HPLC测定复方血栓通胶囊中人参皂苷Rg_1Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的:建立HPLC测定复方血栓通胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1含量的方法。方法:采用Shi-madzu-C18柱,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为203nm,流速为1.0mL/min,柱温为40℃,理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于2000。结果:测得人参皂苷Rg1在0.868～8.680μg(r=0.9999,n=6)、人参皂苷Rb1在0.892～8.920μg(r=1.0000,n=6)、三七皂苷R1在0.308～3.080μg(r=1.0000,n=6)线性关系良好;平均回收率人参皂苷Rg1为100.11%,RSD0.71%;人参皂苷Rg1为99.91%,RSD0.87%;三七皂苷R1为99.90%,RSD1.61%,(n=5)。结论:本法准确,专属性强。     

人参皂苷Rg_1对大鼠脑片AD模型磷酸化Tau蛋白及NMDA受体亚单位NR1,NR2B表达的影响

目的:观察人参皂苷Rg1对大鼠脑片AD模型磷酸化Tau蛋白(Phosphory protein Tau,P-Tau)及N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位1(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 1,NR1)、亚单位2B(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2B,NR2B)的表达影响。方法:将5周龄雄性Wistar大鼠脑片(含皮层和海马)随机分为5组:空白对照组、模型组和低、中、高剂量人参皂苷Rg1组,每组10张脑片,脑片放置盛有人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)的6孔板中培养,温度(32.0±0.5)℃,整个过程ACSF中持续通入混合氧气(95%O2+5%CO2)。人参皂苷Rg1各组ACSF中首先加入人参皂苷Rg1(60,120,240μmol.L-1)作用2 h,然后模型组和人参皂苷Rg1各组ACSF中分别加入冈田酸(okadaic acid,OA)1μmol.L-1作用3 h,空白对照组不加任何处理因素。采用免疫组织化学、图像分析技术等方法,检测皮层和海马P-Tau,NR1,NR2B表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠脑片P-Tau的表达增加(P0.05或P0.01),NR1,NR2B的表达降低(P0.01);人参皂苷Rg1各组与模型组比较,大鼠脑片P-Tau的表达降低(P0.01或P0.05),NR1,NR2B的表达增加(P0.01或P0.05),其中以高剂量人参皂苷Rg1组效果最佳。结论:人参皂苷Rg1可以降低大鼠脑片AD模型P-Tau表达水平,并能上调学习记忆相关蛋白NR1,NR2B的表达,以此途径发挥抗痴呆作用。     

不同贮藏处理对西洋参鲜根品质及成分的影响

目的:研究2种贮藏方法对西洋参鲜根品质及成分的影响.方法:选择无病健康的四年生西洋参鲜根,分别采用砂藏(处理A)和"清洗+保鲜剂+保鲜袋"(处理B)2种方式进行保鲜贮藏至180 d,每隔45 d随机取样1次,调查参根发病率和病情指数,测定人参皂苷、粗多糖以及游离氨基酸的含量.结果:贮藏45 d内,B处理的参根没有发病,优于A处理;贮藏至180d时,则以A处理的效果更好,发病率和病情指数均低于B处理.2种贮藏方式下,人参皂苷、粗多糖和游离氨基酸含量均存在明显差异.在整个贮藏过程中,A处理的西洋参中人参皂苷含量一直保持较高,粗多糖和游离氨基酸含量在135 d贮藏期内变化平缓,至180 d时有较明显的上升;而B处理的西洋参中粗多糖含量在贮藏90 d后明显下降,至135 d后基本保持稳定,游离氨基酸含量呈类似变化趋势,但下降不明显.结论:总体看来,在180 d贮藏期间,A处理更有利于保持西洋参鲜根的品质.     

抗氧化作用可能是人参皂甙Rg1抗细胞凋亡的机制

目的 :探讨人参皂甙Rg1对MPP+诱导SHSY5Y细胞凋亡的保护作用及其可能的机制。方法 :用吖啶橙溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率 ,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位及细胞内活性氧 (ROS)水平 ,WesternBlot法检测bcl 2、bax蛋白表达水平。结果 :经 10 μmol·L- 1Rg1预处理后 ,MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡受到明显的抑制 ,虽然线粒体跨膜电位无明显改变 ,但细胞内ROS下降 ,而bcl 2蛋白表达水平增加 ,bax蛋白表达水平减少。结论 :Rg1可抑制MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡 ,其作用机制可能是通过清除ROS、调节bcl 2、bax蛋白表达水平起作用。     

生晒参红参林下参中7种人参皂苷含量的比较

目的:对本溪地产的生晒参、红参、林下参,建立可同时测定人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2和Rd含量的反相高效液相色谱方法,并对三者进行了比较。方法:采用高效液相法测定人参皂苷含量。色谱柱:Dia-monsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:50%乙腈、水(梯度洗脱),柱温30℃,流速:1.0mL·min-1,检测波长203nm。结果:这种方法可以有效地区别不同种类人参中人参皂苷的含量。结论:生晒参、红参、林下参之间多数成分上有差异。     

基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌相关疾病机制及实验验证

目的 基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌（Hp）相关疾病机制,研究三七中有效活性成分人参皂苷Rb₃对Hp造成的胃上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法 使用Herb数据库收集“三七”的相关预测靶点,使用Gene Cards数据库收集Hp相关疾病的靶点;使用Draw Venn Diagram网站绘制Venn图,得到靶点交集;进行蛋白互作（PPI）网络分析、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。将GES-1细胞分为对照组、模型组及人参皂苷Rb₃低、中和高浓度（1、5、10 μ mol· L^-1）组,人参皂苷Rb₃组使用相应浓度的人参皂苷Rb₃预处理,培养过夜12 h至融合度为70%～80%。Hp悉尼株1 （SS1）按感染复数（MOI） 100加入细胞中制备损伤模型,人参皂苷Rb₃继续给药,共培养48 h。对照组不加SS1,对照组和模型组不加药。改良吉姆萨染色后通过光学显微镜观察细胞形态;结合Hoechst 33342荧光染色和Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒法检测活性氧（ROS）水平;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测凋亡相关基因TP53、Bax、Bcl-2表达量;Western blotting法检测P53、p-Akt、cleaved/pro-Caspase 9、Bcl-2、Bax、cleaved/pro-Caspase 3的蛋白表达情况。结果 网络药理学结果表明三七治疗Hp相关疾病的靶点共16个,其PPI网络分析得到按度值大小排名前6位靶点为TP53、CASP3、PTGS2、IL6、TNF、IL1β。GO富集分析与KEGG富集分析结果均显示与凋亡相关。与模型组比较,经人参皂苷Rb₃处理后,GES-1细胞的细胞核染色质致密深染,破裂的细胞逐渐减少;Hoechst 33342荧光染色细胞核强荧光数目明显减少;细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;ROS水平显著降低（P＜0.05）;TP53与Bax的mRNA水平显著降低,Bcl-2 mRNA水平显著升高（P＜0.05）; p-Akt、Bcl-2蛋白表达显著升高（P＜0.05）,P53、Bax、cleaved/pro-Caspase 9与cleaved/pro-Caspase 3蛋白表达显著降低（P＜0.05）。结论 三七可能通过包括炎症及凋亡在内的多种途径治疗Hp相关疾病,人参皂苷Rb₃对Hp诱导的胃上皮细胞凋亡发挥显著改善作用,其可能机制是降低氧化应激水平,并调节Akt的磷酸化和P53的表达。     

Roles and mechanisms of ginseng in protecting heart

Ginseng,the root of Panax ginseng C.A.Mayer,has long been used clinically in China to treat various diseases.Multiple effects of ginseng,such as antitumor,antiinflammatory,antiallergic,antioxidative, antidiabetic and antihypertensive have been confirmed by modern medicine.Recently,the clinical utilization of ginseng to treat heart diseases has increased dramatically.The roles of ginseng in protecting heart are foci for research in modern medical science and have been partially demonstrated,and the mechanisms of protection against coronary artery disease,cardiac hypertrophy,heart failure,cardiac energy metabolism,cardiac contractility,and arrhythmia are being uncovered progressively.However,more studies are needed to elucidate the complex mechanisms by which ginseng protects heart.All such studies will provide evidence of ginseng’s clinical application,international promotion,and new drug development.     

人参皂苷Rg3对人胃癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响

目的研究人参皂苷Rg3对人胃癌细胞株MKN28中Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad（Ser112）,pBad（Ser136）表达的影响。方法用浓度为0,10,20,40和80μmol/L的人参皂苷Rg3处理MKN28细胞24h后。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测人参皂苷Rg3对MKN28细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对MKN28细胞凋亡的诱导作用,Westernblot方法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后MKN28细胞中Pim-3,pBad（Ser112）和pBad（Ser136）的表达情况。结果10,20,40和80μmo1/L的人参皂苷Rg3对MKN28细胞增殖的抑制率分别为18.70,34.06,54.49,69.28%。10～80μmol/L的人参皂苷Rg3处理细胞呈现明显的凋亡形态学改变,80μmol/L人参皂苷Rg3处理MKN28细胞24h后,凋亡细胞占（12.23±2.1）%,处理组比正常对照组（3.28±1.7）%凋亡明显增加,差异有统计意义（P〈0.01）。Bad总蛋白表达没有明显影响。pim-3和pBad（Ser112）的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱。pBad（Ser136）不表达。结论人参皂苷Rg3的抗癌活性与其调节Pim-3以及磷酸化Bad蛋白表达有关;Pim-3可磷酸化Bad抑制胃癌细胞的凋亡。     

HPLC法同时测定舒胸速释微丸中4种化学成分的含量

目的建立同时测定舒胸速释微丸中羟基红花黄色素A、阿魏酸、三七皂苷R1和人参皂苷Rg14种化学成分含量的高效液相色谱法。方法采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)和质量分数为0.05%的磷酸水溶液(B)作流动相,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:203 nm。结果羟基红花黄色素A、阿魏酸、三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的线性范围分别为1.88~37.50 mg.L-1(r=0.999 7),0.91~18.20 mg.L-1(r=0.999 5),2.25~45.00 mg.L-1(r=0.999 5)和15.10~302.00 mg.L-1(r=0.999 8),平均加样回收率(n=9)分别为97.3%、97.8%、98.7%和98.5%,RSD为1.8%、1.5%、1.4%和1.8%。结论HPLC法可为舒胸速释微丸提供含量测定的方法。