EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体的构建及其转染COS-7细胞条件的优化

目的构建EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化PEI介导基因转染COS-7细胞的条件。方法PCR扩增EGFP和PDGFRβ基因,依次连接至pcDNA3.1(+)质粒中,构建融合基因表达载体H-E-P-pcDNA3.1(+),经PEI介导转染COS-7细胞,并对转染条件进行优化。结果融合基因表达载体经酶切及测序证明构建正确。经PEI介导转染COS-7细胞的最佳条件为:DNA浓度2μg/ml,N/P比值15.5,在无血清条件下转染。此条件适用于滚瓶培养细胞的转染。结论已成功构建了EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化了经PEI介导转染COS-7细胞的条件。     

不当得利制度之构建理念的探究——以英美法上Unjust Enrichment的历史沿革为视角

作为一项源远流长的法律制度,不当得利由零散的个别权利发展出了一套具有概括性的条款,并且在抽象概念的基础上逐渐进行类型化。虽然各国对不当得利的规定各不相同,而且两大法系在该问题上更是有不同的理解,但是在制度理念上存在同一性。本文主要英美法上的返还请求权的历史沿革的角度,探究不当得利的制度理念之变化,并希望从中为我国的相关制度构建提供一些思路。