昆明地区耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌的分子流行病学特点及耐药特征分析

目的 研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌分子流行病学规律及耐药机制,为临床预防和治疗铜绿假单胞菌的感染提供理论依据。方法 对多中心收集的耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)开展多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和遗传信息研究,并对碳青霉烯酶基因与外膜孔蛋白OprD编码基因进行序列分析。结果 多位点序列分型方法将81株CRPA分为36个ST型,总体以ST3390(41.98%,34/81)为主,其中有5种为新发现的ST型别;CRPA菌株中碳青霉烯酶基因的检出率较高(65.43%,53/81),尿液标本检出率最高(80.00%,28/35),其中IMP、VIM和NDM型碳青霉烯酶基因检出率分别为37.04%、27.16%和1.23%,未检测到KPC、GES、SPM和OXA-40型碳青霉烯酶基因;oprD基因的序列比对分析发现,高达96.29%(78/81)CRPA临床分离株发生了各种类型的突变,以单个或者多个碱基的插入或缺失为主(76.54%,62/...     

2016—2017中国西部地区多重耐药肠球菌的耐药及分布特点

目的 总结2016—2017年中国西部地区10家综合型三甲医院临床分离肠球菌属的分布及多重耐药菌的耐药情况。方 法 采用标准纸片扩散法或自动化仪器检测法,依据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)2017年标准,用WHONET 5.6软件对 2016—2017年中国西部地区10家医院分离的肠球菌属对常用抗菌药物的耐药性进行分析。结果 2016—2017年共分离到8817株 非重复肠球菌属细菌,分离率前5位的肠球菌为屎肠球菌(56.0%)、粪肠球菌(37.4%)、鸟肠球菌(1.9%)、鹑鸡肠球菌(1.4%)、铅 黄肠球菌(1.2%)。肠球菌属细菌的检出率在2年内呈上升波动趋势,肠球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁和替加环素仍高 度敏感,耐药率＜3%,屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌,对氨苄西林、莫西沙星和左氧氟沙星耐药率＞80%,尿液标本分离 肠球菌属和非尿液标本分离株对抗菌药物差异明显,不同年龄段人群分离的肠球菌对抗菌药敏感性也有明显差异。2016—2017 年共分离出肠球菌8817株,其中氨基糖苷类高水平耐药肠球菌(HLARE)菌株4937株,分离率为56.0%。分离出万古霉素耐药肠 球菌(VRE)菌株86株,分离率为1.0%,其中万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌分别检出7株和64株,VRE菌株检出以ICU科室 为主,占28.0%,主要来自尿液标本,占44.2%。除贵州、青海医院外,其他8家医院2017年分离出的肠球菌株数量均高于2016 年,新疆医院肠球菌2年间分离株数量最多为1459株。2017年中国西部地区10家医院VRE菌株数量与2016年相比略有下降,但 耐万古霉素粪肠球菌的数量比2017年有所增加。重庆、贵州、新疆医院最近两年VRE检出有所上升,而青海、四川、陕西、云 南医院有所下降,四川医院2年间万古霉素耐药肠球菌分离率最高,为3.1%。结论 中国西部VRE检出有地区差异,多重耐药 情况突出,肠球菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁和替加环素依然保持较好的敏感性,但粪肠球菌万古霉素耐药株2年内有 所增加,应引起重视。     

中国西部地区老年患者临床分离菌的耐药及分布特点

目的 了解中国西部地区10所医院2016—2017年老年患者临床分离菌的分布特点及其对抗菌药物的耐药性。方法 按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌药敏试验,按照美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2017年标准判读结果。结果 共收集临床分离菌121374株,其中老年患者41448株,占34.1%。其中革 兰阳性菌9499株,占22.9%;革兰阴性菌31949株,占77.1%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄 球菌(MRCNS)的检出率分别为37.1%和79.3%。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药葡萄球菌。除四环素、克林霉素和利 奈唑胺外,屎肠球菌对其他抗菌药物耐药率均高于粪肠球菌;两者中均有少数万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株,耐药率 均＜3%。碳青霉烯类抗生素依然对肠杆菌科细菌保持良好的抗菌活性,耐药率均＜10%。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南 的耐药率分别为7.1%和9.9%,比2011年明显升高。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为18.9%和17.8%。鲍曼不 动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均＞60%,高于全国平均水平(60.0%,2016年)。结论 老年患者临床分离菌的耐药及分 布特点不同于全国平均水平。经验用药应参考老年人群耐药监测数据,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物。     

中国西部地区脑脊液细菌分布及耐药性分析

目的 了解2016—2017年中国西部脑脊液分离菌的分布及耐药性。方法 中国西部10家医院脑脊液分离株,按统一 方案用纸片扩散法或自动化仪器进行抗菌药物敏感性试验,按CLSI(美国临床实验室标准化协会)2016年版标准判断结果。结果 10家医院2016—2017年脑脊液标本分离细菌1234株,其中革兰阳性菌697株,占56.5%,革兰阴性菌537株,占43.5%。最常见的 分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌、大肠埃希菌、粪肠球菌、肺炎链球菌、醋酸钙 不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。脑脊液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为27.9%和66.7%,未发现对万古霉 素、替考拉宁和利奈唑胺耐药菌株;粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为2.2%和1.6%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌 中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株的检出率分别为64.2%和58.1%,肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率(22.2%~23.6%) 高于大肠埃希菌(3.6%~4.4%),铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率45%以上,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药率高达85%以 上。结论 脑脊液分离株对常用抗菌药物耐药性严重,碳青霉烯耐药革兰阴性菌的出现和增多,给脑脊液感染的治疗带来极大 挑战,应合理使用抗菌药物,加强医院感染控制,抑制耐药菌的传播。     

中国西部地区革兰阳性菌的耐药及分布特点

目的 了解中国西部地区临床分离革兰阳性菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。方法 对中国西部地区10所医 院临床分离的革兰阳性菌采用纸片扩散法或自动化仪器法进行抗菌药物敏感性试验。参照2017年CLSI文件标准判读结果。结果 共收集2016年、2017年上述医院临床分离革兰阳性菌16558株和19263株,阳性菌中分离前3位的依次为金黄色葡萄球菌、屎肠 球菌和肺炎链球菌。MRSA 2016年和2017年的分离率分别为34.9%和32.8%。MRSA对绝大多数测试药物的耐药率均显著高于 MSSA。未发现万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁耐药菌株。肠球菌属中粪肠球菌对多数测试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠 球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株。A组、B组除对红霉素和克林霉素有较高的耐药率外,B组链球菌对左氧氟沙星也有较 高的耐药率,对其它测试抗菌药物有较好的敏感性。肺炎链球菌非脑膜炎株红霉素、克林霉素和复方磺胺甲噁唑耐药率较高。 未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株。结论 MRSA检出率有下降的趋势;耐万古霉素肠球菌分离率处于较低水平;万古霉素、 利奈唑胺、替考拉宁对革兰阳性球菌有很好的抗菌活性。不同地区革兰阳性菌耐药性有所差异,应重视耐药性监测并加强抗菌 药物合理应用。     

2014年中国云南地区铜绿假单胞菌耐药监测

目的 监测2014年中国云南地区铜绿假单胞菌临床分布及耐药情况.方法 收集2014年1-12月国家卫生和计划生育委员会全国细菌耐药监测网云南省28家三级医院的监测资料,按统一的方案进行铜绿假单胞菌的培养、分离、鉴定和药敏试验,判断标准按CLSI M100-S24,用Whonet5.6软件进行数据统计分析.结果 2014年云南地区28家三级医院共分离出2 873株铜绿假单胞菌,其中90.36%分离自住院患者,菌株按标本来源主要分离自痰液(60.32%)、尿(8.42%)、分泌物(8.11%)、脓液(4.70%)、血液(2.92%)等.铜绿假单胞菌对常见抗菌药物敏感度前5位依次为阿米卡星(88.7%)、哌拉西林/他唑巴坦(85.0%)、妥布霉素(83.1%)、哌拉西林(80.3%)、头孢吡肟(80.1%).对氨曲南的耐药率为59.0%;对亚胺培南、头孢他啶、美罗培南、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率处于20.9%~29.7%;对哌拉西林、庆大霉素、头孢吡肟、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的耐药率处于10.3%~19.9%.结论 2014年中国云南地区临床分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性相差较大,医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物.     

慢性硬膜下血肿钻孔引流治疗的体会

目的：观察经钻孔引流治疗慢性硬膜下血肿的疗效。方法：回顾性分析65例慢性硬膜下血肿患者的临床表现、病程、预后并且探讨其发病机制及经钻孔引流手术的治疗效果：结果：65例术后临床症状、体征均有不同程度改善，复查CT血肿腔积气14例（均〈5mL），随访4—5个月，气体均吸收。1例71岁患者血肿复发，再次单孔钻颅引流后治愈。结论：钻孔；中洗引流术是治疗慢性硬膜下血肿简单、安全、疗效可靠的方法     

细菌质粒提取方法的研究

为建立一种革兰氏阴性及阳性菌均能分析的质粒提取方法,以Biswajit saha的方法为基础,对比酸酚法、热变性法、碱变性法、酶法等方法,研制符合国内一般实验室的方法,结果：按Biswajit saha法Ecol-iv517的8条带在本实验室条件下不能安全检出,但自研方法重复12次均能检出,且与标准蛋白Market的分子量相符合,另取临床分离菌株,金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌各30株,均检出,最大质粒分子量检出186.3kb,最小分子量检出1.1kb,3次重复检测质粒普均相同,结果表明：改良质粒质量提取方法适用于革兰氏阴性及阳性菌大小分子量的质粒提取,便于在一般实验室推广应用。     

2018—2020年多中心儿童感染主要分离菌分布及耐药性分析

摘要：目的 探讨2018至2020年国内多中心儿童患者(≤14岁)分离细菌分布及耐药性情况,为临床合理使用抗菌药物提 供实验室依据及指导。方法 按照全国细菌耐药监测网监测方案要求,对全国不同地区11家三级医院,进行目标细菌收集、鉴 定和药敏试验,分析2018至2020年儿童患者标本来源、分离率和构成比及抗菌药物敏感性,揭示近3年来儿童组耐药数据特点 及变化趋势。结果 在儿童组患者中共检出病原菌14556株,其中革兰阳性菌6200株(42.6%),革兰阴性菌8356株(57.4%)。主 要标本来源分别为呼吸道标本4855株(33.4%)、尿液2724株(18.7%)、血液1683株(11.6%)、伤口脓液1462株(10.1%)和脑脊液246 株(1.7%)。呼吸道标本中,分离率最高的分别为流感嗜血杆菌(721株,14.9%)、金黄色葡萄球菌(672株,13.8%)和肺炎链球菌 (670株,13.8%);尿液标本分离率最高的是大肠埃希菌(858株,31.5%)和屎肠球菌(556株,20.4%);伤口脓液标本以金黄色葡 萄球菌(449株,30.7%)和大肠埃希菌(431株,29.5%)最为常见;血液和脑脊液标本表皮葡萄球菌检出率最高,分别为19.7%(331 株)和20.7%(51株)。耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)检出率为16.9%(409/2416株),耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CR-PA)为 12.2%(79/649株),耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CR-AB)分离率为47.2%(395/837株),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率 为26.4%(589/2235株),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为79.0%(1017/1288株)。结论 儿童感染病原以革兰阴 性菌为主,感染部位以呼吸道为主,不同部位感染的病原菌构成不同,细菌耐药率及碳青霉烯类耐药菌分离率有其特点,临床 应根据监测结果进行针对性治疗。     

多重PCR检测万古霉素耐药的肠球菌

目的检测2005～2007年澳大利亚墨尔本地区万古霉素耐药的肠球菌基因。方法用多重PCR检测肠球菌4种耐药基因(vanA,vanB,vanC1和vanC2),鉴定4种肠球菌E.faecalis(粪肠球菌),E.faecium(屎肠球菌),E.gallinarum(母鸡肠球菌)和E.casseliflavus(产黄肠球菌)。结果vanA基因扩增阳性可见732bp条带;vanB基因为635bp条带;vanC1基因为822bp条带;vanC2/3基因为439bp条带。粪肠球菌基因扩增见941bpDNA条带,屎肠球菌为550bpDNA条带。3年回顾性研究中,最常见的万古霉素耐药基因是vanB型(84.9%),菌种是屎肠球菌(76.3%)。2007年还出现2株同时含有vanA和vanB耐药基因的屎肠球菌菌株。结论万古霉素耐药的肠球菌菌株逐年增多,多重PCR检测万古霉素耐药的肠球菌,简便迅速,有利于准确及时地发出报告。