婴幼儿奶粉和米粉中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其毒素基因检测

目的：了解婴幼儿奶粉和米粉中金黄色葡萄球菌的污染及其毒素基因的携带情况。方法：采集陕西省18个地区不同品牌的婴幼儿奶粉143份和米粉224份,按国标法和PCR方法进行金黄色葡萄球菌分离鉴定;采用PCR方法检测ses基因、ets基因、tsst-1基因和pvl基因。结果：367份样品中检测出30个金黄色葡萄球菌污染样品,检出率为8.17%,其中奶粉11.19%(16/143)、米粉6.25%(14/224),分别从中分离鉴定出29株和25株金黄色葡萄球菌;从54株金黄色葡萄球菌中共检测到有64.8%(35/54)的菌株携带有毒素基因,其中奶粉72.4%(21/29)、米粉56.0%(14/25);奶粉分离株中检测到的毒素基因型有pvl、sea、seb、sed、seg、sea＋pvl、seb＋seg、seb＋sed＋seg、sec＋pvl、sec＋seg＋pvl和seg＋pvl,其检出率分别为10.3%(3/29)、3.4%(1/29)、3.4%(1/29)、3.4%(1/29)、6.9%(2/29)、6.9%(2/29)、6.9%(2/29)、3.4%(1/29)、3.4%(1/29)、13.8%(4/29)和10.3%(3/29);米粉分离株中检测到的毒素基因型有pvl、sed、seg、sea＋seg＋pvl、sec＋pvl、sec＋seg、sec＋see＋seg、sec＋see＋seg＋pvl、see＋pvl和seg＋pvl,其检出率分别为8%(2/25)、4%(1/25)、4%(1/25)、4%(1/25)、4%(1/25)、8%(2/25)、4%(1/25)、4%(1/25)、4%(1/25)和12%(3/25)。奶粉和米粉中都没有检测到ets、tsst-1和seh、sei、sej基因。结论：婴幼儿奶粉和米粉中均存在一定程度的金黄色葡萄球菌的污染,且多数菌株都携带一定的毒素基因,这对消费这些产品的婴幼儿身体健康构成潜在的危险。     

复合疫苗佐剂促进蛋白抗原通过交叉提呈和交叉致敏诱生CD8~+CTL反应的研究

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotides,CpG-ODN)与A(lOH)3或Montanide ISA720等组成的复合佐剂在小鼠体内促进蛋白抗原通过交叉提呈和交叉致敏诱生CD8+CTL反应的能力。方法以鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)为抗原,分别以CpG X1、A(l OH)(3即Alum)、Montanide ISA720、CpG X1+Alum和CpG X1+Montanide ISA720为疫苗佐剂,分别于0和4周经肌肉注射免疫C57BL/6小鼠,体积均为100μl,分别含20μg OVA、20μg CpG X1、74μl Montanide ISA720和/或100μg Alum。通过胞内细胞因子染色和体内CTL杀伤试验评价不同佐剂对细胞免疫应答的影响,通过表达OVA的黑色素瘤和李斯特菌攻击模型评价不同佐剂在免疫预防和免疫治疗中的作用。结果与OVA组相比,A(lOH)3本身不能有效诱生小鼠的细胞免疫应答;CpG X1或Montanide ISA720单独使用能够在一定程度上增强抗原特异性CD8+T细胞的IFNγ分泌和CTL活性,但不增强抗原特异性CD4+T细胞反应。两种复合佐剂具有比单佐剂更强的细胞免疫佐剂效应,其中CpG X1+MontanideISA720只能增强抗原特异性CD4+和CD8+T细胞的IFNγ分泌,而CpG X1+Alum不仅能够增强抗原特异性CD4+和CD8+T细胞的IFNγ分泌,还能够增强CD8+CTL的杀伤活性。在黑色素瘤和李斯特菌攻击模型中,CpG X1+Alum佐剂显示出良好的预防和治疗效果。结论 CpG X1与A(lOH)3组成的复合佐剂能够有效促进蛋白抗原通过交叉提呈和交叉致敏诱生功能性CD8+CTL反应。