禁食对蛋鸡肝脏腺苷-磷酸激活的蛋白激酶活性的影响

腺苷 -磷酸 (AMP)激活的蛋白激酶 (AMP- acti-vated protein kinase,AMPK)是丝氨酸激酶家族的一员 ,由 AMP和其上游激酶 AMPK激酶所活化 ,对细胞内 AMP/ATP的变化非常敏感 [1] ,被称为真核细胞的“代谢感受器”[2 ]。研究发现在跑步 [3 ,4 ]、电刺激肌肉 [5,6]或禁食应激后 [7] ,大鼠肝脏和肌肉中的AMPK活性升高数倍 ,乙酰辅酶 A羧化酶 (ACC)活性显著下降甚至丧失 ,丙二酸单酰辅酶 A产量降低甚至为零 ,脂肪酸合成受抑。同时 ,AMPK活化后 ,脂肪酸的氧化率显著提高 ,CO2 和酮体生成量明显增加[4 ,8] 。这些均表明 ,AMPK活化…     

可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性

目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。     

新型mucA基因突变的铜绿假单胞菌生物被膜的形成和藻酸盐相关基因表达的研究

目的 确定黏液型铜绿假单胞菌PA17的mum基因突变位点，研究藻酸盐合成相关基因在其生物被膜形成过程中的表达，并观察PAl7生物被膜形成过程和形态。方法 PCR方法扩增铜绿假单胞菌PA17的mueA基因全长并测序；改良平板培养法建立PA17的生物被膜模型，半定量RT-PCR测定生物被膜形成24h、3d．6d时藻酸盐合成相关基因,algD、algU和algR的表达，并进行统计学分析；扫描电镜观察不同时间点的生物被膜形态。结果 PA17的mucA基因第166～333位核苷酸片段缺失，第342位A→G；其藻酸盐相关基因algD和algU均在生物被膜形成过程的第6天表达水平最高，algR在24h表达最高，单因素方差分析显示，上述基因在生物被膜形成过程不同时间点表达的差异有统计学意义；PA17于第6天形成成熟生物被膜，形态为薄膜状。结论 PA17是一株含新型mucA突变基因的黏液型铜绿假单胞菌，其藻酸盐相关基因在生物被膜形成的不同时间点的表达差异具有统计学意义，其生物被膜形态为薄膜状。     

建构主义理论结合网络平台在"感染病学"临床教学中的应用

是临床医学重要课程之一, 带教老师时间少、学生学习目标不明确、兴“感染病学”当前的临床教学存在临床教学时间短、趣缺乏等问题。本研究就建构主义理论结合网络平台引入该课程临床教学中的必要性、优势及实施方式作一探讨,以期为“感染病学”的临床教学改进提供参考。     

络病学在皮肤病治疗中的应用

络病学是近年发展较快的学科,其临证重视“络以通为用”的治疗原则。笔者对一些出现络病症候的难治性皮肤病,在皮损辨证、脏腑辨证的同时酌情参考络病辨治,明显缩短了疗程,取得了较满意的疗效,汇报如下。1黄褐斑对于黄褐斑,目前多从肝郁和肾虚两方面来辨证,采用疏肝、补肾之法治疗。虽然能取得一定疗效,但疗程较长,效果欠佳。《诸病源候论·面黑皯候》曰:“面黑皯者,或脏腑有痰饮,或皮肤受风邪,皆令气血不调,致生黑皯。五脏六腑十二经血,皆上于面。夫血之行,俱荣表里,人或痰饮渍脏,或腠理受风,致气血不和,或涩或浊,不能荣于皮肤,故生黑皯。”由此可知,黄褐斑与经络不畅,络气郁滞,而气血不能上荣于面部肌肤有必然联系。故当尽早加用具有通行络气、舒畅络脉的药物,如柴胡、郁金、白僵蚕、丝瓜络、白芷等,可改善络病状态,明显提高疗效。2带状疱疹本病中医文献称之为“缠腰火丹”、“蛇串疮”等。多归为肝胆湿热、脾虚湿蕴、气滞血瘀、外感邪毒。老年带状疱疹皮损完全消退后往往后遗神经痛,刺痛常持续数月或更久,成为带状疱疹治疗中一个非常棘手的问题。目前对于后遗神经痛多认为属久病气血瘀滞、经络阻隔,不通则痛,常加用延胡索、赤芍、伸筋草、乳香、没药等疏通活络的药...     

解毒消银饮治疗寻常型银屑病

银屑病是皮肤科临床常见病、多发病,属中医学“白疕”范畴。俗称“牛皮癣”,是以表皮增殖和炎症为特征,红斑鳞屑性可遗传的皮肤病,病程较长,缠绵难愈。2002年3月-2008年2月,我们用解毒消银饮,针对寻常型各期的患者,进行了辨证施治,取得了满意的效果,现将治疗情况报告如下:1资料     

动脉栓塞治疗老年人肺咯血63例临床分析

自1974年Remy首先应用支气管动脉栓塞术（BAE）治疗咯血取得了满意临床疗效后，动脉栓塞术就已成为顽固性咯血的主要治疗手段。由于老年人有着特殊的生理、心理及临床特征，因此对动脉栓塞治疗老年人肺咯血提出了更高的临床要求。现对我院行动脉栓塞治疗的老年患者的临床资料作一回顾性分析，报道如下。     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建及体外效应研究

目的 构建高靶向性基因转移及基因表达系统,并研究其介导HSV-tk/GCV自杀基因系统对人肝癌细胞的体外杀伤作用。 方法 通过重组DNA技术分别构建anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白表达载体ScFv-GAL4-pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GAL4rec。前者经IPTG诱导表达获取anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白作为非病毒转运载体,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-GAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721及人肺癌细胞株A549,潮霉素筛选阳性细胞,扩大培养,分别命名为HepG2/tk、SMMC7721/tk及A549/tk,然后通过MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。 结果 双酶切鉴定及SDS-PAGE电泳证明非病毒转移载体anti-TfR ScFv-GALA融合蛋白及重组pEBAF/tk-GAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中,表面TfR阳性且高分泌AFP(845 ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;表面TfR阳性但不分泌AFP的A549/tk细胞则对前药不敏感。 结论 双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性。     

DNase Ⅰ对非黏液型和黏液型铜绿假单胞菌生物膜的影响

目的研究不同浓度DNaseⅠ对非黏液型和黏液型铜绿假单胞菌生物膜形成及成熟生物膜的影响。方法分光光度计法检测25、50、100U／ml的DNaseⅠ对非黏液型铜绿假单胞菌PAOⅠ和黏液型铜绿假单胞菌PA17生长曲线的影响；改良平板培养法建立生物膜模型，分别在生物膜形成过程中及生物膜形成后用25、50、100U／ml的DNaseⅠ处理，扫描电镜观察PAOⅠ和PA17的生物膜形态。结果随着DNaseⅠ浓度增加，PAOⅠ和PA17的对数生长期延迟，但最终不能抑制细菌生长；25U／ml的DNaseⅠ即可抑制不同类型铜绿假单胞菌生物膜形成且分解成熟生物膜，100U／ml的DNaseⅠ可完全阻止铜绿假单胞菌生物膜形成并彻底分解成熟生物膜。结论DNaseⅠ不能直接杀灭铜绿假单胞菌，但可有效抑制铜绿假单胞菌生物膜形成并分解成熟生物膜，对非黏液型和黏液型铜绿假单胞菌生物膜的影响无明显差异，作用效果呈浓度依赖性。     

介入治疗胸廓内动脉参与供血肺癌的临床研究

目的观察胸廓内动脉（ITA）参与肺癌供血的出现频次,评价经ITA介入治疗肺癌的临床价值。方法对58例接受血管内介入治疗的肺癌患者行病侧ITA选择性造影术,包括中央型37例,周围型21例。对ITA参与供血的患者经其行介入治疗,观察ITA参与肺癌供血的发生概率和影响因素,随访观察临床疗效和并发症。结果 21例（36.2%）发现ITA参与肺癌供血。ITA参与肿瘤供血10例,肿瘤和纵隔转移淋巴结供血7例,纵隔转移淋巴结供血4例。参与肿瘤供血的ITA17例,其中中央型肺癌13例,周围型4例,2例为起源于ITA的迷走支气管动脉参与肿瘤供血。并发症主要包括发热、恶心、呕吐、胸闷、胸痛、呃逆及前胸壁皮肤损伤,以上并发症经积极处理后均缓解、治愈。疗效为部分缓解12例,稳定5例,进展2例,失访2例。结论介入治疗对ITA参与肺癌供血是安全有效的。