不同堆肥方式对氮素转化规律的影响

研究了甘蔗叶与牛粪混合物不同堆肥方式对氮素转化规律的影响。将甘蔗叶与新鲜的牛粪以1∶3的质量比充分混合,在同样的外界条件下,采用密闭容器强制通风法和翻堆法两种好氧发酵法进行堆肥。结果表明,翻堆堆肥相比于通风堆肥:温度高2.1~5.2℃,有机质降解率高28.25%,最终含水率高8.08%,最终pH值高0.12。这些因素的不同导致通风堆肥的硝态氮高出翻堆堆肥23~165mg·kg-1;氨氮含量前13d通风堆肥高出翻堆堆肥48~1 017mg·kg-1,后期翻堆堆肥高出1~42mg·kg-1;亚硝态氮含量前9d翻堆堆肥高出通风堆肥285~425mg·kg-1,后期通风堆肥高出41~118mg·kg-1。表明,两种不同堆肥方式中氮素的转化规律不同,翻堆堆肥更有利于促进氮素转化。     

产壳聚糖酶微生物的筛选及产酶条件的优化

目的 从土壤中筛选能降解壳聚糖的微生物,并优化其产酶条件。方法利用平板筛选法对采集的土壤中的微生物进行富集培养、初筛和复筛,得到能降解壳聚糖的菌株,并对降解壳聚糖能力最强的菌株进行发酵培养,优化产酶条件。结果筛选出3株产壳聚糖酶菌株,编号为C-01、C-02和C-03,其中,C-01、C-02为细菌,C-03为霉菌。C-01菌株产酶能力最强,其最适产酶条件为:以1%粉末壳聚糖+0.1%葡萄糖为碳源,0.5%(NH4)2SO4+0.5%蛋白胨为氮源,培养基初始pH值8.0,培养温度30℃,菌株接种量2.0%,培养时间48 h。在最适条件下,壳聚糖酶活力可达7.78 U/ml。结论已筛选出1株高产壳聚糖酶的菌株,并优化了其产酶条件,为壳寡糖的生产及应用奠定了基础。     

体外培养前后脐血CD34~+细胞差异表达基因的筛选

目的筛选扩增培养前后脐血CD34+细胞差异表达基因。方法将新鲜分离的CD34+细胞设为对照组,经静态和动态培养系统扩增的CD34+细胞设为试验组,应用基因差异显示技术(DDRT-PCR)比较两组之间的基因表达差异,对差异表达基因片段进行克隆、测序及生物信息学分析,并且通过半定量RT-PCR方法验证基因差异表达的真实性。结果应用差异显示技术筛选出5个差异表达基因,其中4个为已知功能基因,1个为未知功能基因,对其中2个基因RAN和DC24进行半定量RT-PCR检测表明,在静态和动态体系扩增培养后的CD34+细胞内,RANmRNA的表达水平分别是新鲜分离细胞的1.521和3.978倍,DC24mRNA的表达水平分别是新鲜分离CD34+细胞的14.275和2.374倍。结论发现了与CD34+细胞体外增殖相关的一些重要基因,为从基因水平调控CD34+细胞体外增殖提供依据。     

响应面法优化黄原胶发酵生产培养基

通过单因素实验确定了黄原胶发酵生产培养基的主要成分,采用Box-Behnken Design响应面法确定了培养基各成分浓度:蔗糖浓度为4.66%,黄豆粉浓度为0.50%,碳酸钙浓度为0.33%时,发酵液中黄原胶浓度达到2.18%,黄原胶产量比优化前提高了80.16%。     

野油菜黄单胞菌胞内粗酶液催化合成α-熊果苷

利用野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris pv.campestris）8004胞内粗酶液生物催化合成α-熊果苷,考察了对苯二酚浓度、反应物摩尔比、缓冲溶液pH值、反应时间、菌体浓度等因素对反应的影响。确定最佳反应条件为：反应温度35℃、摇床转速180r.min-1、对苯二酚浓度40mmol.L-1、对苯二酚与蔗糖的摩尔比1∶30、缓冲溶液pH值7.0、反应时间36h、菌体浓度80mg.mL-1,在此条件下,α-熊果苷含量达到6.58mg.mL-1、对苯二酚选择性为66%、对苯二酚转化率为91%。     

巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化酶的分离鉴定

对巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化酶进行了分离鉴定。结果表明,该酶催化可逆反应,分子量大小约为56 kDa,最适pH值为7.5,最适温度为50℃。为利用巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508以蔗糖为原料直接合成蔗糖-6-乙酸酯提供了新的研究思路。     

产木聚糖酶菌株的筛选及产酶条件优化

通过透明圈法从土壤中筛选到两株产木聚糖酶菌株CS-1和CS-2,CS-2产木聚糖酶的酶活力优于CS-1。CS-2产木聚糖酶最佳发酵培养条件:碳源(甘蔗渣)3.0 g/ml,氮源(NH4Cl)0.5 g/ml,接种量为10%,250 ml三角瓶装液量50 ml,pH=8.0,温度为55℃,转速为160 r/min,发酵时间为3 d。在此发酵条件下,CS-2产木聚糖酶的酶活力达到7.980 U/ml。     

体外培养环境对脐血CD34~+造血干/祖细胞基因表达的影响

目的研究体外培养环境对脐血CD34+造血干/祖细胞基因表达的影响。方法脐血单个核细胞(MNC)在静态和动态培养系统中培养7d后,收集CD34+造血干/祖细胞,利用SMART-PCR技术从少量RNA中扩增cDNA用于标记探针,与基因芯片杂交后分析培养前后以及不同培养模式下培养的CD34+造血干/祖细胞基因表达的差异。结果在所检测的588个基因中,45个基因在培养前后的CD34+造血干/祖细胞中差异表达,其中20个基因在培养后表达上调,25个基因表达下调。另外,12个基因在不同培养模式中差异表达,只有CCL2在动态培养中高表达,而其余11个基因均在静态培养中高表达。结论通过分析体外培养环境对CD34+造血干/祖细胞基因表达的影响,可以在分子水平上理解CD34+造血干/祖细胞对培养环境的生理响应。     

巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB8508蔗糖磷酸化酶生物催化合成α-熊果苷的研究

利用巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化醇生物催化合成α-熊果苷.考察了缓冲溶液pH值、缓冲溶液浓度、对苯二酚浓度、反应物摩尔比及反应时间等因素对反应的影响.结果表明,以湿菌体50 mg·mL-1破碎细胞粗酶液催化合成α-熊果苷,在pH值为6.5的30 mmol·L-1磷酸盐...