细胞保护蛋白在人体移植肾中的表达

目的 研究细胞保护蛋白在人体移植肾中的表达情况和临床意义. 方法采用免疫组化染色技术检测人体移植肾急性排斥反应(AR)、慢性排斥反应(CR)和无排斥反应 (NR)3组各10例中细胞保护蛋白A20、血红素加氧酶-1(HO-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-XL蛋白(Bcl-XL)的表达情况. 结果 A20、HO-1和Bcl-XL主要表达于内皮细胞、平滑肌细胞和浸润性单核细胞.A20在AR中表达强于CR[(5.04±0.71)vs(3.20±0.64),P＜0.01];A20在NR中不表达.HO-1在AR中表达(7.91±2.24),在CR和NR中不表达.Bcl-XL在3组中均表达(AR:10.62±3.17;CR:8.50±2.45;NR:11.03±2.77),但在CR中表达较弱;AR、 NR与CR相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05);而AR组和NR组间的差异无统计学意义. 结论 A20和HO-1可能在AR中发挥细胞保护作用;而在CR中,A20可能是发挥保护作用的主要蛋白.     

TNF-α诱导血管内皮细胞凋亡的研究

血管内皮细胞对维持心血管系统的正常功能有着重要的作用,它的凋亡引起的血管萎缩衰退,不仅在临床上造成很多人类疾病而且会促进感染性休克的发生、发展。肿瘤坏死因子α有着强大的细胞毒性,可以造成血管内皮细胞凋亡。本文对肿瘤坏死因子α造成血管内皮细胞凋亡的机制进行综述。     

高葡萄糖促进人内皮细胞NOX4表达

目的 观察高葡萄糖刺激HUVECs时NOX4表达水平的变化.方法 倒置显微镜下观察人脐静脉内皮细胞形态;用免疫组织化学法检测人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原的表达;实验设对照组(给予含生理浓度葡萄糖的基础培养液培养)、高葡萄糖组(30 mmol/L葡萄糖处理16 h)和 DPI干预组(30 mmol/L葡萄糖加10 μmol/L的NADPH氧化酶抑制剂DPI处理16 h),用RT-PCR检测NOX4 mRNA水平.结果 HUvECs中Ⅷ因子相关抗原表达为阳性;高葡萄糖组的HUVECs中NOX4 mRNA表达上调与对照组相比差异有显著性;而DPI干预组的HUVECs中NOX4 mRNA表达与对照组相比差异无显著性.结论 高葡萄糖能促进HUVECs中NOX4 mRNA表达,DPI能抑制HUVECs中NOX4 mRNA表达.     

血管内皮生长因子在脑膜瘤中的表达及与复发的关系

目的 探讨脑膜瘤中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及血管生成与术后复发的关系.方法 用免疫组织化学方法检测38例脑膜瘤(良性31例,恶性7例)组织中的VEGF蛋白表达情况与微血管数量(MVQ),显微镜下观察其阳性细胞数和阳性血管数,并对数据进行分析.结果 良、恶性脑膜瘤VEGF表达的阳性率分别为80.6%(25/31)和100%(7/7),差异有统计学意义(P＜0.05);VEGF表达阳性的MVQ平均值(46.3±8.6)高于阴性组(23.94±7.8),差异有统计学意义(P＜0.01).VEGF的表达与MVQ值相关(r=0.75,P＜0.01).结论 VEGF在脑膜瘤血管生成中起重要作用,能促进脑膜瘤血管的形成.脑膜瘤VEGF表达、肿瘤血管生成可能对术后复发有重要作用.     

血管内皮生长因子C与乳腺癌

血管内皮生长因子C（VEGF—C）是近年来发现的一种与血管内皮生长因子（VEGF）同源的内皮细胞生长因子，亦被称为特异促淋巴管生成因子。它的主要作用是与淋巴管内皮细胞上的特异受体血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）以及血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）结合，介导了淋巴管的发生、生长和增生。     

氧相关HRE启动子控制下表达hVEGF165基因重组2型腺相关病毒的获得及鉴定

目的包装及鉴定低氧反应元件（HRE）启动子控制下缺氧诱导目的基因hVEGF165基因表达的2型重组腺相关病毒。方法磷酸钙三质粒共转染方法将pAAV—HRE9-VEGF165、pAAV—Rep／cap、pHelper质粒转染HEK293T细胞，制备2型重组腺病毒相关病毒（rAAV2）。分离培养S—D大鼠心肌细胞，转染rAAV，细胞固定后做免疫细胞荧光染色，检测细胞内血管内皮细胞生长因子（VEGF165）蛋白的表达。结果pAAV—HRE9-VEGF165质粒经测序鉴定，结果与NCBIGenBank公布的人VEGF165 eDNA核苷酸序列（AB021221）完全一致，含HRE启动子及目的基因hVEGF165的2型重组非复制型腺相关病毒包装成功，可感染原代培养的大鼠心肌细胞，缺氧可诱导VEGF165蛋白表达。结论成功包装并鉴定了rAAV—HRE9-hVEGF165载体，可有效转染心肌细胞，VEGF165基因的适时表达，为缺血性心肌疾病的“分子搭桥”治疗提供了更可能的安全性。     

小鼠视网膜新生血管模型的简易制备

目的:采用简便易行的方法制备小鼠视网膜新生血管动物模型。方法:新生小鼠20只随机分为两组,实验组于出生后第7~12 d置于75%氧箱内饲养,对照组于正常环境饲养。至第17 d时处死小鼠,摘取眼球,固定切片,行苏木精-伊红(H-E)染色,计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数,免疫组化法观察视网膜各层血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:实验组平均每个切面突破视网膜内界膜的内皮细胞核数为(25.70±4.90)个,对照组平均为(0.85±1.02)个,两者比较差异有显著性意义(P<0.01);对照组VEGF染色较实验组减弱。结论:该方法能建立稳定的视网膜新生血管动物模型。     

异丙酚对缺氧复氧损伤人血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶与核转录因子κB表达的影响

目的:探讨异丙酚对缺氧复氧损伤人血管内皮细胞凋亡及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:培养至融合状态的脐静脉内皮细胞随机分为3组。正常对照组(C组)、缺氧复氧组(HR组)和缺氧复氧 异丙酚组(PR组),PR组按加入异丙酚浓度不同分为3个亚组(25PR、50PR、100PR组)。结果:PR组细胞凋亡降低,与HR组比较差异显著(P<0.01),50PR组、100PR组与25PR组比较差异显著(P<0.01)。PR组NF-κB和iNOSmRNA降低表达,与HR组比较差异显著(P<0.01);50PR组、100PR组与25PR组比较差异显著(P<0.01)。结论:异丙酚降低缺氧复氧损伤所致的内皮细胞凋亡,与其抑制缺氧复氧引起的NF-κB表达升高,减少iNOS生成有关。     

大鼠脑微血管内皮细胞的培养

血管内皮细胞在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用。本文通过胶原酶消化、密度梯度离心等技术建立一种程序简便、经济、稳定、获得细胞纯度较高的体外分离、长期培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。     

异丙酚对缺氧复氧损伤人血管内皮细胞caspase-3和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨异丙酚对缺氧复氧损伤所致人血管内皮细胞凋亡及caspase-3、Bcl-2蛋白表达的影响。方法建立人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤模型。将细胞缺氧培养30min再复氧,或加入不同浓度异丙酚孵育30min后再进行缺氧复氧处理,在复氧不同时相点（2、6、24和48h）以流式细胞仪计数凋亡细胞数量,并采用免疫细胞化学方法检测caspase-3和Bcl-2蛋白表达的变化。结果缺氧复氧后内皮细胞呈现典型的凋亡形态,复氧2h凋亡细胞数量开始增加,复氧6h时升高显著,至24h达峰值;异丙酚明显抑制复氧后细胞凋亡的发生。正常体外培养人血管内皮细胞Bcl-2蛋白表达较低,随复氧时间延长Bcl-2表达明显下调;25μmol/L异丙酚预处理可使复氧后内皮细胞Bcl-2表达升高,与相应缺氧复氧组比较差异有显著性（P〈0.01）,50、100μmol/L异丙酚组作用相似,不同浓度异丙酚作用呈现一定的剂量效应关系。缺氧复氧损伤使caspase-3蛋白表达增强,复氧24h后达高峰;异丙酚预处理以剂量依赖方式显著下调caspase-3表达（P〈0.01）。结论异丙酚降低缺氧复氧损伤所致的内皮细胞凋亡,可能与其抑制缺氧复氧引起的caspase-3活化、上调Bcl-2蛋白表达有关。