TOFA抑制上皮性卵巢癌细胞活性的体外实验研究

目的:探讨乙酰辅酶A羧化酶抑制剂TOFA对卵巢癌COC1细胞增殖能力的抑制作用及其机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK-8)检测不同浓度TOFA作用24、48、72h对卵巢癌细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测COC1的细胞周期变化情况,免疫印迹技术(Western blot)检测COC1细胞磷酸化AKT、ERK蛋白表达的变化。结果:不同浓度(1、5、10、20、50μg/ml)TOFA分别作用24、48、72h后,对卵巢癌细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖。5、10、20、50μg/ml TOFA处理48h后实验组和对照组相比,阻滞于G0/G1期的细胞数明显增加(P<0.05)。10μg/ml TOFA作用后,可上调磷酸化AKT蛋白表达,60min后磷酸化ERK蛋白表达抑制率为47%(P>0.05)。结论:TOFA对卵巢癌细胞增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性,诱导细胞G0/G1期阻滞,抑制磷酸化ERK表达,TOFA发挥作用的机制可能与MAPK/ERK信号转导通路相关。     

桃花汤治疗溃疡性结肠炎疗效的系统评价

目的 评价桃花汤治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法 检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、中国生物医学数据库、PubMed、Web of science、Cochrane library,筛选文献并采集文献相关信息,使用Review Manager 5.3评价偏倚风险并对各疗效指标进行系统评价。结果 检索获得546篇文献,经过剔重和筛选最终纳入16篇文献。Meta分析显示临床总有效率：RR=1.19,95%CI：1.14~1.24,P<0.001,结肠镜积分：MD=-0.61,95%CI：-1.11~-0.11,P=0.020,肿瘤坏死因子-α：MD=-22.18,95%CI：-36.70~-7.66,P=0.003,C反应蛋白：MD=-10.85,95%CI：-30.48~8.77,P=0.280,不良反应发生率：RR=0.40,95%CI：0.24~0.65,P<0.001。结论 桃花汤治疗溃疡性结肠炎在临床总有效率、结肠镜积分、肿瘤坏死因子-α及不良反应发生率方面优于对照组。     

双氢青蒿素对卵巢上皮性癌发展和转移的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对体外培养的卵巢上皮性癌高度转移细胞株HO-8910pm黏附、侵袭能力以及体内生长的影响,并探讨其相关分子作用机制。方法：用不同浓度DHA处理HO-8910pm,采用基质胶贴壁黏附法检测DHA对癌细胞体外黏附能力的影响;用跨膜小室模型和划痕实验检测DHA对癌细胞侵袭和迁徙能力的影响。用裸鼠的HO-8910pm原位接种卵巢癌模型,检测DHA对卵巢癌侵袭和转移的影响。Western blot法检测DHA对癌细胞聚焦黏附激酶（FAK）磷酸化、MMP-2和MMP-9的体外影响。结果：（1）DHA作用于HO-8910pm细胞后,细胞增殖能力显著抑制,体外黏附和侵袭能力显著下降;（2）体内实验中,DHA可显著抑制卵巢癌腹膜转移;HO-8910pm细胞p-FAK和MMP-2蛋白水平降低,但MMP-9蛋白水平无显著降低。结论：DHA对卵巢上皮性癌细胞的增殖、黏附、侵袭能力及肿瘤转移有-定的抑制作用,其具体机制可能与抑制p-FAK、MMP.2表达水平有关。     

基于CN-DRGs的剖宫产住院费用评价分析研究

目的基于剖宫产住院费用,探讨按中国疾病诊断相关分组(CN-DRGs)方案的分组效果和病种分组规律,为按疾病诊断相关分组付费改革的推广提供参考依据。方法回顾性收集2013—2016年26 041例剖宫产病例病案首页信息,按照CN-DRGs分组方案进行分组,通过计算变异系数、方差减少量、相邻组相对变化和方差分析及多元统计分析评价分组效果。结果总体入组率为91.21%,各组平均住院费用的CV值范围在0.2~0.4之间,RIV值为0.18。结论建议增加"剖宫产伴随妇科手术"分组,征询更广大的临床一线医生意见,进一步完善CN-DRGs分组方案。     

血清胱抑素C和尿微量清蛋白联合检测在糖尿病早期肾损伤诊断中的意义

目的探讨血清胱抑素C（CysC）和尿微量清蛋白（mALB）联合检测对糖尿病早期肾损伤的诊断价值。方法对81例2型糖尿病患者根据尿清蛋白排泄率的不同分为A组和B组,40例健康体检者为对照组,采用免疫比浊法分别检测血清CysC和mALB水平。结果糖尿病B组患者血清CysC和mALB水平均高于糖尿病A组和健康对照组患者,差异有统计学意义（P〈0.05）,糖尿病B组患者血清CysC水平与mALB水平呈正相关,糖尿病患者联合检测的阳性率明显高于单项检测,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论血清CysC和mALB可作为反映糖尿病患者肾功能早期损伤情况的指标,联合检测对及时准确地诊断糖尿病早期肾损伤有重要的临床诊断价值。     

槐耳清膏通过激活自噬抑制人肝癌细胞SK-HEP-1增殖

该研究探讨槐耳清膏对人肝癌细胞SK-HEP-1自噬的影响及此影响在细胞增殖中发挥的作用。采用CCK-8法检测了槐耳清膏不同作用浓度以及不同作用时间下对人肝癌细胞SK-HEP-1增殖的影响。采用吖啶橙染色法检测了槐耳清膏给药对SK-HEP-1细胞中自噬溶酶体形成的作用。采用免疫荧光法检测了槐耳清膏给药后SK-HEP-1细胞中自噬标志物LC3的表达及分布情况。此外,还借助免疫印迹法检测了槐耳清膏给药后SK-HEP-1细胞中LC3的表达情况。最后,该研究采用CCK-8法分析了槐耳清膏与自噬抑制剂bafilomycin A1联合给药以及槐耳清膏单独给药对SK-HEP-1细胞增殖的作用。结果显示,槐耳清膏能够显著抑制人肝癌细胞SK-HEP-1的增殖,并且具有明显的时间与浓度依赖性。吖啶橙染色实验结果表明槐耳清膏能够明显促进细胞中自噬溶酶体的生成。免疫荧光及免疫印迹实验结果显示,槐耳清膏给药作用后细胞内LC3绿色荧光颗粒数量和亮度明显增高,而且自噬标志蛋白LC3-Ⅱ的表达量也明显上升,这部分结果提示槐耳清膏能够明显激活SK-HEP-1细胞自噬的发生。此外,笔者还发现自噬被抑制后SK-HEP-1细胞对槐耳清膏给药的敏感性显著下调。因此,自噬活化参与了槐耳清膏对人肝癌细胞SK-HEP-1增殖的抑制作用。     

生物芯片在多囊卵巢综合征研究中的应用

<正>多囊卵巢综合征(PCOS)的生物芯片研究提示存在多种基因/蛋白质改变,然而这些基因的网络效应仍不清楚,研究这些调控变化可能为PCOS的诊治提供病因学基础,并且结合各种组学技术,这些高通量研究将有助于将基因改变和蛋白功能联系起来。笔者就芯片技术在PCOS研究中的应用作一综     

喜树碱药物NSC606985抗卵巢癌细胞活性及其机制的研究

目的:体外观察喜树碱药物NSC606985对人卵巢癌细胞的生长抑制效应、凋亡诱导效应以及抗癌机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(6.25,12.5,25,50,100nmol/L)NSC606985作用特定时间(24,48,72h)后对人卵巢癌COC1细胞的生长抑制效应,用AnnexinV-FITC/PI双染法FCM检测NSC606985对COC1细胞的凋亡诱导效应,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺氧(2%O2)对HIF-1α,AMFR及RhoC mRNA表达水平的影响。用免疫印迹技术(Western blot)检测物理性缺氧及氯化钴(CoCl2)化学模拟缺氧下HIF-1α蛋白的表达水平以及NSC606985对HIF-1α的调控效应。结果:纳摩尔浓度的NSC606985可以显著抑制人卵巢癌COC1细胞生长,呈现剂量及时间依赖效应。不同浓度(50,100,200nmol/L)NSC606985作用24h凋亡细胞比率分别是68.44%,80.86%,91.98%,具有剂量依赖性。在人卵巢癌细胞系COC1和SKOV3中,缺氧(2%O2)14h对HIF-1α、AMFR及RhoC mRNA的表达无影响,却可以上调HO-8910PM细胞HIF-1αmRNA水平。物理性缺氧(2%O2 14h)及CoCl2化学模拟缺氧(50μmol/L或150μmol/L 24h)诱导COC1,HO-8910PM及SKOV3等卵巢癌细胞株HIF-1α蛋白高水平表达,NSC606985(20～400nmol/L 14h或24h)可呈剂量依赖性显著下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白。结论:NSC606985抑制卵巢癌细胞增殖具有剂量和时间依赖性,可能与诱导细胞凋亡相关。缺氧下HIF-1α在卵巢癌细胞的恶性生物学行为中发挥重要作用,NSC606985可通过下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白发挥独特的抗癌机制。