不同浓度七氟醚对人脑胶质瘤细胞U251替莫唑胺抵抗的影响及机制初探

目的 探究不同浓度七氟醚对人脑胶质瘤细胞U251替莫唑胺(TMZ)抵抗的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 培养对数生长期的人脑胶质瘤细胞U251,传代后将细胞分为3组:对照组、低七氟醚组及高七氟醚组.对照组在5%CO2气体条件下培养,低七氟醚组在5%CO2+1%七氟醚气体条件下培养,高七氟醚组在5%CO2+2.5%七氟醚气体条件下培养,总气流量为2 L/min.MTT法检测3组细胞TMZ半抑制浓度(IC50)的变化,荧光定量链式聚合酶反应(qPCR)检测细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达水平的变化,蛋白免疫印迹(Western blotting)检测HIF-1α蛋白表达水平的变化.结果 MTT结果显示对照组细胞TMZ IC50值显著高于高七氟醚组IC50值(P<0.05),而与低七氟醚组IC50值差异无统计学意义(P>0.05).qPCR结果显示对照组HIF-1αmRNA相对表达水平显著高于低七氟醚组及高七氟醚组(P<0.05),且低七氟醚组HIF-1αmRNA相对表达水平显著高于高七氟醚组(P<0.05),Western blotting结果显示对照组HIF-1α蛋白表达水平明显高于低七氟醚组及高七氟醚组,且低七氟醚组HIF-1α蛋白表达水平明显高于高七氟醚组.结论 七氟醚促进人脑胶质瘤细胞U251对TMZ的敏感性,可能与下调HIF-1α有关.     

替莫唑胺联合伽马刀与单纯伽马刀治疗脑转移癌疗效比较

目的 分析比较替莫唑胺联合伽马刀治疗脑转移癌与单独伽马刀治疗脑转移癌的临床疗效以及不良反应.方法 将确诊脑转移癌病人34例,分成两组:单独伽马刀治疗组(单独组,总剂量35~48 Gy/10~12 f);替莫唑胺联合伽马刀治疗组(联合组,伽马刀治疗期间同时予以口服替莫唑胺150 mg·m-2·d-1,d1~5,放疗结束后继续予以3周期替莫唑胺辅助化疗,方案为150 mg·m-2·d-1,d1~5,28 d为1周期).比较分析两组近期疗效以及不良反应.结果 单独组和联合组治疗近期有效率分别为56.25%和88.89%(P=0.031),1年生存率分别为43.75%和55.56%(P=0.216).两组白细胞、血小板减少发生概率相似(P>0.05).急性脑损伤发生率较高,均以I级损伤为主(联合组为44.44%,单独组为50%).结论 替莫唑胺联合伽马刀治疗脑转移癌是一种安全有效的新型治疗手段,病人耐受性较好.     

术后辅助不同放化疗方案对高级别胶质瘤患者的预后分析

目的分析术后辅助放化疗对高级别胶质瘤(HGG)患者生存期的影响.方法选择手术切除且经病理证实为HGG的患者81例,其中术后辅助替莫唑胺(TMZ)同步放化疗及6个疗程标准化疗(Stupp方案)患者42例,Stupp方案后TMZ继续化疗39例.分析术后不同放化疗方案对患者生存期的临床疗效.结果Stupp方案后继续化疗组平均生存期31.87个月较Stupp方案化疗组平均生存期24.38个月长(P=0.002),差异有统计学意义.TMZ化疗的不良反应主要发生在前6周期,延长化疗周期并未增加化疗毒性.结论Stupp方案化疗结束后继续化疗可以延长HGG患者的总生存期(OS).     

替莫唑胺辅助化疗对恶性脑胶质瘤术后疗效和生存情况的分析

目的分析替莫唑胺(temozolomide,TMZ)同步化疗对恶性脑胶质瘤术后的治疗效果与生存情况影响。方法回顾选取我院收治的恶性脑胶质瘤手术患者97例,按照术后药物治疗方案的差异,分成两组,对照组47例,单纯采取化疗药物顺铂(cis-platinum complexes,NP)治疗,研究组50例,以TMZ同步NP的方案治疗。以6周期后评价两组疗效情况,并对全部入选者进行长期随访,统计两组患者治疗1、2年的生存情况。结果研究组总有效率(84.00%)显著高于对照组(59.57%)(P<0.05);用药1、2年后,研究组生存率(分别为82.00%、58.00%)均显著高于对照组(分别为63.83%、31.91%)(P均<0.05)。结论 TMZ同步化疗可显著改善恶性脑胶质瘤术后患者的病情程度,提高其生存周期,是一种安全有效的治疗模式。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP109逆转胶质母细胞瘤U251细胞对替莫唑胺耐药性的机制研究

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP109逆转胶质母细胞瘤U251细胞的耐药性机制。方法:建立对替莫唑胺(TMZ)耐药的TR/U251细胞,试验分为正常对照组、TMZ组(40μmol/L)和TMZ(40μmol/L)+RGFP109(0~120μmol/L)不同浓度组,加入相应药物作用24 h后,CCK-8法检测细胞存活率,计算半数抑制浓度(IC_(50))。TUNEL法和Annexin V/PI法检测正常对照组、TMZ组和TMZ+RGFP109(42μmol/L)组细胞的凋亡情况,免疫印迹法检测3组细胞中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、存活蛋白(Survivin)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤x L(Bcl-x L)蛋白表达,凝胶迁移实验检测3组细胞中p65乙酰化水平及其与κB-DNA的结合能力。结果:与正常对照组和TMZ组比较,TMZ+RGFP109不同浓度组细胞存活率明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。当RGFP109浓度为42μmol/L时,TMZ对TR/U251细胞的敏感性与U251细胞相同。与正常对照组比较,TMZ组细胞中MGMT、Survivin、Bcl-2、Bcl-x L蛋白表达均增强(P<0.01),p65乙酰化水平无明显变化,但p65与κB-DNA的结合能力增强(P<0.01)。与TMZ组比较,TMZ+RGFP109组细胞中MGMT、Survivin、Bcl-2、Bcl-x L蛋白表达均减弱(P<0.01),p65乙酰化水平增强(P<0.01),p65与κB-DNA的结合能力减弱(P<0.01)。结论:RGFP109可通过下调转录因子κB调节的抗凋亡蛋白表达,减弱p65与κB-DNA的结合来逆转U251细胞对TMZ耐药。     

同期推量调强放疗联合替莫唑胺治疗脑转移瘤的疗效观察

摘 要：［目的］ 评价同期推量调强放疗（SIB-IMRT）联合替莫唑胺（TMZ）治疗脑转移瘤的临床有效性和安全性。［方法］ 采用同期推量调强放疗联合替莫唑胺治疗经原发灶病理诊断的脑转移瘤患者83例。全脑放疗30Gy/10F,同期脑转移灶推量调强放疗50Gy/10F,放疗第一天开始口服替莫唑胺75mg/(m2·d),连续14天,放疗结束后1个月继续予6个周期替莫唑胺辅助化疗,150mg/(m2·d),连用5天,28天为1个周期。［结果］ 近期有效缓解率（RR）为91.56%,中位生存期为14.38个月,1年总生存率为63.85%。对预后因素行单因素和多因素分析显示KPS评分及脑转移个数对总生存有影响（P<0.05）。Ⅰ度和Ⅱ度中性粒细胞下降的比例为56.63%,Ⅰ度血小板下降的比例为24.1%,Ⅰ度和Ⅱ度恶心呕吐的比例为72.29%,Ⅰ度和Ⅱ度头痛的比例为62.66%,无Ⅳ度不良反应。［结论］ 同期推量调强放疗联合替莫唑胺治疗脑转移瘤可延长生存时间,不良反应轻。但是,同期推量调强放疗联合替莫唑胺治疗脑转移瘤的治疗是否可以成为脑转移治疗的一种有效方法,还需进一步的临床随机对照试验证实。     

替莫唑胺在颅内肿瘤中的治疗进展

替莫唑胺是一种咪唑四嗪类烷化剂.作为抗肿瘤药物,替莫唑胺具有脂溶性强、易透过血脑屏障的特点,临床已作为治疗颅内肿瘤的一线药物.本文就替莫唑胺在颅内肿瘤治疗中的使用、进展、与其他化疗药物包括靶向制剂的联合应用,该药的耐药机理以及基因组学上的相关性进行了总结.     

替莫唑胺联合顺铂治疗复发性高级别脑胶质瘤的临床分析

胶质瘤是成人中枢神经系统最常见的原发肿瘤,占全部颅内肿瘤的40％～50％［1］,其中恶性胶质瘤治疗效果差,易复发。胶质瘤复发后根据复发部位、肿瘤大小、颅内压情况等情况综合考虑,可采取手术结合放疗、化疗及分子靶向治疗的综合治疗［2］。化疗是其中重要的治疗环节。替莫唑胺为新一代烷化剂类化疗药物,具有服用简便、毒性反应低等特点,单一口服替莫唑胺治疗,能取得一定疗效,但总体效果仍差;顺铂是传统的神经肿瘤化疗药物,单药治疗复发性 HGG 有效率为10％～28％［3］。收集2012年1月至2015年3月因 HGG 复发就诊于是我院神经外科及附属肿瘤医院住院治疗的患者48例,对比单一替莫唑胺和联合顺铂治疗复发性HGG 的近期疗效及安全性,现报告如下。     

miR-130b在胶质瘤对替莫唑胺耐药中的作用

目的:探讨微小RNA-130b(microRNA-130b,miR-130b)在胶质瘤细胞中的表达及其调控体外胶质瘤细胞对替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药中的作用。方法:利用RT-qPCR法检测miR-130b在胶质瘤细胞株U251、SHG-44和U87中的表达水平;计算TMZ对不同胶质瘤细胞株(U251、SHG-44和U87)的半数抑制浓度(IC_(50));通过不同浓度梯度的TMZ作用于体外U251细胞,从而获得相对稳定的对TMZ耐药的U251(U251/TMZ resistance,U251/TR)细胞,计算TMZ对U251/TR细胞的IC_(50)及耐药指数(resistance factor,RF);使用miR-130b模拟物(miR-130b mimics)和miR-130b抑制物(miR-130b inhibitor)瞬时转染体外胶质瘤细胞;CCK-8法检测体外胶质瘤细胞的活力;流式细胞术检测胶质瘤细胞凋亡;通过生物信息学工具分析miR-130b可能的靶基因,萤光素酶报告基因实验测定萤光素酶活性;电泳迁移率变动分析检测核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活性;Western blot法测定肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Bcl-2、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)和survivin蛋白在胶质瘤细胞中的表达水平。结果:TMZ对不同胶质瘤细胞株(U251、SHG-44和U87)的IC_(50)分别为54.8、94.8和149.6μmol/L;TMZ对U251/TR细胞的IC_(50)为(446.5±61.3)μmol/L,其RF为8.1;转染miR-130b mimics可明显增强TMZ对U251/TR细胞的生长抑制和凋亡诱导作用;转染miR-130b inhibitor可显著抑制TMZ对U251/TR细胞的生长抑制和凋亡诱导作用;萤光素酶报告基因实验验证TNF-α是miR-130b的直接作用靶点;与mimics NC组相比,转染miR-130b mimics后U251/TR细胞中的NF-κB活性及TNF-α、Bcl-2、XIAP和survivin蛋白表达均明显下调;与inhibitor NC组相比,转染miR-130b inhibitor后U251细胞中的NF-κB活性及TNF-α、Bcl-2、XIAP和survivin蛋白表达均显著上调(P0.05);NF-κB抑制剂Bay 11-7082可增强TMZ对U251/TR细胞凋亡的诱导作用。结论:miR-130b在耐药型胶质瘤细胞中表达下调,并通过靶向调控TNF-α/NF-κB通路增强TMZ对体外胶质瘤细胞的作用。     

替莫唑胺联合卡培他滨在神经内分泌肿瘤中的临床应用

近年来,神经内分泌肿瘤（neuroendocrine neoplasm,NEN）的治疗受到越来越多的关注,但多数治疗方案未能使肿瘤产生客观缓解。生长抑素类似物、依维莫司和舒尼替尼能显著延长患者无进展生存期（progression-free survival,PFS）,但客观缓解率（objective response rate,ORR）较低。以链脲霉素为基础的化疗方案因毒性较大且在国内尚未上市,在临床使用中受到限制。一些小样本研究提示替莫唑胺联合卡培他滨（CAPTEM）有较高的ORR和较长的PFS。然而,目前鲜见CAPTEM方案的系统性综述。本文通过近年来国内外文献报道,对CAPTEM方案治疗神经内分泌肿瘤的理论基础、疗效、疗效预测生物标志物、具体给药方案及不良反应等方面作一综述。