CpG-ODN对乙肝核酸疫苗及重组疫苗免疫效果的影响

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)对乙肝核酸疫苗及重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响。方法核酸疫苗实验组用CpGODN与乙肝核酸疫苗联合免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射核酸疫苗,阴性对照组注射质粒pVAX1;重组疫苗分4个实验组,用CpGODN与不同剂量的重组疫苗配伍后分别免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射重组疫苗,阴性对照组注射生理盐水。应用ELISA检测小鼠血清中的抗HBs水平。结果CpG与乙肝核酸疫苗组抗体阳转率比阳性对照组提高3倍,抗体水平提高2倍。CpG与重组疫苗组的阳转率和阳转时间均高于或早于CpG与核酸疫苗实验组。加入CpGODN后,即使重组疫苗用量减少3倍,诱导抗体水平和阳转率均无明显改变。结论CpGODN可提高乙肝核酸疫苗和重组疫苗的免疫效果,并使抗体产生的时间提前。     

气相色谱法测定高级脂肪醇中的有关物质

研究建立了测定高级脂肪醇中有关物质的方法。采用气相色谱法，色谱柱为DB-225型毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)，设置程序升温，使用氢火焰离子化检测器(FID)进行测定。研究考察的十六烷、十八烷、十二醇、十四醇、十五醇、十六醇、十八醇、油醇、次亚麻醇、二十醇10种组分具有较好的分离度，质量浓度在0.5～100μg·ml^-1范围内线性关系良好，灵敏度高，精密度与溶液稳定性RSD均小于2.0%，各组分回收率为96.56%～101.76%。该方法快速准确，可有效分离与测定高级脂肪醇中常见的10种有关物质。对市售的药用辅料产品进行了考察，结果表明，24批样品中均不含油醇，已知单杂均低于1.0%，未知杂质总量不超过1.0%；杂质总量不超过2.0%。     

结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6的原核表达及纯化

目的原核表达并纯化结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6。方法将ESAT-6基因自pET-24b-ESAT-6质粒亚克隆至pGEX-3C载体中,构建重组表达质粒pGEX-ESAT-6,经酶切及测序鉴定正确后,分别转化大肠杆菌JM107和BL21(DE3),以不同浓度IPTG诱导表达,表达产物经GSH-Sepharose4 B亲和层析纯化。结果所构建的重组表达质粒pGEX-ESAT-6经酶切及测序鉴定正确;重组融合蛋白在大肠杆菌JM107中的表达量较高,可达菌体总蛋白的24.2%;最适IPTG诱导浓度为0.1mmol/L;纯化的目的蛋白纯度可达83.9%。结论已成功构建了重组表达质粒pGEX-ESAT-6,并在大肠杆菌JM107中高效表达,为结核分枝杆菌亚单位疫苗及核酸疫苗的研制提供了材料。     

地铁明挖基坑管线保护设计及施工

根据西安地铁车站明挖基坑遇到管线的类别、管线材料、自重等因素,综合考虑现场实际情况,并通过计算分别对各种管线保护方案进行设计、施工,取得了较好的实施效果,并为类似的工程提供相关的经验。     

基于故障树分析法的地铁工程建设火灾风险分析及应对

运用安全系统工程故障树分析法对地铁工程建设施工中发生的火灾事故进行分析和评价,分析引起火灾的基本事件,运用结构重要度排序找出火灾发生的主要原因,提出有针对性的对策措施,为施工单位防止火灾事故的安全管理提供依据。     

沙门菌PCR-ELISA检测方法的建立

目的建立沙门菌PCR-ELISA检测方法,并进行验证。方法根据沙门菌inv A基因设计PCR-ELISA引物及探针,进行PCR扩增、核酸杂交及ELISA检测,对变性反应条件、杂交探针浓度、杂交时间和温度及显色时间进行优化,确定阴性、阳性判定的阈值,并进行敏感性、特异性及重复性验证。用建立的PCR-ELISA方法检测人工染菌的22批中药丸剂及27批液体乳中的沙门菌,并与PCR及GB4789方法进行比较。结果 150 mmol/L Na OH变性液可使核酸变性最彻底,50 pmol/ml地高辛标记探针为最适浓度,50℃60 min为最佳杂交时间和温度,最佳显色时间为50 min;阴性、阳性的阈值为0.265。该方法最低检测限为0.5 pg/μl,灵敏度高;能针对性地扩增沙门菌的特异性片段,检测特异性强;检测结果的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好。人工染菌的22批中药丸剂和27批液体乳的PCR-ELISA方法检测阳性率明显高于PCR法,与GB4789方法检测阳性率基本一致。结论优化后的PCRELISA方法特异性强,灵敏度高,重复性好,可快速检测食品、药品中的沙门菌。     

无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞的比较

目的对无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞进行比较。方法应用两种培养基采用小方瓶培养CHO细胞,观察细胞维持时间、培养过程的形态变化及对血凝效价的影响。结果应用无血清培养基(A)培养CHO-C28细胞虽然可维持细胞正常生长,但贴壁不好,逐渐降低(A)加量情况可得到相应改善。结论 目前无血清培养基尚不能完全取代含血清培养基用于培养CHO细胞。     

基于Logistic回归的移动通信业客户细分模型

在移动通信业务运营中,目前所采用的传统细分方法通过ARPU值来为客户分类,这种方法存在一些问题和不足。本文引入Logistic回归方法,结合移动通信客户的实际特点与需求,构建具有创新性的客户细分模型,为运营商的客户方案提供客观准确的参考依据。本文所构建的移动通信客户细分方法,能够在把握客户的具体特征的前提下对其进行清晰地分类,有利于运营商实施保持客户的策略。     

重组HBsAg大规模生产中超速离心纯化工艺的改进

目的 为提高制品的纯度和收率以及离心机的使用效率,建立更适合大规模生产的超速离心工艺。方法 样品在超离前先过滤,然后再分别调整梯度液的液量及比重。结果 样品经过滤后适当调整梯度液的液量,超离心的峰形和所收获的HBsAg的纯度和收率都明显提高,而改变梯度液的比重则收液量下降,收率降低。结论在超离心前先过滤,然后再改变原有梯度液的比例,减少A液50ml,增加B液50ml,能提高制品的纯度和收率。