凋亡素诱导肿瘤细胞凋亡机制研究及其进展

凋亡素为鸡贫血病毒的功能蛋白,又称VP3蛋白,由121个氨基酸残基组成,可诱导肿瘤细胞和人转化细胞凋亡,而对正常二倍体细胞无毒副作用。凋亡素机制由多方面因素构成,其机制的阐明对于凋亡素在抗肿瘤方面的应用有重要意义。凋亡素拥有广阔的应用前景。     

脑静脉窦血管内治疗脑静脉窦血栓形成临床研究

目的对比静脉肝素抗凝与脑介入治疗脑静脉窦血栓(CVST)的有效性和安全性。方法回顾性分析我院14例脑静脉窦血栓患者,按治疗方法分为介入组(脑静脉窦血管内治疗)和抗凝组(静脉肝素抗凝),每组7例,比较2组平均住院时间、血管完全再通率、mRS及并发症发生率。结果脑静脉窦介入组住院时间较抗凝组短,血管完全再通率高于抗凝组,mRS平均评分低于抗凝组,差异均有统计学意义(P0.05)。2组并发症发生率无显著差异(P0.05)。结论脑静脉窦血管内治疗可改善CVST患者的转归,疗效优于静脉肝素溶栓保守治疗。     

凋亡素体外抗膀胱癌效应观察及应用前景分析

目的:观察凋亡素诱导不同膀胱癌细胞株凋亡的效果并结合文献评价其临床应用前景.方法:采用凋亡素原核表达载体pBV220/Apoptin、真核表达载体PCDNA3、人膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87及EJ、RT-PCR试剂盒以及质粒提取试剂盒.将原核表达载体中的Apoptin基因克隆入真核表达载体PCDNA3,经双酶切及基因测序鉴定无误后,利用脂质体转染法将真核表达质粒PCDNA3/Apoptin转染膀胱癌细胞株BIU-87及EJ.然后于转染后24h利用RT-PCR观察基因表达情况,并分别于转染后24、48、72h利用透射电镜检测肿瘤细胞超微结构变化、MTT法检测细胞存活率、流式细胞仪TUNAL法检测各组细胞的凋亡率,并对结果行统计学分析.结果:成功构建真核表达载体PCDNA3/Apoptin并转染膀胱癌细胞株BIU-87及EJ.转染24h后,通过RT-PCR法可见凋亡素基因在细胞内表达,并于转染后不同时段观察到实验组细胞发生高效凋亡,并随时间的延长而逐步升高,转染后72h,两种细胞株的凋亡率约为65%,而MTT法所测细胞存活率约为25%.与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).同时通过透射电镜可观察到实验组多数细胞出现凋亡的超微结构变化,如核边集、核碎裂及凋亡小体等.结论:凋亡素可诱导不同的膀胱癌细胞株发生高效的凋亡.考虑到其具有与小分子化疗药物不同的作用机制,我们认为凋亡素有可能成为克服膀胱癌细胞多药耐药性的新途径之一.     

人膀胱癌细胞原代培养及体外药物敏感性实验研究

目的研究不同个体表浅性膀胱癌组织对抗癌药物及其联合应用的敏感性。方法采用肿瘤细胞原代培养技术和MTT比色法测定了59例膀胱癌组织对灌注抗癌药物及其联合应用的抑制率和敏感性。结果14例失败,45例获得成功,总体可评价率为76.3%,不同个体对不同抗癌药物的抑制率存在明显差异;除MTX对膀胱癌G1和G3级平均抑制率差异有统计学意义外,其它抗癌药物对不同个体膀胱癌细胞的平均抑制率与膀胱癌的病理分级、分期均无关;抗癌药物对初发膀胱癌的敏感率和平均抑制率均高于复发膀胱癌;2种不同作用机制的抗癌药物联合应用对不同个体膀胱癌细胞的敏感率和平均抑制率均高于单一药物,二者敏感率和平均抑制率差异有统计学意义。结论应根据药敏结果,选择相对敏感的抗癌药物,并将作用于不同机制、细胞不同周期的抗癌药物联合,制订个体化膀胱灌注治疗方案,以提高疗效,最大限度减少副反应,减少肿瘤复发率。     

脑胶质瘤术后联合放化疗效果观察

目的：探讨脑胶质瘤术后放射治疗联合替莫唑胺化疗的治疗效果。方法：选取2008年1月-2010年12月本院收治的WHOⅢ~Ⅳ级脑胶质瘤患者54例,随机分为A组和B组各27例,两组均在手术切除肿瘤后给予放射治疗,B组进行放射治疗,A组在放射治疗的基础上使用替莫唑胺化疗。对比两组的近期疗效、生存率和不良反应。结果：A组有效率为77.8%;高于B组的48.1%,比较差异有统计学意义（P<0.05）;两组的1年生存率比较差异无统计学意义（P>0.05）,A组的2年生存率为48.1%,高于B组的22.2%,比较差异有统计学意义（P<0.05）。A组的不良反应与B组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：脑胶质瘤术后联合放化疗能有效提高治疗效果,延长患者的生存期,值得推广应用。     

非糜烂性胃食管反流病患者不同治疗方案评价

目的 比较以抑酸剂为基础的不同联合用药方案治疗非糜烂性胃食管反流病(NERD)的效果,为临床用药提供指导.方法 将53例NERD患者随机分为4组,分别给予抑酸剂(A组)、抑酸剂+利胆药(B组)、抑酸剂+促动力药(C组)、抑酸剂+利胆药+促动力药(D组)等4种方案治疗8周,并记录各组患者治疗前、治疗后第4周、第8周症状评分.然后比较各组治疗前后症状评分的差异以及组间治疗效果的差异.结果 4组患者治疗后第4周、第8周症状评分均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,D组患者症状评分降低最明显,显著低于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在NERD的治疗中,以抑酸剂为基础的联合用药效果要优于单用抑酸剂者,而抑酸剂联合促动力药及利胆剂治疗NERD可使治疗效果达到最佳.     

感染标志物对PCNL术后全身炎症反应综合征预警作用的研究进展

尿系结石是泌尿外科的常见病和多发病,给全球的医疗体系带来了沉重负担,其治疗方式多样,对于直径＞2 cm的复杂性肾结石和输尿管上段结石,经皮肾镜取石术（PCNL）是其首选的治疗方法,其术后主要并发症是出血和感染。对于术后感染而言,早发现、早治疗显得格外重要,及时发现术后感染并予以积极处理,可增加治疗成功可能,同时降低住院时间及住院费用,本文旨在针对感染标志物对PCNL术后全身炎症反应综合征(SIRS)发生的预警作用的相关研究作一综述。     

肾结核的诊断进展

肾结核属于常见的泌尿生殖系结核,近年来临床表现不典型的肾结核病例明显增多,由于检查方式的不当导致不少患者发生误诊情况,对患者的治疗和康复产生明显的不利影响.基于此,本文通过参阅肾结核诊断的相关文献资料,特对肾结核的诊断进行了归纳综述,以期为相关工作者提供参考,提高肾结核患者的诊断准确率,改善患者的治疗和康复情况.     

改良型TAT-凋亡素体外抗人膀胱肿瘤活性的研究

目的:探讨改良型TAT-凋亡素(TAT-VP3)融合基因在不同人膀胱癌细胞中的表达及诱导凋亡的效应.方法:利用改良型TAT-VP3原核表达载体pGEX-6p-1-TAT-VP3构建真核表达载体PcDNA3-TAT-VP3,经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切鉴定和基因测序无误后采用脂质体介导的基因转染法转染人膀胱癌BIU-87及EJ细胞,利用RT-PCR技术检测改良型TAT-VP3基因在细胞中的表达状况.通过透射电镜扫描观察转染后不同时段肿瘤细胞的超微结构变化,MTT法检测转染重组质粒后对人膀胱癌细胞的增殖活性的影响,流式细胞术TUNAL法检测转染重组质粒24、48、72h后BIU-87及EJ细胞的凋亡率,对实验结果进行统计学分析.结果:成功构建重组质粒PcDNA3-TAT-VP3并经测序无误,转染人膀胱癌细胞后的RT-PCR结果证实改良型TAT-VP3基因在人膀胱癌细胞中获得表达.透射电镜观察到BIU-87及EJ细胞凋亡早期染色质聚集,线粒体固缩,凋亡中晚期核固缩及凋亡小体等超微形态学改变.MTT法检测结果显示转染重组质粒PcDNA3-TAT-VP3后的BIU-87及EJ细胞增殖活性明显下降(P<0.01).流式细胞术TUNAL法检测显示BIU-87及EJ细胞发生早期凋亡,其凋亡率随时间的推移呈逐渐上升趋势,转染72 h后BIU-87和EJ细胞的凋亡率分别为(30.44±1.47)%、(42.27±2.66)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:改良型TAT-VP3基因的表达能早期、高效地诱导不同人膀胱癌细胞发生凋亡,为纯化改良型TAT-VP3融合蛋白以及将其应用于膀胱灌注治疗膀胱转移肿瘤的研究奠定实验基础.     

膀胱癌EJ细胞的CD44异常糖基化及其单抗KMP1的生物学功能研究

研究EJ细胞单抗KMP1的结合抗原CD44的变化和KMP1对EJ细胞生物学功能的影响。方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMP1,免疫荧光检测KMP1的亲和性、结合部位及效价。流式细胞检测KMP1对膀胱癌细胞的特异性。免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性。亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列。糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变。软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMP1对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响。结果:获得的单抗KMP1是IgG1,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜。其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BG作用EJ细胞7d,KMP1对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Western blot显示KMP1对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMP1还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能。结论:膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMP1可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移。