黄芩苷、黄芩苷磷脂复合物与黄芩苷磷脂复合物鼻用温敏型原位凝胶的鼻黏膜渗透性研究

目的:研究黄芩苷、黄芩苷磷脂复合物与黄芩苷磷脂复合物鼻用温敏型原位凝胶的体外鼻黏膜渗透性,对黄芩苷磷脂复合物温敏型鼻用原位凝胶的处方进行筛选。方法:采用Franz扩散池法进行鼻黏膜渗透试验,高效液相色谱(HPLC)法测定接受池中药物累积渗透量。以单位面积累积渗透量(Q)和稳态透膜速率(Js)为标准考察黄芩苷、黄芩苷磷脂复合物与黄芩苷磷脂复合物鼻用温敏型原位凝胶的体外鼻黏膜渗透性,从而确定三者的体外释药曲线和对黄芩苷磷脂复合物鼻用温敏型原位凝胶处方的筛选结果。结果:各个供试药物的释药符合一级释放模型;与黄芩苷溶液比较,黄芩苷磷脂复合物能明显增加释药量和释药速率。处方二的Q和Js为3种鼻用原位凝胶处方中最高值。结论:黄芩苷磷脂复合物可明显提高黄芩苷的膜渗透性。黄芩苷磷脂复合物鼻用温敏型原位凝胶为处方二最佳,可用于鼻腔给药。     

乳糖化-去甲斑蝥素磷脂复合物及其pH敏感型脂质体的制备

目的:合成乳糖化-去甲斑蝥素磷脂复合物,并制备其pH敏感型脂质体。方法:将乳糖化-去甲斑蝥素与磷脂聚合成药物磷脂复合物,并采用FT-IR、DSC和1H-NMR对其进行表征。逆向蒸发法制备药物磷脂复合物脂质体;利用羧甲基壳聚糖与脂质体表面的静电吸附作用,使羧甲基壳聚糖吸附在脂质体表面,制备乳糖化-去甲斑蝥素磷脂复合物pH敏感型脂质体;考察了药物与磷脂的复合率,磷脂复合物脂质体的包封率,粒径大小和分布,以及体外释药特性。结果:药物磷脂复合率为(97.2±2.01)%,磷脂复合物脂质体的平均包封率为(70.00±1.30)%,平均粒径为(47.18±4.16)nm,粒径跨距为(0.70±0.07),电镜显示其形态圆整,体外释药符合Weibull方程。结论:乳糖化-去甲斑蝥素磷脂复合率高,制成的pH敏感型脂质体性质稳定,且具有缓释特性。     

酸性磷脂对症状性颅内外动脉狭窄患者脑缺氧缺血的评估

目的探讨酸性磷脂(AP)在临床早期评估颅内外动脉狭窄患者脑缺氧缺血程度中的作用。方法患者均经磁共振弥散加权成像(DWI)、灌注成像(PWI)检查,并排除急性脑梗死,在低灌注区或可疑低灌注区选取PWI像感兴趣区域测脑血流量(CBF)、脑血容积(CBV)和平均通过时间(MTT)值,同时取对侧镜像对称区域测CBF、CBV及MTT值做对照研究。立即抽静脉血测AP的浓度,并应用线性相关分析法比较AP与症状性颅内外动脉狭窄患者PWI相关系数(CBF、CBV和MTT)的相关性。结果 30例患者PWI异常,AP值均高于正常参考值;8例患者PWI和AP值均正常;7例患者PWI虽正常,但AP值高于正常参考值。灌注感兴趣区域及镜像侧CBF、CBV及MTT比较均存在显著性差异(P均<0.01)。多根血管狭窄患者CBF和CBV较单根血管狭窄患者减低,MTT延长,AP值增高。CBF与AP值呈负相关(P<0.01),CBV与AP值亦呈负相关(P<0.01),MTT与AP值呈正相关(P<0.01)。结论 CBF、CBV、MTT与AP间存在明显的相关性,AP是一种脑组织缺氧缺血的早期敏感的标志物,有可能较PWI成像更早期反映脑组织缺氧缺血程度。     

Expression of Cds4/5 of Arabidopsis chloroplasts in E. coli reveals the membrane topology of the C-terminal region of CDP-diacylglycerol synthases

CDP-diacylglycerol synthases (Cds) are conserved from bacteria to eukaryotes. Bacterial CdsA is involved not only in phospholipid biosynthesis but also in biosynthesis of glycolipid MPIase, an essential glycolipid that catalyzes membrane protein integration. We found that both Cds4 and Cds5 of Arabidopsis chloroplasts complement cdsA knockout by supporting both phospholipid and MPIase biosyntheses. Comparison of the sequences of CdsA and Cds4/5 suggests a difference in membrane topology at the C-termini, since the region assigned as the last transmembrane region of CdsA, which follows the conserved cytoplasmic domain, is missing in Cds4/5. Deletion of the C-terminal region abolished the function, indicating the importance of the region. Both 6 × His tag attachment to CdsA and substitution of the C-terminal 6 residues with 6 × His did not affect the function. These 6 × His tags were sensitive to protease added from the cytosolic side in vitro, indicating that this region is not a transmembrane one but forms a membrane-embedded reentrant loop. Thus, the C-terminal region of Cds homologues forms a reentrant loop, of which structure is important for the Cds function.     

双靶向吉非替尼磷脂胶束纳米载体靶向肺癌干细胞和肺癌细胞研究

目的研究双靶向吉非替尼磷脂胶束纳米载体靶向肺癌干细胞和肺癌细胞方法制备吉非替尼纳米载体和双靶向吉非替尼磷脂胶束纳米载体,检测吉非替尼载药量、包封率、粒径及zeta电位,培养肺癌细胞和干细胞分选,测定不同载药纳米载体在肺癌细胞中的蓄积效率、对肺癌细胞克隆球生长的影响、对肺癌细胞杀伤作用。结果双靶向吉非替尼纳米载体组包封率、粒径均高于吉非替尼纳米载体组,载药量、zeta电位低于吉非替尼纳米载体组,具有统计学差异(P<0.05)。两组载药纳米载体中的吉非替尼在各时间点的释放量比较,无统计学差异(P>0.05)。双靶向吉非替尼纳米载体组在肺癌A549细胞、A431细胞中的蓄积效率均高于吉非替尼纳米载体组,具有统计学差异(P<0.05)。双靶向吉非替尼纳米载体组肺癌A549细胞、A431细胞克隆球形成率均低于吉非替尼纳米载体组,具有统计学差异(P<0.05)。双靶向吉非替尼纳米载体组肺癌A549细胞、A431细胞在各时间点的存活率均低于吉非替尼纳米载体组,具有统计学差异(P<0.05)。结论双靶向吉非替尼磷脂胶束纳米载体可双靶向杀伤肺癌细胞,具有较强的抗肿瘤作用。     

小鼠成纤维细胞中PLC水解肌醇磷脂的数学模型

目的:构建小鼠成纤维细胞中磷脂酶C水解肌醇磷脂的数学模型. 方法:以细胞实际信号传递过程为基础、以准稳态近似为原则,利用微分方程建立数学模型模拟肌醇磷脂的代谢过程. 结果:建立了一磷酸肌醇和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程,并以此来描述肌醇磷脂的水解速度. 结论:本数学模型描述了肌醇磷脂代谢的生物学特征以及主要产物间的浓度依赖关系,讨论了各个参数对肌醇磷脂代谢的数学模型的影响,分析了磷酸肌醇3激酶和Ras/细胞外信号调节激酶对肌醇磷脂的消耗.     

社区老年高血压患者血浆磷脂脂肪酸的性别差异及其与血压的相关性研究

背景　高血压是影响老年人群生命质量的危险因素之一,高血压的发生与血脂代谢密切相关,且存在着性别差异,而血液脂肪酸谱是反映血脂代谢水平的重要指标,但其与高血压的发生与发展尚存争议。目的　探讨宁夏社区老年高血压患者血浆磷脂脂肪酸的性别差异及其与血压的相关性分析。方法　2016年3月在宁夏国际旅行卫生保健中心进行体检的宁夏社区居民2 231例,根据纳入、排除标准筛选出高血压患者282例,其中男149例,女133例。收集其一般资料,并进行体格检查、生化指标检查及血浆磷脂脂肪酸谱测定。采用Spearman秩相关分析血浆磷脂脂肪酸含量与收缩压、舒张压、脉压的关系,采用多元线性回归分析收缩压、舒张压、脉压的影响因素。结果　男性患者年龄、文化程度、已婚率、月收入、吸烟率、血肌酐、尿酸（UA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平高于女性,总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平低于女性（P<0.05）。女性患者血浆磷脂脂肪酸C13：0、C22：1、C24：1、单不饱和脂肪酸（MUFA）、C18：3n-3、C18：3n-6、C20：2n-6含量均高于男性（P<0.05）。相关性分析结果显示,男性患者血浆磷脂脂肪酸C12：0、C20：4n-6与舒张压均呈负相关,C21：0、C18：1、C20：5n-3、C18：2n-6、C20：2n-6与舒张压均呈正相关（P<0.05）;C20：4n-6与脉压呈正相关,C24：0、C18：1、C18：3n-3、C20：5n-3、C20：2n-6与脉压均呈负相关（P<0.05）。女性患者血浆磷脂脂肪酸C10：0与收缩压呈负相关,C21：0、C22：0、C18：1T、C18：3n-3、C18：2TT与收缩压均呈正相关（P<0.05）;C22：0、C14：1与舒张压均呈正相关（P<0.05）;C18：1T、C18：3n-6与脉压均呈正相关（P<0.05）。患者血浆磷脂脂肪酸C22：0、C18：1T与收缩压均呈正相关,C23：0与收缩压呈负相关（P<0.05）;C12：0、C20：4n-6与舒张压均呈负相关,C15：0、C18：0、C21：0、C22：0、C18：1、C20：5n-3、C18：2n-6、C20：2n-6与舒张压均呈正相关（P<0.05）;C18：1T、C20：4n-6与脉压均呈正相关,C20：5n-3与脉压呈负相关（P<0.05）。多元线性回归分析结果显示,血浆磷脂脂肪酸C21：0〔β=3 312.095,95%CI（969.916,5 654.275）,P=0.007〕、C20：5n-3〔β=184.205,95%CI（16.822,351.588）,P=0.032〕、C20：2n-6〔β=-12 371.615,95%CI（-20 122.194,-4 621.037）,P=0.003〕是男性舒张压的影响因素,C18：3n-6〔β=492.867,95%CI（77.420,908.315）,P=0.021〕是女性脉压的影响因素,C18：1T〔β=113.848,95%CI（43.906,183.790）,P=0.002〕、C20：4n-6〔β=31.488,95%CI（2.431,60.546）,P=0.034〕是老年高血压患者脉压的影响因素。结论　宁夏社区女性老年高血压患者血浆磷脂脂肪酸C13：0、C22：1、C24：1、MUFA、C18：3n-3、C18：3n-6、C20：2n-6含量均高于男性,且C21：0、C20：5n-3、C20：2n-6与男性舒张压,C18：3n-6与女性脉压,C18：1T、C20：4n-6与脉压均呈正相关。因此,应该注意饮食,合理控制脂肪酸的摄入。     

马尼地平磷脂复合物的表征及肠吸收研究

目的：对马尼地平磷脂复合物进行表征,并考察其体外肠吸收特性。方法：采用紫外分光光度法、差示扫描量热分析法、溶解度法和溶出度测定法对马尼地平磷脂复合物性质进行表征;通过离体外翻肠囊模型考察马尼地平在不同肠段的吸收特性。结果：与原药及原药-磷脂物理混合物比较,磷脂复合物的溶解度、溶出度、油/水分配系数、紫外吸收均有不同程度的改变,磷脂复合物在各肠段部位的转运速率V_t和表观渗透系数P_app均大于原药,其中在空肠的吸收均显著强于其他部位（P<0.01）。结论：马尼地平复合磷脂后,其溶解度、溶出度、肠吸收明显改善,马尼地平磷脂复合物将有利于提高药物的生物利用度。     

在体循环肠灌流模型研究小檗碱及其磷脂固体分散体的肠吸收特性

目的：比较研究小檗碱及其磷脂固体分散体的肠吸收特点,探讨磷脂固体分散体技术提高小檗碱生物利用度的作用机制。方法：采用大鼠循环灌流模型,以酚红为标示物,HPLC法测定在体灌流小檗碱的浓度变化,比较分析小檗碱及其磷脂固体分散体的肠吸收数据。结果：小檗碱肠吸收较差,磷脂固体分散技术可显著促进小檗碱各肠段的吸收,主要促进吸收部位为十二指肠和空肠。结论：小檗碱及其磷脂固体分散体的肠吸收机制主要为被动扩散,磷脂固体分散技术促吸收机制与小檗碱与P-gp亲和力降低或/和小檗碱膜渗透性提高有关。     

Mitochondrial bioenergetic background confers a survival advantage to HepG2 cells in response to chemotherapy

Cancer cells mainly rely on glycolysis for energetic needs, and mitochondrial ATP production is almost inactive. However, cancer cells require the integrity of mitochondrial functions for their survival, such as the maintenance of the internal membrane potential gradient (ΔΨm). It thus may be predicted that ΔΨm regeneration should depend on cellular capability to produce sufficient ATP by upregulating glycolysis or recruiting oxidative phosphorylation (OXPHOS). To investigate this hypothesis, we compared the response to an anticancer agent chloroethylnitrosourea (CENU) of two transformed cell lines: HepG2 (hepatocarcinoma) with a partially differentiated phenotype and 143B (osteosarcoma) with an undifferentiated one. These cells types differ by their mitochondrial OXPHOS background; the most severely impaired being that of 143B cells. Treatment effects were tested on cell proliferation, O₂ consumption/ATP production coupling, ΔΨm maintenance, and global metabolite profiling by NMR spectroscopy. Our results showed an OXPHOS uncoupling and a lowered ΔΨm, leading to an increased energy request to regenerate ΔΨm in both models. However, energy request could not be met by undifferentiated cells 143B, which ATP content decreased after 48 h leading to cell death, while partially differentiated cells (HepG2) could activate their oxidative metabolism and escape chemotherapy. We propose that mitochondrial OXPHOS background confers a survival advantage to more differentiated cells in response to chemotherapy. This suggests that the mitochondrial bioenergetic background of tumors should be considered for anticancer treatment personalization. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.