耳廓毛母质瘤1例

患儿 ,女 ,6岁。因左耳廓新生物渐进性长大 1个月余就诊 ,门诊以“左耳廓新生物”于 2 0 0 3年 1月 2 1日收治入院。询问病史 ,曾在外院行细胞学穿刺提示为“血性分泌物”。体检无异常发现。局部检查 :左侧耳甲腔内新生物 1 .5cm× 0 .8cm×0 .8cm大小 ,质地中等 ,无压痛 ,与耳廓粘连紧密 ,表面紫色发亮 ,通过包膜隐约可见内有灰白色样物存在 ,周围皮肤无红肿 ,耳背皮肤正常 ,周围未触及肿大淋巴结 ,各项实验室检查无异常发现。于 2 0 0 3年 1月 2 4日在全麻下手术 ,旁开肿块周围 3mm耳廓皮肤为切缘 ,深至耳廓软骨 ,将肿瘤完整切除 ,并用同…     

鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用

目的：建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法：制作鼠尾胶原，并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果：自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞，细胞角蛋白18表达阳性，免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论：成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便，成本低廉。     

SD新生大鼠耳蜗螺旋神经元的原代培养

目的建立用自制的鼠尾胶原联合胰酶消化法原代培养SD新生大鼠耳蜗螺旋神经元。方法采用出生3 d内的SD大鼠,取螺旋神经节组织,通过胰酶消化后在自制鼠尾胶原包被的培养皿中进行原代培养,应用神经微丝蛋白进行免疫组化鉴定。结果获得的螺旋神经元细胞在体外能较快地贴壁,可以存活、生长,细胞形态良好。结论自制鼠尾胶原联合胰酶消化的培养方法可获得良好状态的螺旋神经元细胞,为原代培养螺旋神经元提供了新思路。     

应用行为学模型研究水杨酸致大鼠耳鸣的主要产生部位

目的通过建立跳台反射法耳鸣动物行为学模型,探讨水杨酸致大鼠耳鸣的主要产生部位。方法 40只健康Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只。两组动物分别建立跳台反射行为学模型后,实验组经腹腔注射水杨酸钠完成耳鸣动物造模,对照组腹腔注射等量生理盐水;造模成功的实验组动物行双侧听神经切断术后,再次腹腔注射水杨酸钠,通过动物跳台反射行为测试再次判断实验组动物是否仍有耳鸣产生;对照组动物不行双侧听神经切断术,其余实验步骤同实验组;比较两组动物平均每10次刺激间隔期出现假阳性反应的次数。结果与对照组相比,实验组动物双侧听神经切断、注射水杨酸钠2小时后,在无声音刺激条件下单位时间内出现跳台动作频数明显减少,平均每10次刺激间隔期出现的假阳性反应为1.59±0.12次,与对照组(2.69±0.78次)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论双侧听神经切断术后水杨酸钠注射不能使大鼠产生耳鸣,说明听觉外周是水杨酸导致大鼠产生耳鸣的关键部位。     

串珠素反义cDNA质粒转染对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响

目的：研究串珠素反义cDNA质粒转染对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响。方法：利用阳离子脂质体作为载体，把重组真核表达载体串珠素反义cDNA质粒pAP转染喉癌细胞Hep-2。通过RT—PCR、Westernblot及MTT法检测转染后Hep-2细胞串珠素mRNA、蛋白质表达及细胞增殖水平，并观察转染后Hep-2细胞对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的反应性。将Hep2细胞分3组：①未转染的Hep-2细胞组（WT组）；②空载体ph8Apr—neol转染组（neo组）；③串珠素反义cDNA质粒pAP转染组（pAP组）。结果：将质粒pAP成功地转入Hep2细胞，获得了稳定表达串珠素反义cDNA基因的细胞系。串珠素mRNA和蛋白质水平在pAP组低表达，在WT组和neo组高表达，均差异有统计学意义（均P〈O．01）。在0．1％FCS的RPMI1640培养基培养下，WT组、neo组和pAP组细胞的增殖率均降低，但pAP组细胞的增殖与WT组和neo组细胞相比明显减低；在0．1％FCS加1μg／L bFGF的RPMI1640培养液培养下．WT组和neo组细胞增殖接近正常，但pAP组细胞的增殖能力较弱。结论：串珠素反义cDNA质粒转染可以有效抑制喉癌细胞Hep2的增殖能力。     

串珠素在喉癌细胞Hep-2中的表达

目的:研究串珠素(perlecan)在喉癌细胞Hep-2中的表达,探讨其与喉癌细胞的生长、浸润及转移的关系。方法:培养Hep-2和正常永生化表皮细胞系(Hacat),提取总细胞RNA,应用RT-PCR方法检测串珠素mRNA在Hep-2和Hacat细胞中的表达;应用免疫组织化学染色检测串珠素在Hep-2细胞和Hacat细胞中的表达。结果:串珠素mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸收度(A)值为:0.831 0±0.050 4;串珠素mRNA在Hacat细胞中低表达,平均相对积分A值为:0.274 3±0.062 9。差异有统计学意义(t=19.684,P<0.01)。免疫组织化学染色表明串珠素在Hep-2细胞中高表达(A=0.255 7±0.028 7),在Hacat细胞中低表达(A=0.073 0±0.011 1),差异有统计学意义(t=26.982,P<0.01)。结论:串珠素与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系。     

喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子和环氧化酶-2 mRNA检测

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化酶(COX-2) mRNA的表达情况及与癌组织生长、浸润及转移的关系.方法:应用RT-PCR方法检测62例喉鳞状细胞癌、54例癌旁和9例正常喉黏膜组织中VEGF mRNA及COX-2 mRNA的表达.结果:喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达量高于癌旁和正常喉黏膜组织(P＜0.01),Ⅰ、Ⅱ期喉鳞癌组织2者的表达量低于Ⅲ、Ⅳ期(P＜0.01).喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达呈正相关(r＝0.756,P＜0.01).结论:VEGF和COX-2与喉鳞癌的生长、浸润及转移有密切关系,2者有协同作用.     

水杨酸钠对新生小鼠下丘核区神经干细胞分化的影响

目的　在体外培养新生小鼠下丘核区NSCs的基础上 ,研究水杨酸钠对NSCs分化的影响。方法　分离、收集新生昆明小鼠下丘核区脑组织 ,体外经EGF和bFGF刺激下培养 ;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向和水杨酸钠给药后分化为神经元的细胞的GABA和Glu蛋白表达。结果　培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、增殖 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤除生长因子后向神经元和胶质细胞分化。干细胞分化的神经元中的GABA和Glu蛋白表达位于细胞质和细胞核。在无水杨酸钠组两类递质阳性着色细胞数没有明显差异 ;水杨酸钠给药后Glu阳性着色细胞数较GABA阳性着色细胞数明显增加 ,吸光度值比较有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　①小鼠下丘核区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞。②水杨酸钠具有促进NSCs分化为Glu阳性神经元的作用。     

镁对大鼠噪声性听力损失的防护作用

目的观察镁对大鼠噪声性听力损失的防护作用。方法雄性SD大鼠24只随机分成3组,分别为低镁组100 mg/kg,适量镁组507 mg/kg及高镁组1 000 mg/kg,采用对喂法(pair-fed)喂养镁含量不同的人工半合成饲料,20 d后将大鼠暴露于强度为105 dB SPL,中心频率为4 kHz的倍频程噪声3 h后,检查其听性脑干反应(au-ditory brainstem response,ABR)和畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emissions,DPOAE)。结果 ABR阈移低镁组为14.2±1.7,适量镁组为24.3±3.1,高镁组为4.6±1.7,3组间阈移值差异有显著性意义(P<0.05),3组DPOAE在噪声暴露前后幅值改变分别为低镁组19.0±3.8～20.0±4.5 dB,适量镁组12.0±3.0～14.5±3.5dB,高镁组3.5±0.8～4.0±1.0 dB,3组间幅值改变差异有显著性意义(P<0.05)。结论适量镁能降低大鼠对噪声暴露后的敏感性,对噪声性听力损失有防护作用。