大鼠肺表面活性蛋白C基因的克隆及原核表达

目的构建高氧下早产大鼠肺表面活性蛋白C基因原核表达质粒,实现其在大肠杆菌中的表达。方法孕21 d SD早产大鼠,生后12 h暴露于85%高氧中,7 d后处死,取肺组织,提取RNA,并合成cDNA,进行PCR扩增,克隆进pMD18-T载体,经过酶切和测序验证,成功构建原核表达载体pET-28a(+)-sp-c,重组质粒在大肠杆菌BL21菌株中经IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析检测表达产物。结果经酶切和测序验证,成功构建pET-28a(+)-sp-c质粒,高效表达出相对分子质量21 000的融合蛋白。结论在大肠杆菌中成功表达SP-C重组融合蛋白,有助于研究SP-C蛋白与内质网之间的作用机制、SP-C错折叠蛋白在肺上皮A549细胞中的表达以及对AECⅡs增殖、分化及凋亡的影响。     

大连汉族成年男性腰椎骨密度CT定量研究

目的探索健康成年男性骨密度及其峰值变化规律,为骨质疏松症的防治提供科学依据,同时为建立中国北方成人的正常骨密度值数据库积累数据。方法采用定量CT技术和骨密度专用分析软件测量分析腰椎L1-L5椎体骨密度。结果大连地区成人腰椎骨密度平均值(197.27±23.71)mg/ml、峰值(212.60±7.08)mg/ml,诊断骨质疏松症的正常参考值(212.60±59.26)mg/ml;平均峰值出现在24-32岁,之后骨密度随年龄逐渐缓慢下降,48-50岁骨量丢失显著;其中L4椎体在20-59岁的各年龄段的骨量变化均有显著性差异,比其他腰椎更具有年龄敏感性。结论大连地区汉族男性成人应从48岁关注预防骨质疏松症。     

慈利县渡坦坪村肿瘤发病原因调查分析

随着社会经济的发展以及人们生活行为与方式的改变,疾病谱已由以传染性疾病为主向以慢性非传染性疾病为主的方向发展,肿瘤的发病率和死亡率增加,已成为严重危害人民群众健康的重要疾病。大量资料表明,恶性肿瘤已成为居民的第1、2位死因 。随着慢性病防治工作的深入开展,肿瘤防治受到广泛关注。现将慈利县渡坦坪村1996～2008年肿瘤发病情况分析如下。     

miR-21及PDCD4在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的:了解miRNA-21(miR-21)和其靶基因程序性细胞死亡4(programmed cell death 4,PDCD4)在乳腺浸润性导管癌中的表达情况.方法:运用原位杂交及免疫组化技术检测128例乳腺浸润性导管癌组织中miR-21及PDCD4的表达情况,分析两者与临床病理特征之间的关系.结果:miR-21与PDCD4的表达呈负相关,相关系数rs=0.727(P＜0.01);在远处转移组中miR-21的表达高于非远处转移组(P＜ 0.001),PDCD4的表达则低于非远处转移组(P＜0.001);两者表达均与肿瘤大小及淋巴结转移情况相关(P＜0.05),而与激素受体以及绝经状况不相关(P＞0.05).结论:乳腺浸润性导管癌组织中miR-21高表达与PDCD4低表达相关,其或许均能提示该病较高的恶性程度.     

幽门螺杆菌GGT基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的: 克隆幽门螺杆菌( H pylori)γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)基因,实现GGT基因在大肠杆菌中的表达.方法: 从胃癌患者胃黏膜组织中分离培养获得H pylori,提取其基因组DNA,对GGT基因进行PCR扩增,克隆进pMD18-T载体,酶切和测序验证,构建原核表达载体pET-28a(+)-GGT,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot分析检测表达产物.结果: 成功克隆了GGT基因,经酶切和测序验证正确,成功构建了pET-28a(+)-GGT质粒,高效表达出了68 kDa的融合蛋白.结论: 在大肠杆菌中成功表达了GGT重组融合蛋白,为进一步研究GGT与线粒体介导的细胞凋亡之间的关系奠定了基础.     

N-甲基-D-天冬氨酸受体在大鼠丘脑前核和扣带后回的表达

目的探讨大鼠丘脑前核和扣带后回内N-甲基-D-天冬氨酸受体NMDAR2A,NMDAR2B及NMDAR1(NR2A.NR2B及NR1)mRNA的表达,从形态学角度为系统研究丘脑前核的功能提供了依据。方法应用原位杂交方法检测丘脑前核及扣带后回内NR2A,NR2B以及NR1 mRNA的表达。结果原位杂交阳性反应产物为棕黄色,主要分布在神经元核周围胞浆中,胞核基本不着色。在丘脑前核,阳性神经元分布较密集,细胞形态较一致。扣带后回皮质阳性神经元在在大脑皮质不同部位分布有差异,分子层染色最弱,外颗粒层密集分布且染色增强,余四层较外颗粒层松散,染色细胞减少。结论 NR2A,NR2B以及NR1广泛分布在丘脑前核和扣带后回。     

幽门螺杆菌毒力因子的研究进展

幽门螺杆菌(HP)是造成上消化道疾病的主要因素。HP能分泌许多致病因子,这些致病因子分为定植因子和毒力因子。HP的各种毒力因子均具有遗传多样性和地区分布的差异,与不同HP相关性疾病之间存在相关性。毒力因子在病变过程中起的作用不尽相同,决定感染后炎症、溃疡及胃癌等临床转归。本文就其研究现状予以综述。     

中国汉族迟发型2型糖尿病与胰高血糖素受体基因Gly40Ser突变的关系

目的：探讨胰高血糖素受体（GCG－R）基因外显子2Gly40Ser突变是否与中国人迟发型非胰岛素依赖型糖尿病（non-insulin-dependent diabetes millitus,NIDDM)相关。方法：选择湖南地区汉族人NIDDM患者82例及正常对照136例,应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态分析方法,检测Gly40Ser突变。结果：受检者均不存在Gly40Ser的错义突变。结论：该突变不是引起中国人NIDDM的重要遗传因素。文献报道白种人CGC－R基因Gly40Ser与NIDDM相关,本研究提示此种相关有种族差异性。     

基于高通量测序分析早产认知障碍大鼠肠道菌群结构特征

目的 分析早产认知障碍大鼠肠道菌群结构特征，探讨肠道菌群改变与早产认知障碍的关系。方法 给孕16~17 d Sprague-Dawley大鼠连续2 d腹腔注射脂多糖（LPS）建立认知障碍模型，以腹腔注射PBS为对照。孕21 d行剖宫术，将早产大鼠随机分配给代母鼠喂养。于生后30 d利用Morris水迷宫中的定位航行实验对早产大鼠进行认知评估，并分为早产认知障碍组（n=21）与正常对照组（n=10）。采用苏木精-伊红染色观察两组大鼠海马病理改变，提取各组大鼠粪便进行16S rRNA测序并分析。同时对两组大鼠肠道菌群进行主成分分析（PCA）。结果 与对照组相比，早产认知障碍大鼠海马可见大量神经元变性坏死；肠道菌群丰富度及多样性降低（P < 0.05）；门水平上变形菌门丰度增加（P < 0.05）；目、科、属水平上，普氏菌属、乳杆菌属等丰度显著降低，葡萄球菌科、寡养杆菌属等丰度显著增加（P < 0.05）。PCA显示两组大鼠在肠道菌群构成上差异明显。结论 早产认知障碍大鼠肠道菌群结构发生明显变化，可为早产认知障碍导致的微生态变化的治疗及干预提供依据。     

脓毒症的免疫治疗进展

严重脓毒症和脓毒症休克是临床重症监护室患者的主要死亡原因之一。对于晚期脓毒症患者机体所处免疫应答状态目前有两种不同观点:一种观点认为,患者固有免疫和适应性免疫进入免疫抑制状态,患者主要死于初次感染清除障碍及继发感染;另一种观点认为,晚期患者固有免疫持续激活,患者主要死于炎症造成的器官损伤。临床用药应根据患者不同的发病阶段及病症选择最佳治疗方案。近年来针对脓毒症导致的机体免疫抑制而研发的药物(如抗PD1抗体、人重组IL-7、GM-CSF等)及针对炎症细胞因子MIF、HMGB1和C5a为靶点而研发的制剂,在动物实验及临床试验中均取得了一定的疗效,为脓毒症的靶向治疗带来了新希望。