人热休克蛋白70基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆人热休克蛋白70(HSP70)基因,构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆,提取质粒pE28b70F,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70,表达量约占细菌总蛋白的22·3%,其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12%。Westernblot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni2+-NTA亲和柱,从1L诱导产物中纯化出约1520mg重组蛋白,纯度在80%以上。结论已成功表达HSP70,为进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了基础。     

蚯蚓小分子多肽提取物对人皮肤细胞活性及胶原分泌的影响

通过体外细胞模型,考察蚯蚓小分子多肽提取物(LMWPEE)对正常成人皮肤成纤维细胞(HSF)和正常成人表皮角质形成细胞(HEK)的细胞活性以及对HSF分泌Ⅰ型前胶原蛋白的影响。结果表明,与空白组相比,质量浓度为25~400 mg/L的LMWPEE对2种细胞的细胞活性都具有显著促进作用,但对2种细胞的细胞周期并没有明显的影响。LMWPEE对HSF细胞活性的促进作用存在一定的剂量-效应关系,而促进HEK细胞活性的较佳质量浓度为50 mg/L。此外,LMWPEE在质量浓度为200和400 mg/L时,可显著促进HSF分泌Ⅰ型前胶原蛋白,较空白组分别提高了31%(P0.05)和51%(P0.01)。     

欠平衡钻井条件下地层造斜特性研究

钻井实践中发现,由于对欠平衡钻井条件下的地层造斜特性不够了解,不能有的放矢地采取措施有效控制井斜。因此,欠平衡钻井条件下地层造斜特性的研究,是一项迫切需要开展的工作,对于欠平衡钻井技术的发展具有重要意义。应用有限元方法分析了不同井底压差下倾斜地层近井底岩石应力的分布状态,得出了井底压差和地层倾角对井底应力分布的影响规律;同时分析并确定了井斜趋势的判定依据,进而研究了欠平衡钻井条件对地层造斜作用的影响。结果表明,欠平衡钻井中井底保持负压差,放大了井底上倾和下倾两侧岩石应力的不对称性,增强了地层的造斜作用;地层倾角越大,这种增强作用越显著。     

气体钻井井斜机理研究

气体钻井存在井斜不易控制的难题,其机理尚不明确。应用纵横弯曲BHA(底部钻具组合)分析方法和钻头与地层相互作用模型,根据实钻资料对比分析了气体钻井和钻井液钻井的地层造斜特性,进而探讨了气体钻井的井斜机理。结果表明,与钻井液钻井相比,气体钻井条件下地层造斜力和钻具降斜力都有增加,但地层造斜力增加的幅度更大,这正是气体钻井更容易发生井斜的原因。因此,建议在用气体钻井技术打直井段时,通过调整钻具组合和钻进参数适当增加钻具的降斜力,以提高井身质量。     

基于美国墨西哥湾Macondo井喷事故分析的深水油气井完整性探讨

汲取美国墨西哥湾Macondo井喷溢油事故的经验教训,对于保障我国深水油气资源开发战略顺利实施具有十分重要的意义。本文依据事故相关方发布的调查材料,在归纳分析事故原因的基础上,从井漏和井喷风险同时防范、工程成本控制与施工质量的保证、井眼内液柱压力控制和深水井控4个方面探讨了影响深水油气井完整性的问题,并给出了改进的建议。     

几种光谱增感染料吸附在AgBr晶体上的光电导效应

使用AgBr晶体作为AgBr乳剂的模型,利用光电导法研究光谱增感的机理及染料的增感性能。采用“蚶埚下降法”重复地制备出了透明度相当好的AgBr晶体,还研究了晶体片的抛光与化学处理过程,这对于光电导实验都是重要的。对几种实用的光谱增感染料进行了光电导实验,实验结果与照相乳剂的光谱响应一致。而且观察到四氯咪碳菁与其它染料相比,光敏化电流有显著的不同。同时还进行了不同电荷染料的组合实验,由实验看到,由于染料吸附的先后次序不同,光电导曲线上峰电流的位置和大小发生了明显地变化,这对于照相乳剂的配制将具有一定的实际指导意义。     

循环伏安法研究光谱增感染料在溴化银上的吸附

用循环伏安法和电子显微镜研究了不同类型的染料在溴化银上的吸附,使用了电沉积在铂上的溴化银电极作为照相乳剂的模型,证明了由于染料电荷的不同,其在AgBr/Br~-表面上的吸附也不同,正性染料被吸附时,形成难溶的表面络合物,和负性染料相作用时,形成易溶的表面络合物,而当AgBr与非菁负性染料作用时,则由于负电排斥而不形成络合物。因此,利用循环伏安法可以判断不同染料的吸附情况。本文还研完了超增感及Riester提出的‘强色增感’中的吸附情况。实验结果表明在AgBr上染料的排列次序取决于其吸附强度。本工作还证明了Reister所提出的‘强色增感剂’的作用机理是可信的。     

液压缸直接作用式隔水管张紧系统多学科仿真分析与研究

为了对液压缸直接作用式隔水管张紧系统样机设计方案进行原理验证,基于SimulationX多学科仿真软件构建了气液回路和多体机械系统的联动模型,分别在正常钻井作业、对称布置的两套张紧液压缸失效和隔水管紧急解脱3种工况模式下对张紧系统开展了动态响应分析研究。研究表明:在正常钻井作业工况下,张紧系统的中位张力、补偿精度、蓄能器气体压力达到设计目标,并满足规范标准的要求;对称布置的两套液压缸失效后,通过增加中位压力值,仍可保持足够的系统张力;在隔水管下部总成和防喷器组发生紧急解脱后,张紧液缸行程小于设计最大行程,活塞和缸体之间没有发生碰撞,蓄能器压力波动基本保持稳定。研究结果对于液压缸直接作用式隔水管张紧系统的研制具有重要的意义。     

RP-HPLC法测定蛇胆、鸡胆、猪胆的胆汁酸成分及其抑菌作用的研究

建立了反相液相色谱法同时测定动物胆汁样品中的牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨石胆酸等结合型胆汁酸成分的方法.采用色谱柱为Agilent SB-C18柱(4.6×250 mm,5μm),流动相为乙腈-25mM磷酸二氢钾盐溶液(30:70),检测波长200nm,流速1.0mL/min,柱温40℃.各组分在一定范围内有良好的线性关系.本法具有简单快速、分离效果好、重复性好、回收率高的优点.同时研究了动物胆汁及其主要胆汁酸成分的体外抑菌作用,结果表明胆汁酸对于金黄色葡萄球菌的生长有明显的抑制作用,且牛磺结合型胆汁酸TCA的抑菌作用强于游离型胆汁酸CA.     

酸性燃料气对加热炉的破坏及修复方法

常减压加热炉烧酸性燃料气致使两炉炉壁板破损,衬里脱落,烟道积灰,通过原因分析,采取炉壁涂刷防腐漆,保温钉退火处理,使用新型复合衬里结构,并对吹灰器、空气预热器进行修复,使两炉恢复正常生产。