外源性PTEN抑癌基因对高转移性黏液表皮样癌细胞系形态的影响

目的 :观察外源野生型PTEN基因对高转移性黏液表皮样癌细胞系形态的影响。方法 :应用倒置显微镜观察法、HE染色观察、扫描电镜及透射电镜观察法 ,比较野生型PTEN抑癌基因转染的黏液表皮样癌细胞M 3SP2 PTEN与对照的黏液表皮样癌细胞M 3SP2 pBp的形态学差异。 结果 :M 3SP2 pBp细胞体外生长活跃 ,细胞数量多 ,核分裂相多 ,细胞表面微绒毛丰富 ,细胞核切迹明显 ,细胞质中线粒体丰富 ;M 3SP2 PTEN细胞生长缓慢 ,分裂相很少 ,细胞数量少 ,部分细胞空泡变性 ,染色质凝集 ,细胞膜彭出 ,线粒体数量少并发生肿胀 ,较多的溶酶体融合。结论 :外源野生型PTEN基因的转染能导致体外培养的高转移性黏液表皮样癌细胞变性、坏死或凋亡。     

低能量He-Ne激光对离体培养的人牙髓纤维样细胞DNA合成的影响

将正畸拔除牙的牙髓进行培养至第七代,以He-Ne激光照射,观察对细胞DNA代谢的作用,证明低能量激光具有生物刺激效应,可使牙髓纤维样细胞DNA代谢增强,将对牙髓疾病的治疗和康复产生积极影响。     

17β-雌二醇对涎腺黏液表皮样癌高转移细胞M3SP4的作用

目的:研究17β雌二醇(E2)对涎腺黏液表皮样癌高转移细胞系M3SP4细胞的作用。方法:采用细胞记数法、MTT、软琼脂克隆形成法及相关癌基因免疫组织化学的方法研究17β雌二醇对M3SP4细胞的增殖和对VEGF、cerbB2、Ki67、P16的影响。结果:雌激素在10-10～10-5mol/L时对M3SP4有促进作用,其中在10-7mmol/L时对M3SP4的促增殖作用最显著,体外实验表明细胞群体倍增时间减少了10.8%,克隆形成率增加了225%,免疫组化显示VEGF、cerbB2、Ki67的表达增强,而P16的表达明显降低。体内实验,实验组裸鼠在每天给予0.0052mg/d的E2时,肿瘤细胞M3SP4的生长增加65%,转移增加了609%。VEGF、Ki67和cerbB2有较强表达,明显强于对照组;相反抑癌基因P16的表达较弱。结论:雌激素可刺激涎腺黏液表皮样癌M3SP4细胞的增殖和转移能力。     

人胎儿骨髓基质干细胞的分离、体外培养和鉴定

目的 分离培养并鉴定人胚胎骨髓基质干细胞。方法 抽取流产胎儿股骨骨髓，Percoll离心纯化分离，取界面有核细胞培养。不同培养基培养对比，观察细胞生长曲线，免疫细胞化学鉴定细胞膜表面分子。结果 得到纯化率较高的骨髓基质干细胞(MSCs)，用αMED比DMEM和RPM11640原代培养生长速度快，第二代MSCs在上述三种培养基中倍增时间分别为43h、54h、56h。免疫细胞化学结果99％CD4( )、98％Vim( )、所有细胞CD34(-)、CD29(-)。结论 Percoll离心法成功地分离纯度较高的MSCs。MSCs在αMEM中培养增殖率比在DMEM和M1640中培养为快。     

六亚甲基双乙酰胺联合5-FU对涎腺粘液表皮样癌的分化诱导作用

目的研究平面极性分化诱导剂六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）联合５ＦＵ对涎腺粘液表皮样癌的分化诱导作用。方法采用“５ＦＵ→ＨＭＢＡ”用药方案联合用药。结果ＨＭＢＡ对涎腺粘液表皮样癌有较强的分化诱导作用，当联合用药时ＨＭＢＡ的分化诱导作用被增强，另一方面，ＨＭＢＡ也明显增强了５ＦＵ的抗癌作用，两者显示出协同抗癌作用。结论将５ＦＵ与ＨＭＢＡ合用，对涎腺粘液表皮样癌的治疗可能具有一定应用价值     

多西紫杉醇对腺样囊性癌SACC-83细胞增殖的影响

目的 :研究多西紫杉醇对涎腺腺样囊性癌SACC 83细胞增殖能力的影响。方法 :用细胞计数法、软琼脂克隆形成法、流式细胞术等研究药物对细胞增殖的抑制作用。结果 :多西紫杉醇对SACC 83细胞具有浓度依赖性和时间依赖性生长抑制作用 ,药物作用 2 4、48、72h的IC3 0 (nmol/L)分别为 1.3 9、1.2 6、0 .47,IC50(nmol/L)分别为 13 .0 2、3 .3 4、1.2 6,相对抗肿瘤活性 (RAA)值分别为 3 3 0、12 98、3 42 6;药物作用于细胞 72h后 ,对照组G1、S、G2 期细胞 ( % )为 73 .8、19.8和 6.4,IC3 0 组为 65 .0、2 9.5和 5 .5 ,IC50 组为 5 7.6、42 .4和 0 ;对照组、IC3 0 组、IC50 组克隆形成率 ( % )分别为 3 6.0± 0 .5、8.3± 2 .5和 0 .5± 0 .3。结论 :多西紫杉醇对腺样囊性癌ACC细胞增殖有明显的抑制作用。     

人涎腺癌细胞系MEC-1和Mc3生长抑素受体表达及RC-160的结合特性与预后康复相关

背景：人涎腺粘液表皮样癌发生发展的机制目前仍不清楚，深入研究SSTR的生物学特性及亚型分布模式是该领域研究热点之一。目的：探讨人涎腺粘液表皮样癌细胞系(MEC-1)及人粘液表皮样癌高转移细胞株(Mc3)生长抑素受体(SSTR)两种亚型(SSTR1、SSTR2)的表达与SSTR的放射配基^125I-RC-160的结合差异与预后康复的相关性。设计：非随机非对照的研究。地点和材料：实验地点在第四军医大学口腔生物学教研室和西京医院核医学科。细胞系采用第四军医大学口腔生物学教研室建立的人涎腺粘液表皮样癌细胞MMEC-1、人涎腺粘液表皮样癌细胞株高转移细胞克隆Mc3。RPMI 1640培养基及胰蛋白酶为Gibco产品；寡核昔酸探针由中科院微生物所制备；RC-160由北京赛百盛公司提供。方法：采用细胞计数法、软琼脂法等观察MEC-1及Mc3细胞株生物学特性；以原位杂交法检测MEC-1，Mc3细胞株SSTR，及SSTR2两种亚型的表达情况；以放射配基结合分析法分析MEC-1，Mc3细胞与^125I-RC-60的结合情况。主要观察指标：MEC-1及Mc3细胞生物学特性，MEC-1，Mc3细胞SSTR，SSTR两种亚型的表达及MEC-1，Mc3细胞与^125I-RC-160结合的情况。结果：MEC-1，Mc3细胞生长稳定，Mc3较MEC-1生长速度略快，克隆形成率高；MEC-1细胞高度表达SSTR，及SSTR2(82.6％和81.7％)；Mc3细胞无两种亚型表达。MEC-1和Mc3细胞与^125I-RC-160的特异结合率分别为(23．8&;#177;9．4)％和(3．2&;#177;2．3)％，差异有显著性意义(P&;lt;0.01)。结论：MEC-1高度表达SSTR，及SSTR2，与RC-160的特异结合率显著高于Mc3细胞，而恶性程度则低。     

TGF-β1 shRNA对涎腺人黏液表皮样癌裸鼠颌下腺移植瘤的抑瘤作用及Ki-67、VEGF蛋白表达的影响

 目的 研究TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌（Ms）细胞裸鼠颌下腺原位移植瘤成瘤能力以及对Ki-67和VEGF蛋白表达的影响。 方法 将Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞分别接种至裸鼠颌下腺,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率,测量肿瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;免疫荧光法和免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和VEGF蛋白的表达。 结果 与未转染组、转染空载体组相比,转染TGF-β1 shRNA组裸鼠颌下腺原位移植瘤生长缓慢,瘤体体积和瘤质量显著降低(P< 0.01),瘤细胞中Ki-67和VEGF蛋白表达明显降低。 结论 TGF-β1 shRNA能显著抑制Ms细胞在体内的生长能力,其机制可能与下调细胞内Ki-67和VEGF水平有关。     

几丁质作为植骨材料生物相容性的实验研究

目的：观察几丁质作为植骨材料的生物相容性。方法：通过体外实验与体内实验相结合的方法研究。结果：几丁质对人成骨细胞具有良好的相容性,不影响人成骨细胞的增殖及ＡＬＰ活性,人成骨细胞可以在几丁质膜表面较好地贴附和伸展,但增殖较慢。培养４０ｄ时可以形成矿化结节。几丁质植入肌肉中,周围组织无明显炎症反应,未发现组织变性和坏死,并可完全降解。结论：几丁质具有较好的骨性生物相容性,但仍需提高其表面活性。     

人牙龈成纤维细胞系的建立及其生物学特性

目的：建立人牙龈成纤维细胞系并观察其生物学特性。方法：用组织块法培养细胞,用形态学、免疫组化染色、染色体分析等方法鉴定细胞,通过活细胞观察、生长曲线测定及ＭＴＴ比色实验研究细胞体外生长特性。结果：２０例原代培养,成活率９０％。培养细胞呈梭形,胞浆波形丝蛋白阳性,能合成Ⅰ型和Ⅲ型胶原及纤维粘连蛋白,具有正常二倍体核型,体外贴壁快,生长迅速,细胞寿命为（２５０．７±１１３．３）ｄ。结论：本实验建立的细胞系符合人牙龈正常二倍体成纤维细胞系。