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为了探索猪IgG1-Fc(pIgG1-Fc)基因在大肠杆菌中的高效表达,首先通过反转录PCR(RT-PCR)扩增pIgG1-Fc基因,并构建重组表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,然后通过优化异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、菌体培养温度及菌体培养时间,实现pIgG1-Fc重组蛋白的高效表达。结果表明,成功克隆了pIgG1-Fc的基因666 bp,共编码222个氨基酸;重组原核表达质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc经过酶切和测序证明构建正确,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达,表达的融合蛋白分子量约为36 ku。其最佳表达条件如下:在25℃条件下加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导6 h可形成大量包涵体蛋白。pIgG1-Fc基因被成功克隆并原核表达,为进一步研究该蛋白的功能及实现其他蛋白与pIgG1-Fc融合后原核表达奠定了基础,为制备能与猪IgG1结合的二抗提供了材料。 相似文献
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山西运城地区养鱼生产居全省之冠,为了进一步发展养鱼事业,地区水利水保局在今年召开的全区水产工作会议上,表彰和奖励了生产成绩显著的15个养鱼专业户、重点户 相似文献
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王英杰 《农村实用科技信息》2004,(2)
11月6日,内邱县委、县政府特邀清华、北大等高校和中国社会科学院、中国农业机械化科学研究院的四十多家农业科技权威机构的50多位专家,聚集在内邱县西街礼堂联合召开新技术、新产品及外商投资项目发布洽谈会,此次盛会由国家科技部信息中心主任徐德宝主持,会议期间笔者就有关种植开发菜芙蓉的情况和与会专家进行了深入咨询和交流。中国农 相似文献
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互993年5~6月鞍钢某鸡场引进5批山鸡雏,每批均约18日龄时开始出现以腹泻为主,排黄白水样稀粪,闭目卧地不起等症状。刻检突出变化为腔上囊显著肿大,粘膜皱档有针类大小出血点(斑),少数山鸡腔上囊有棕红色果酱样粘稠物。有的山鸡腔上囊粘膜有纤维素祥物和干酪祥物。严重病例的腔上囊呈紫葡萄状。病雏肝、肾抹片镜检未发现病菌。用病雏法氏囊1:20悬液,冻融,离心前取上清波作抗原,与法氏囊病阳性血清进行琼脂扩散试验,72小时后出现明显的沉淀线。对发病山鸡群采取紧急接种传染性法氏囊炎卵黄抗体,同时饮用口服补液盐,三天后控制… 相似文献
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