基于TGF-β1/Smad 通路探讨红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的保护作用

目的观察红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的保护作用及其对转化生长因子β1（TGF-β1）/ Smad 信号通路的影响。方法采用腺嘌呤（250 mg·kg-1）灌胃建立肾纤维化大鼠模型。将SD 大鼠随机分为对照 组、模型组、氯沙坦组（9 mg·kg-1）及红花黄色素低、高剂量组（9、18 mg·kg-1）,每组10 只,灌胃给药,每天 1 次,连续30 d。检测大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）含量;采用HE 和Masson 染色法观察大鼠肾脏组织病 理学变化;采用RT-qPCR 法检测大鼠肾组织中TGF-β1、Smad4 及Smad7 mRNA 表达情况;采用免疫组化法 及Western Blot 法检测大鼠肾组织中TGF-β1、Smad4 及Smad7 蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组 大鼠血清Cr、BUN 含量显著升高（P＜0.01）;大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P＜ 0.05）,Smad7 mRNA 及蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。与模型组比较,各给药组大鼠血清Cr、BUN 水平明 显降低（P＜0.05,P＜0.01）;各给药组大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）, Smad7 mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。各组大鼠肾脏组织中Smad4 mRNA 及蛋白表达水平无明显 变化（P > 0.05）。结论红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制TGF-β1/ Smad 信号通路有关。     

乳癌组织中胸苷磷酸化酶检测

目的：研究乳癌组织中胸苷磷酸化酶（TP）蛋白和mRNA的表达与微血管密度（MVD）的关系及其临床意义。方法：采用RT-PCR技术检测30例乳癌和17例正常乳腺组织中TP mRNA的表达水平。用免疫组化法检测82例乳癌（包括上述30例）和17例正常乳腺组织TP和CD34的表达，并计算MVD。结果：乳癌细胞的TP蛋白和TP mRNA的表达水平明显高于正常乳腺组织（P〈0．05）；TP蛋白和TP mRNA的高表达率与乳癌组织学分级有关（P〈0．05）；乳癌组织的MVD值明显高于正常乳腺组织（P〈0．01）；TP蛋白高表达组MVD明显高于TP低表达组（P〈0．01）；乳癌TP mRNA高低表达组之间的MVD差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：TP蛋白和TP mRNA在乳癌组织中表达增强，其表达与乳癌的组织学分级有关。     

小儿肾积水肾盂成形术后尿理化性质和尿水通道蛋白2改变的研究

目的 探讨小儿单侧先天性肾盂输尿管连接处梗阻(pyeloureteric junction obstruction,PUJO)肾积水术后1周内尿理化性质和尿水通道蛋白2(aquaporins-2.AQP2)的变化.方法 选取14例符合Grignon法四、五级标准的小儿单侧先天性PUJO.肾积水患儿;经肾盂成形术后给予严格设定的补液标准,收集术后第一、三、五、七天积水侧肾脏和对侧无积水肾脏24 h尿液,分别测定排尿量、渗透压、Na+和肌酐,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定尿液中AQP2水平.结果 相对于对侧无积水肾脏,积水侧肾脏梗阻解除术后1周内尿液AQP2显著降低.尿量明显增多.尿渗透压显著降低,Na+排泄分数显著增加;同时术后1周内双侧肾脏尿液AQP2、排尿量和尿渗透压有升高趋势,而积水侧肾脏Na+排泄分数有减少的趋势;积水侧.肾脏术后第五、七天的尿液AQP2.排尿量和尿渗透压较第一天均显著增加(P<0.05).对侧无积水肾脏术后第五、七天的尿液AQP2和尿渗透压较第一天也显著增加(P<0.05).其余指标在术后小同天数之间差异无统计学意义(P>0.05).结论小儿单侧先天性PUJO解除术后1周内积水侧.肾脏的尿液AQP2和尿渗透压均较对侧尤积水肾脏尿液显著减少.提示梗阻解除后尿液中AQP2可能和尿液浓缩能力改变有关.     

3种膀胱癌细胞系CXCR4蛋白及mRNA的表达

目的:了解3株不同组织来源的膀胱癌细胞系中趋化因子受体CXCR4蛋白和mRNA的表达情况.方法:选取膀胱鳞状细胞癌细胞系SCaBER、移行细胞癌细胞系T24和5637,将细胞接种在鸡蛋膜上制成蜡块,用免疫细胞化学染色方法检测细胞中的CXCR4蛋白,用二步法半定量RT-PCR检测CXCR4 mRNA.结果:不同组织来源的膀胱癌细胞系中均有CXCR4蛋白和mRNA的表达.SCaBER、5637、T24中CXCR4蛋白分别呈强阳性、阳性、弱阳性表达;3种细胞中mRNA表达量分别为1.64±0.22、0.99±0.35、0.46±0.11,依次降低(P<0.05).结论:CXCR4在不同组织来源的膀胱癌细胞中都有表达,但表达强度不同.Expression of CXCR4 protein and mRNA in 3 bladder cancer cell lines in vitroFAN Changhui1,WEN Jianguo1,ZHU Zhiqiang1,ZHENG Xiangyu2,SUO Zhenhe1,LI Zhenzhen1     

幼鼠双侧输尿管梗阻24 h后肾脏水通道蛋白1-4的变化

目的探讨4个月大白鼠双侧输尿管急性梗阻24h后肾脏水通道蛋白1-4的变化。方法14只大白鼠随机分为梗阻组（bilateral ureteral obstruction，BUO，n：7）及对照组（Sham，n=7），梗阻组行双侧输尿管结扎，对照组仅游离输尿管而不结扎，24h后收集动脉血和肾标本，在显微镜下将肾脏分离出内髓（IM）及外髓外带加肾皮质（OSOM＋C）后，分别行免疫杂交实验，检测水通道蛋白。（AQP1-4）的变化。结果BUO24h使血浆渗透压明显增高至（338±3．0）mOsm，原为（300±0．6）mIsm，P〈0．01，血钾显著上升至（5．4±0．2）mmol／L，原为（4．0±0．1）mmol／L，P〈0．01；血浆肌苷（372±5．3）μmol／L，原为（30±2．8）μmol／L，P〈0．01和尿素氮（40．7±1．4）mmol／L，原为（5．8±0．2）mmol／L，P〈0．01明显高于对照组，而血钠低于正常（138．9±0．3）mmol／L，原为（141．0±0．3）mmol／L，P〈0．01。免疫杂交结果发现近端小管上皮细胞AQP，明显降低，下降到对照组的46．6％（P〈0．01）；在肾脏集合管主细胞顶膜上，AQP2的表达明显下降，为对照组的68．1％（P〈0．01）；而基底膜上分布的AQR和AQP4也明显下调，分别为对照组的76．3％和73．2％（P〈0．01）。结论双侧输尿管梗阻24h显著影响肾脏AQP。在近端小管和AQP24。在集合管的表达，使其明显下调。该变化可能对梗阻后水分重吸收障碍并引发低渗性多尿的病理生理过程起重要作用。     

三聚氰胺污染奶粉喂养婴幼儿致双肾结石50例分析

目的:分析三聚氰胺污染奶粉喂养婴幼儿双肾结石的临床诊疗特点.方法:回顾性分析2008年8月至10月郑州大学第一附属医院依据卫生部推荐的<与食用受污染三鹿牌婴幼儿配方奶粉相关的婴幼儿泌尿系结石诊疗方案>诊治的50例(年龄50d～7岁)因食用三聚氰胺污染奶粉而导致双肾结石儿童的临床资料.患儿均用B超测定结石的大小、数目、形态、部位以及有无肾积水和输尿管扩张等.分析尿常规及肾功能的变化.并对所有患儿采取相应的治疗措施.结果:双肾结石患儿的男女比例为3.1:1.发病高峰年龄为6～18个月,占所有患儿的58%.超声结果显示42例(84%)为单纯双肾结石,4例双肾结石合并双输尿管结石,2例双肾结石合并膀胱结石,2例双肾结石合并单侧输尿管结石.66%的患儿双肾结石直径大于4 mm.其中左、右侧肾脏同时出现单发结石9例,同时出现多发结石18例.结石呈松散块状.7例患儿尿常规显示白细胞+～ ,10例患儿红细胞+～ .入院时尿液pH值5.0～7.5.肾功能检测显示11例患儿有肾功能衰竭,其左右侧肾脏结石直径明显大于非肾功能衰竭患者(P<0.05).并发肾积水17例,其中11例为双肾积水,左侧肾脏集合系统分离范围为(18.4±6.4)mm,右侧肾脏为(15.0±5.8)mm.未出现肾功能衰竭的双肾结石患儿均接受内科保守治疗,碱化尿液.出现肾功能衰竭的双肾结石患儿则采用血液透析治疗配合内科保守治疗.50名患儿经治疗,符合卫生部规定的出院标准后允许出院,住院时间为(8±1)d.出院时完全排出结石的患儿21例.结论:6～18个月婴儿为三聚氰胺污染奶粉引起双肾结石的主要发病人群.B超为诊断婴儿泌尿系双肾结石的主要手段.三聚氰胺致双肾结石有较高的肾功能损害发生率,应给予高度关注.按卫生部推荐的诊疗方案效果良好.     

坎地沙坦对大鼠输尿管梗阻后肾脏功能和Na-K-2Cl共转运蛋白2表达的影响

目的 观察坎地沙坦干预对双侧输尿管梗阻(BUO)大鼠肾功能和Na-K-2Cl共转运蛋白2( NKCC2)的影响.方法 30只大鼠随机分为假手术(Sham)、BUO和坎地沙坦干预组(BUO+CAN).BUO组和(BUO+ CAN)组均行BUO手术,(BUO+ CAN)组坎地沙坦干预,24h后解除梗阻再观察48 h收集血液、肾脏标本.免疫印迹实验检测肾脏NKCC2表达水平.结果 梗阻解除后BUO与Sham组比较尿量、尿Na增高[(99±6) μl/(min·kg)比(28±4)μl/(min·kg)]和[(7.0±0.7) μmol/(min·kg)比(4.0±0.4) μmol/(min·kg)],尿渗透压降低,血浆渗透压、醛固酮升高.BUO +CAN与BUO组比较尿量、尿Na降低[(60±7)μl(min·kg)比(99±6)μl(min·kg)]和[(4.9±0.4) μmol/( min·kg)比(7.0±0.7)μmol/( min·kg)],尿渗透压增高,血浆渗透压、血浆醛固酮降低.NKCC2表达BUO组下降到Sham组的24％,(BUO+CAN)组高于BUO组[(58±6)％比(24±7)％].各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 坎地沙坦可阻止BUO后NKCC2下调,纠正代谢紊乱,保护肾功能.     

三聚氰胺泌尿系结石并肾积水患儿41例两年预后分析

2008年中国发生了三聚氰胺污染奶粉事件,当时按照WHO和卫生部推荐的诊断治疗方案进行治疗后,大部分患儿结石排出,症状好转,痊愈出院;但也有部分患儿出院时泌尿系结石、积水并未消失,而继续在外院进行药物治疗[1].文献[2]报道动物摄入三聚氰胺会造成泌尿系统损害,可增加泌尿系出现恶性肿瘤的风险.作者对郑州大学第三附属医院泌尿外科收治的41例三聚氰胺泌尿系结石(melaminerelated urinary stone,MUS)合并肾积水的患儿进行2 a随访,患儿的预后及转归报道如下.     

丹参多酚酸盐对肾间质纤维化模型大鼠的改善作用及机制研究

目的:研究丹参多酚酸盐对肾间质纤维化(RIF)模型大鼠的改善作用及可能机制。方法:将50只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯沙坦组(阳性对照组,9 mg/kg)和丹参多酚酸盐低、高剂量组(18、36 mg/kg),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均灌胃腺嘌呤250 mg/kg建立RIF模型。造模结束后,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,灌胃体积均为10 mL/kg,每天1次,连续30天。末次给药后,采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和尿液中24 h尿蛋白(24 h UPro)水平;采用苏木精-伊红染色法和Masson染色法分别观察大鼠肾组织病理学特点和纤维化情况,对肾小管损伤、肾小球硬化程度进行评分并计算肾组织阳性染色面积百分比;采用免疫组化法和Western blot法分别测定大鼠肾组织中Wnt蛋白(Wnt5a、Wnt5b)、β-联蛋白(β-catenin)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠Scr、BUN、24 h UPro水平和肾小管损伤评分、肾小球硬化评分、肾组织阳性染色面积百分比以及Wnt5a、β-catenin蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05),Wnt5b蛋白的表达水平显著降低(P<0.05);显微镜下可见大鼠肾组织出现系膜增生、纤维组织增多、炎性细胞浸润等病理学变化。与模型组比较,氯沙坦组和丹参多酚酸盐低、高剂量组大鼠的上述指标均显著改善(P<0.05),且丹参多酚酸盐的作用具有一定的剂量依赖性趋势。结论:丹参多酚酸盐对腺嘌呤致RIF模型大鼠具有改善作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

胸苷磷酸化酶在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的　研究胸苷磷酸化酶(TP)在乳腺癌中的表达与癌组织的临床病理特征和肿瘤内微血管密度 (IMVD)的关系。方法　对82例乳腺癌标本及17例正常乳腺组织进行免疫组化染色测定TP的表达情况;通过 CD34免疫组化染色检测乳腺癌组织中的IMVD。结果　乳腺癌细胞中的TP表达阳性率高于正常乳腺组织(P <0.05);TP高表达组中IMVD明显高于TP低表达组(P<0.05);乳腺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级癌组织之间的TP表达率有 明显差异(P<0.05)。结论　乳腺癌TP表达与其组织学分级和血管生成有关。