结缔组织生长因子在慢性肝病诊断中的应用研究

探讨结缔组织生长因子(CTGF)在慢性肝病诊断中的应用价值。运用ELISA方法检测198例研究对象,观察血清CTGF水平的变化,分析CTGF水平与临床特征及实验室指标的相关性;运用实时荧光定量RT-PCR方法检测组织中CT-GF mRNA的表达量,比较各组间表达量的变化。乙肝后重度肝纤维化组、肝硬化组、原发性肝细胞癌(HCC)组的血清CTGF水平均显著高于正常对照组,且具有统计学意义(P<0.05);血清CTGF水平与部分临床实验室特征存在相关性,在区分早晚期肝纤维化上具有诊断提示作用;癌旁组织的CTGF mRNA相对表达量显著高于正常对照和癌组织的表达量且具有统计学差异(P<0.05)。血清CTGF水平与肝纤维化、肝硬化及肝癌的发生发展关系密切,有望成为一个新的无创性肝纤维化检测诊断指标,为临床诊断提供依据。     

沉默GPC-3基因转录对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用

目的：研究沉默磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3,GPC-3）基因转录抑制肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤生长与机制。方法：以人GPC-3基因序列设计并合成miRNA,构建GPC-3-miRNA干扰质粒。将其导入HepG2细胞,通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株,移植裸鼠皮下成瘤。根据体积的均数值绘制肿瘤生长曲线,免疫组化法检测瘤组织内GPC-3、β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1表达。结果：肝癌HepG2、Hep3B 和 MHCC-97H 细胞 GPC-3表达较强（50%～80%）, SMMC-7721和Bel-7402细胞中等（18%～25%）,PLC/PRF/5和Bel-7404细胞较弱（8%～10%）。以特异miRNA干预GPC-3基因转录,明显抑制 HepG2细胞增殖,呈时间依赖性;沉默 GPC-3能明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长,且瘤组织β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1等关键信号分子表达降低。结论：沉默GPC-3影响Wnt/β-catenin通路关键信号分子表达可能是抑制HepG2增殖的分子机制。     

TGFβ1基因codon10(Leu＞Pro)变异对肝脏细胞功能的影响

目的观察TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的单核苷酸多态性(SNP)对肝脏细胞功能的影响。方法构建含codon10(Leu>Pro)的TGFβ1(LAP+成熟态单体)真核表达重组体CMV-Leu、CMV-Pro。在HepG2、LX-2细胞中转染pcD-NA3.1空载体、CMV-Leu、CMV-Pro,培养24h后,ELISA检测细胞培养上清液中TGFβ1的分泌量。MTT实验观察HepG2细胞转染后的增殖情况,流式细胞术检测LX-2细胞转染后CD83的表达。结果转染CMV-Leu和CMV-Pro能增加HepG2、LX-2细胞的TGFβ1分泌量,且转染CMV-Pro的细胞TGFβ1分泌量比转染CMV-Leu的细胞高(P<0.05)。转染CMV-Pro能明显增高HepG2细胞的增殖活性(P<0.01),而转染CMV-Leu能明显增加LX-2细胞CD83的表达率(P<0.01)。结论TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的SNP对肝脏细胞TGFβ1的分泌、细胞增殖活性及CD83的表达具有明显影响。     

microRNA-196a2 T>C基因多态性与中国汉族人群肝硬化发生的相关性

目的探讨microRNA-196a2 T>C基因多态性与肝硬化发生的相关性。方法采用聚合酶链反应和连接酶检测反应法(PCR-LDR)检测110例肝硬化患者及391例健康对照者microRNA-196a2 T>C基因多态性,运用SPSS 10.0软件对结果进行统计学分析,并分别对男性及女性个体microRNA-196a2 T>C基因多态性进行分析。结果肝硬化组与对照组都是以CT基因型为主,CC基因型及等位基因C在肝硬化组的分布频率(0.191,0.423)低于健康对照组(0.235,0.487),但无统计学差异(P>0.05);该位点基因型及等位基因在男性或女性个体中的分布趋势与整体趋势相似,相关差异也无统计学意义(P>0.05)。结论在中国汉族人群中,microRNA-196a2 T>C基因多态性与肝硬化的发生并没有明显相关性。     

粉尘螨滴剂联合丙酸氟替卡松吸入气雾剂治疗小儿哮喘急性发作合并过敏性鼻炎的疗效

[摘要]目的：探讨粉尘螨滴剂联合丙酸氟替卡松吸入气雾剂（辅舒酮）治疗小儿哮喘急性发作合并过敏性鼻炎的疗效及其对血清金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）,痰液中的Toll样受体2（TLR2）、神经生长因子（NGF）的影响。方法：选取2018年3月至2020年11月我院收治的哮喘急性发作合并过敏性鼻炎患儿123例,按随机数表法分为观察组61例和对照组62例,对照组在常规治疗基础上给予舌下含服粉尘螨滴剂,观察组在常规治疗基础上给予舌下含服粉尘螨滴剂及丙酸氟替卡松吸入气雾剂吸入治疗,于治疗前及治疗12周对过敏性鼻炎及哮喘严重程度进行评分。采用免疫比浊法检测治疗前和治疗12周后免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、血清C-反应蛋白（CRP）水平;采用流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+,计算CD4+/CD8+;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、TIMP-1、TLR2、NGF水平;肺功能仪检测第一秒用力呼气容积（FEV1）、呼气峰流速（PEF）、用力呼气25%流速（PEF25）、用力呼气50%流速（PEF50）、用力呼气75%流速（PEF75）。观察两组患儿治疗期间不良反应发生情况。结果：治疗12周后,观察组过敏性鼻炎及哮喘严重程度评分均低于对照组（P<0.05）。治疗12周后,观察组IgM、IgG、IgA、CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均高于对照组（P<0.05）,CD8+水平低于对照组（P<0.05）。治疗12周后,观察组CRP、IL-8、TNF-α水平均低于对照组（P<0.05）,FEV1、PEF、PEF25、PEF50、PEF75水平均高于对照组（P<0.05）。观察组治疗12周后血清TIMP-1水平低于对照组（P<0.05）,痰液中TLR2水平高于对照组,NGF水平低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（c2=1.03,P>0.05）。结论：粉尘螨滴剂联合丙酸氟替卡松吸入气雾剂较单一应用粉尘螨滴剂治疗可有效提升小儿哮喘急性发作合并过敏性鼻炎的疗效,提高患儿免疫功能,抑制炎症反应,改善肺功能,降低TIMP-1、NGF水平,抑制气道重塑,提高TLR2水平,调节炎性及神经源性因子,且不会增加不良反应发生率,安全性较高。     

早期人工破膜对分娩的影响

目的研究产程进入活跃期之前（宫口开大〈3cm）行人工破膜早期干预对分娩的影响。方法选取宫颈Bishop评分≥7分的正常足月产妇190例,根据本人意愿分为两组,研究组先行人工破膜,对照组不予以早期干预,观察两组产程时间、剖宫产率、新生儿窒息率。结果研究组总产程明显短于对照组,且差异有统计学意义（P〈0.01）;研究组剖宫产率较对照组低,差异有统计学意义（P〈0.05）,且两组产妇剖宫产原因明显不同;新生儿窒息率观察组低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论早期人工破膜可以明显缩短产程、减少新生儿窒息发生、降低剖宫产率,是可以推广的产程干预手段。     

以针刺为主治疗月经不调临床文献的Meta分析

目的:对以针刺为主治疗月经不调的临床文献进行Meta分析,为临床应用针刺治疗月经不调提供循证医学依据。方法:以"针刺""针灸"和"月经不调"为检索词,计算机检索万方数据库、维普中文科技数据库、中国知网2012年至2017年9月在国内公开发表的针刺治疗月经不调的随机对照临床文献,应用Meta分析方法进行综合统计分析。结果:分别分析2组患者的临床有效率,经异质性检验,发现大部分研究对象同质,且以针刺为主的治疗组的疗效明显,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:部分文献证明以针刺为主治疗月经不调的临床疗效明确。     

原发性肝癌患者甲胎蛋白基因多态性与其在外周血中表达水平的相关性

目的 探讨原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者甲胎蛋白（α-fetoprotein,AFP）基因多态性与外周血AFP水平的相关性。 方法 采用聚合酶链反应和连接酶检测反应法（PCR-LDR）检测我院收治的335例HCC患者AFP基因多个位点多态性并检测AFP血清水平,运用SPSS 13.0软件对结果进行统计学分析。 结果 AFP基因-205 C>G位点GG基因型分布在AFP水平≥20和<20 ng/mL两组间差异有统计学意义（GG vs CC：χ²=4.389,P=0.036）,G等位基因分布在AFP水平≥400和<400 ng/mL两组间差异有统计学意义（G vs C：χ²=4.410,P=0.036）。AFP基因intron1 A>T、intron7 A>G、3’UTR A>G和intron2 A>G基因多态性与AFP基因表达水平无密切相关性。 结论 在中国汉族人群HCC患者中,AFP基因-205 C>G位点C等位基因及CC基因型携带者外周血AFP水平明显升高。     

氢干预盆腹腔手术动物模型的构建及术后血清学指标的改变

目的 构建并评价富氢环境在干预比格犬盆腹腔手术损伤中的作用。方法 选取的10只健康清洁幼年雌性比格犬,随机分为对照组与实验组,均在术中暴露并回纳回肠、空肠、回盲部、膀胱、子宫及附件,同时用电凝刀破坏回盲部、膀胱、子宫及附件;根据吸氢后血氢浓度变化、饮用水盆2000ml富氢水浓度衰减分析以及200ml腹腔富氢生理盐水灌洗液氢浓度衰减分析,构建出盆腹腔手术围术期富氢环境条件;对照组术后予以普通处理,实验组在富氢环境下饲养与护理。结果 吸入含2%氢的混合气体30min后,血氢浓度趋于稳定;新制饱和富氢水1h后,氢浓度下降为初始浓度的一半;腹腔灌注饱和富氢生理盐水后,氢浓度急剧下降,约至15min后,浓度下降一半。根据已构建的富氢环境,检测术前、术后第1天以及第3天的WBC、MDA、SOD、IL-6以及TNF-α的水平。其中,术前两组对比差异无统计学意义（P>0.05）;术后第1天和第3天实验组WBC、MDA、IL-6以及TNF-α水平均明显低于对照组（P<0.05）,而实验组SOD的水平明显高于对照组（P<0.05）。结论 本研究成功构建了一个完整的富氢环境模型,利用该模型后,盆腹腔手术术后血清炎性指标及氧化应激代谢指标明显下调,提示该富氢环境能够有效控制盆腹腔手术带来的损伤、炎性反应及氧化应激。     

中医推拿按摩手法教学测试仪的研制

中医推拿按摩手法是我国古老的传统医学之一。长期以来,中医推拿的教学多以师传口授得以延续。现在的课堂教学,讲述推、拿、按、摩等基本操作手法时,仍以文字描述、口头表达、砂袋练习为主,缺乏直观、定量的方法来反映其手法的操作过程,影响了教学效果。有鉴于此,笔者研制了一种推拿手法仪,应用于教学,取得满意的效果,并获得国家专利(专利号:ZL00225573.1;实用新型)。现就该手法仪的基本构成及应用,向读者作一介绍,仅供参考。