中国麻疹实验室网络的建立及运转

目的评价中国麻疹实验室网络建立的意义和建立初期运转情况。方法对2002~2004年中国麻疹实验室网络建立初期的各项运转指标进行评价。结果2001年,中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家麻疹实验室正式成立,并且在31个省(自治区、直辖市,下同)CDC建立了麻疹实验室,逐步建立了市(地区、州、盟,下同)级麻疹实验室,现已初步形成了一个包括国家麻疹实验室、31个省级CDC麻疹实验室、331个市级CDC麻疹实验室在内的麻疹实验室快速反应诊断系统。目前,已建立麻疹/风疹实验室的诊断标准,并为省、市级CDC麻疹/风疹实验室在监测方面提供培训和技术支持,组织对31个省级CDC麻疹实验室进行职能考核和血清复核等质量控制工作。31个省级CDC麻疹实验室和多数市级CDC麻疹实验室可开展常规的麻疹血清学检测。在血清学监测的基础上,省级CDC麻疹实验室开展了麻疹病毒学监测工作,1993~2004年通过省级CDC麻疹实验室网络的共同努力,在27个省共分离到366株麻疹病毒。结论中国三级麻疹实验室网络已经成功建立并运转良好,为疑似麻疹病例的实验室诊断和鉴别诊断提供了重要的技术支撑,为流行病学专家及时采取强化免疫措施,阻断麻疹病毒的传播,提供了重要的科学依据;建立了中国的麻疹病毒毒株库和基因数据库,为了解中国麻疹野病毒流行的基因型、病毒来源、基因变异情况和传播途径打下了基础;在评估人群对麻疹免疫力、疫苗免疫效果中起到了不可忽视的作用。     

全球脊髓灰质炎实验室建议(2003年)--脊髓灰质炎病毒的使用限制

1 实验室使用脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒上有限制 ;2 人员要有抗脊灰病毒的免疫力 ;3 良好的实验室操作技能 ;4 去污染和感染性材料的处理 ;5 毒株的保存、提取和分离的安全性 ;6 生物安全柜、高压锅、离心机和冰柜的维护 ;7 研究中严格限制使用脊灰野病毒 (WPV) ;8 实验室中保存 1份WPV的清单 ;9 WPV要存放在安全的冰柜中 ,得到主任的同意后才能打开 ;10 实验室如不希望保存WPV ,要将其运送至世界卫生组织认证的参比实验室 ;通过高压或焚化销毁并记录在案。全球脊髓灰质炎实验室建议(2003年)——脊髓灰质炎病毒的使用限制@许文波$中…     

2004年中国四省市腺病毒疫情的流行病学和病原学研究

目的对2004年发生在湖北省、江西省、江苏省和北京市的腺病毒暴发及散发的疫情进行流行病学总结和分析以及病原学研究,以了解中国腺病毒感染状况。方法对各地分离的共16株腺病毒毒株进行了病原学研究,包括病毒的培养,提取病毒核酸,针对Hexon蛋白基因的PCR扩增以及PCR产物的序列测定和分析,并根据流行病学资料对腺病毒的疫情特点进行总结和分析。结果2004年引起湖北省、江西省、江苏省和北京市的腺病毒暴发及散发的疫情均为腺病毒3型;分离到的16株腺病毒毒株,在所选的900bpHexon基因片段,基因变异较小,核苷酸和氨基酸的同源性在98.5%￣100%。结论目前我国学龄儿童以及低年龄组儿童的腺病毒感染主要为3型所致,各地分离的病毒株未观察到明显的基因变异。     

雄黄纳米微粒在细胞水平上抑制腺病毒复制的初步研究

目的 建立腺病毒3型( HAdV-3)感染Hep-2细胞模型,观察中药雄黄对腺病毒3型( HAdV-3)感染Hep-2细胞病变的抑制作用.方法 用高能球磨机研磨双蒸水水飞处理制备雄黄纳米微粒,应用砷钼蓝染色法测定雄黄纳米微粒浓度并在Nano Series粒度测定仪上测定其粒度.以MTT法计算药物的半数中毒剂量(TC50).通过三种不同给药方式即预防给药、治疗给药及直接灭活给药方式进行体外实验,以利巴韦林为阳性对照药,观察雄黄纳米微粒对HAdV-3感染Hep-2细胞病变所起的作用,并对药物的量效关系进行分析.结果 雄黄纳米微粒TC50值为0.649 μg/ml.预防、治疗及直接灭活给药方式均可减轻HAdV-3感染Hep-2细胞的CPE程度,其抗HAdV-3的半数有效浓度( IC50)分别为0.255 μg/ml、0.142 μg/ml、0.117 μg/ml,治疗指数(TI)分别为2.55、4.57和5.55,雄黄纳米微粒对HAdV-3感染Hep-2细胞CPE的抑制作用存在着明显的量效关系.结论 雄黄纳米微粒在体外有抑制HAdV-3病毒复制和直接灭活病毒的作用,并有一定保护Hep-2细胞预防HAdV-3病毒感染的作用.     

雄黄纳米颗粒在基因水平上抑制腺病毒复制的实验研究CSCD

目的建立人腺病毒3型（HAdV-3）感染Hep-2细胞模型,采用荧光定量PCR（Real-timePCR）技术,观察雄黄纳米微粒在基因水平上对HAdV-3DNA表达的影响。方法将实验分为4组,即Hep-2细胞对照组、HAdV-3病毒对照组、雄黄纳米微粒组和利巴韦林组。在HAdV．3感染Hep．2细胞后,分别加入雄黄纳米微粒和利巴韦林作用24h,提取HAdV-3感染Hep-2细胞的总DNA,建立Real-timePCR反应体系,测定各实验组HAdV-3的病毒载量。结果Hep-2细胞对照组无扩增曲线,Ct〉35,腺病毒病原体检测阴性;雄黄纳米微粒组、利巴韦林组和HAdV-3病毒对照组扩增曲线ct分别为29．30±0．08、33．05±1．29、26．01±0．25,腺病毒病原体检测阳性。与HAdV-3病毒对照组病毒复制量（66699932±23．85）相比,利巴韦林组病毒复制量（459124．84±12．82）明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;雄黄纳米微粒组病毒复制量（912435．44±16．57）较HAdV-3病毒对照组病毒复制量有所降低（P〈0．05）。结论建立的HAdV-3感染Hep．2细胞模型可靠,荧光定量PCR方法灵敏性高、特异性强,雄黄纳米微粒对腺病毒的核酸复制有-定的抑制作用。     

山西省2006年4例聚集性高危急性弛缓性麻痹病例分析

目的对山西省2006年报告的4例聚集性高危急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例进行流行病学分析,并对采集的粪便标本中分离到的4株Ⅲ型脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)进行VP1编码区基因特征分析,以判断这起事件的性质。方法按照世界卫生组织《脊灰实验室手册》进行病毒分离与血清学定型,用逆转录-聚合酶链反应扩增VP1编码区基因片段,并进行核苷酸序列测定和分析,构建基因亲缘关系树。结果4例高危AFP病例中的3例为疑似疫苗相关麻痹型脊灰(Vaccine Associated Paralysis Poliomyelitis,VAPP),在发病时间上接近。4株Ⅲ型PV与疫苗参考株BJOPVⅢ相比,VP1编码区核苷酸同源性分别为99.7%、99.9%、99.4%、99.9%,均鉴定为疫苗相关株。基于VP1编码区核苷酸序列建立的进化树表明,4株PV之间无相关性,从3例VAPP中分离到的3株Ⅲ型PV在VP1编码区共享第2637位胞嘧啶核苷酸(C)→尿嘧啶核苷酸(U)突变位点,该位点变异导致氨基酸由缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala)。结论加强聚集性高危AFP病例和VAPP的实验室监测,早期发现PV循环并及时阻断。     

58例疥疮患者的感染特点及临床治疗

目的探讨疥螨感染的特性及疥疮的治疗方法。方法用10％硫磺软膏涂擦患处,每日2次,6d为1个疗程,同时对患者使用过的衣裤、被褥等物品水煮消毒,阴囊结节采用冷冻治疗。结果58例患者经1～3个疗程全部治愈。结论疥螨感染有家庭聚集性及季节性,硫磺软膏外用治疗疥疮效果良好。