定期监测支原体的耐药性变迁,指导临床合理选用抗菌药物。     

Taqman探针实时荧光定量PCR检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平及其临床意义

 目的:运用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平并探讨其临床意义。方法:设计miR-122及U6 snRNA的茎环引物和Taqman探针,运用Taqman探针实时荧光定量PCR检测27例肝癌术前(HCC)患者、15例乙型肝炎（hepatitis B）患者、15例丙型肝炎（hepatitis C）患者、15例正常对照者（HC）、11例肝癌术后（PHCC）患者及10例肝癌术后复发（recurrence）患者血清中miR-122的表达水平,并分析miR-122与肝脏疾病相关标志物的关系。结果:Taqman探针实时荧光定量PCR方法能检测血清中miR-122的表达。HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-122的表达水平均高于HC和PHCC患者（P<0.05）, hepatitis C患者血清miR-122表达水平高于HCC、hepatitis B和recurrence患者（P<0.05）,但HCC、hepatitis B和recurrence患者血清miR-122的表达水平无明显差异（P>0.05）,PHCC患者血清miR-122的表达水平比HCC和recurrence患者低（P<0.05）。血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性和(或)乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者（P<0.05）。血清丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者（P<0.05）。血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）与miR-122的表达水平有正相关性（r=0.34,P<0.05）。血清甲胎蛋白（AFP）≥400 μg/L组血清miR-122的表达高于AFP＜400 μg/L组（P<0.05）。结论: Taqman探针实时荧光定量PCR适用于检测血清miR-122的表达水平。在HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-22均有不同程度的增高,尤其是hepatitis C患者,且PHCC患者血清miR-122表达下降,复发后升高。血清miR-122的表达与肝脏疾病的某些指标有关,提示血清miR-122可作为肝脏疾病,特别是肝癌早期诊断、手术疗效及预后判断的新指标。     

质粒介导的大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物耐药机制的研究

目的分析广州地区大肠埃希菌对喹诺酮类等12种抗菌药物耐药性,探讨qnr、qepA、aac-(6′)-Ib-cr质粒基因流行状况以及与耐药的关系。方法收集广州市两所三甲医院临床分离大肠埃希菌103株,采用纸片扩散法进行药敏试验,采用PCR技术检测大肠埃希菌中qnr(qnrA、qnrB、qnrS)、aac-(6′)-Ib-cr和qepA质粒基因,并对PCR产物进行DNA测序分析。结果 103株大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药率均>50.0%,20株菌检出阳性基因qnrB、qnrS、aac(6′)-Ib-cr的阳性率分别为9.7%、7.8%、10.7%,有8株菌同时携带≥2种质粒基因,这8株菌对喹诺酮类药物全部耐药,同时合并其他类抗菌药物耐药,其中52号菌同时携带3种基因[qnrB、qnrS、aac-(6′)-Ⅰb-cr],对6类抗菌药物全部耐药,12株菌检出单个质粒基因,其中4株对喹诺酮类敏感。结论广州市大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物耐药率居高不下;药敏谱呈多样化,多药耐药株比例高;菌株中存在qnrB、qnrS、aac-(6′)-Ⅰb-cr的流行,并呈现出两种或多种耐药基因共存于同一株细菌的特征;质粒介导的喹诺酮耐药基因数量与耐药种类数量呈正相关。