响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究

以核桃分离蛋白为原料,用Neutrase 0.8L酶解制备高活性的ACE抑制肽.采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定酶解多肽的ACE抑制率,同时以水解度和ACE抑制率为考查指标,通过单因素试验及响应面试验设计,优化了中性蛋白酶（Neutrase 0.8L）酶解核桃分离蛋白的酶解工艺.结果表明：各因素对水解度的影响顺序为pH〉温度〉E/S,对ACE抑制率的影响顺序为pH〉E/S〉温度;最佳酶解工艺条件为：pH 6.81、温度55℃、时间2h、底物质量浓度2%、酶与底物比3.43%,酶解产物的水解度达到8.52%,ACE抑制率达到67.94%.     

核桃蛋白水解物水解度测定方法比较

为比较测定核桃分离蛋白(WPI)水解物水解度最佳方法,采用Alcalase 2.4L、Protamex水解WPI,对不同时间段核桃蛋白水解液水解度测定方法进行比较。结果表明,采用内切蛋白酶Alcalase 2.4L水解WPI时,pH-Stat法和TNBS法测定结果基本一致,而甲醛滴定法测定结果偏低;而用复合蛋白酶Protamex水解WPI时,pH-Stat法和甲醛滴定法测定结果接近,但且均低于TNBS法,TNBS法测定结果与另外两法差异显著(ρ<0.05)。由于制备核桃多肽主要采用内切蛋白酶,所以可认为pH-Stat法测定WPI水解液水解度较为准确。     

核桃蛋白ACE抑制肽分离纯化研究

核桃ACE抑制肽经超滤后,其ACE抑制率由76.58%增至78.43%,再经DA201-C大孔吸附树脂脱盐纯化后,脱盐率达到98.70%,ACE抑制率升高至80.73%;采用Sephadex G-15凝胶分离后,核桃ACE抑制肽被分为三个组分,其中活性最大的G2组分,其ACE抑制率达83.10%,且IC50为1.308 mg/mL,G2组分主要分布在500 Da¹80 Da,系为2180 Da,系为2⁴个氨基酸残基组成小肽。     

建设宜居孟州的实践与思考

近年来,我市城市建设快速发展,城市面貌日新月异,有效地扩展了城市空间,配套了城市功能,提升了城市品位,给广大人民群众提供了良好的生产生活环境,也为我市建设生态宜居城市奠定了良好基础。市委、市政府按照科学发展观的要求,依照以人为本的理念,结合我市实际,制订了“城乡建设三年大提升行动计划”,     

盐在水酶法提取核桃油中的影响及酶解条件优化

在现有的水酶法提取核桃油的研究基础上,探索了不同的盐种类及浓度在水酶法提取核桃油中的影响。试验表明:添加盐溶液后有利于吸取上层清油;得到的核桃油品质高,蛋白质变性低,利于油脂和蛋白的综合利用;且最佳的盐种类是氯化钠,价格低廉。单因素试验和正交法对水酶法提取核桃油的工艺条件进行优化后,确定了最佳酶解工艺条件为:酶用量为1.2%,酶解温度为55℃、酶解时间5h、酶解pH为6.5,在该优化条件下,核桃仁清油提取率达63.82%。     

推进城乡一体化 建设和谐新孟州

近年来,孟州市以新型城乡、宜居孟州建设为主题,把推进城乡建设、加快城镇化进程作为一项重大举措,围绕城乡规划一体化、城乡产业发展一体化、城乡基础设施一体化、城乡公共服务一体化,大力实施城乡建设大提升行动,取得了丰硕成果,有力地推动了孟州的工业化和农业现代化发展,为“十二五”深入推进孟州城镇化进程奠定了坚实基础。     

分子排阻色谱纯化核桃蛋白源ACE抑制肽条件优化

为了得到新的ACE抑制肽,采用分子排阻色谱对核桃蛋白碱性蛋白酶水解物进行分离、纯化。优化了分子排阻色谱分离、纯化核桃蛋白水解物的洗脱剂、洗脱流速、上样体积和样品浓度,比较了其纯化前后ACE抑制活性变化、分析了不同组分RP–HPLC图谱及其氨基酸组成。结果表明,以Sephadex G–15为分离介质的色谱优化条件为:超纯水为洗脱剂、洗脱流速0.4 m L/min、上样体积1.5 m L、样品浓度150 mg/m L。在此条件下,经过分子排阻色谱纯化后,得到4个主要组分,其中活性最高组分的ACE抑制率达90.35±0.25%,其IC50值为0.158 mg/m L。经过RP–HPLC进一步分离,分子排阻色谱纯化后高活性组分保留时间主要集中于10 min、13 min、17 min和21 min,并且其疏水性氨基酸的含量得到显著富集,其中芳香族氨基酸Tyr、Phe的含量分别达10.46%和20.15%。     

Alcalase 2.4L酶解核桃分离蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

以核桃分离蛋白(WPI)为原料,利用Alcalase 2.4L酶解制备高活性的ACE抑制肽.以水解度和ACE抑制率为指标,通过单因素和二次回归正交旋转组合试验,优化了Alcalase 2.4L酶解核桃分离蛋白制备ACE抑制肽的工艺.得到的最佳酶解工艺条件为pH 7.94,酶解温度60℃,底物质量浓度20g/L,酶与底物质量比3.69∶100,酶解3h后,酶解产物的水解度达到24.78％,ACE抑制率达到76.58％,且在此条件下获得的ACE抑制肽具有一定的抗体内消化酶特性.