沉默 Notch-1 基因影响人膀胱癌 RT4 细胞生物学行为的体外实验研究

目的：研究沉默 Notch-1 基因对人膀胱癌 RT4 细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化等生物学行为的影响。方法： 设计并构建 Notch-1 shRNA,选取 RT4 细胞作为研究对象分别进行转染。实验细胞分为 Notch-1 阴性对照组（shRNA NC）, Notch-1 干扰组（Notch-1 shRNA）。细胞转染 48 h 后,MTT 法检测细胞增殖水平变化;Transwell 检测细胞侵袭力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡水平情况;RT-PCR 和 Western blot 检测凋亡相关蛋白（Bax、Bid、Bcl-2）及上皮间充质转化（EMT） 因子（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）在 mRNA 和蛋白水平上的改变。结果：与 shRNA NC 组相比,Notch-1 shRNA 组细胞增殖率明显下降（t =4.629,P =0.010）,侵袭力减弱（t = 8.193,P=0.001）,细胞凋亡率明显升高（t= –18.441,P<0.001）,Bad（t = –12.521,P<0.001 ;t = –6.983,P =0.002）、Bid（t = –9.231,P<0.001 ;t= –8.871,P=0.001）、E-cadherin（t= –13.457,P<0.001 ;t= –5.610,P=0.005）mRNA 和蛋白表达量增多,Bcl2（t=10.651,P<0.001 ;t=6.973,P=0.002）、N-cadherin（t=6.505,P<0.001 ;t=10.132,P=0.001）、Vimentin（t=9.135,P<0.001 ;t =5.630,P =0.005）mRNA 和蛋白表达量显著降低。结论：沉默 Notch-1 的表达能够抑制人膀胱癌 RT4 细胞的增殖和侵袭迁移,促进其细胞凋亡,其机制可能与诱导 Bad、Bid、E-cadherin,抑制 Bcl2、N-cadherin、Vimentin 的表达有关。     

前循环动脉瘤的显微外科手术治疗(附42例报告)

前循环动脉瘤占各种颅内动脉瘤的绝大多数.1998年1 月至2005年7 月,我科共手术治疗42例前循环动脉瘤患者,疗效良好,现将结果报告如下.     

外伤性后颅窝血肿80例临床分析

目的 通过对外伤性后颅窝血肿的临床分析,提高外伤性后颅窝血肿的诊治水平.方法 报告80例外伤性后颅窝血肿,有硬膜外血肿55例,硬膜下血肿14例,小脑血肿6例,混合性血肿5例,伴有对冲性额颞叶脑挫裂伤或血肿30例.就其受伤机制、临床特点、诊断与治疗、呼吸骤停的抢救等问题进行讨论.结果 38例保守治疗痊愈,42例经手术治疗痊愈30例,轻残7例,重残1例,死亡4例;死因有术前呼吸骤停2例,伴严重对冲性额颞叶损伤或血肿2例.结论 后颅窝血肿临床表现无特异性,易致呼吸骤停;有枕部外伤史伴头痛、呕吐或照片示枕骨骨折者应高度怀疑,及时头颅CT检查可确诊.血肿量≤10ml可在严密观察下保守治疗,＞10ml或病情趋恶化应手术治疗;有对冲性幕上损伤应同时处理.     

马齿苋酰胺E干预肾癌的作用机制研究

目的探讨马齿苋酰胺E对人肾癌786-O细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法体外培养786-O细胞,给予马齿苋酰胺E(10、20、40μmol/L)进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力;采用AO/EB试剂盒检测细胞凋亡率。建立裸鼠移植瘤肾癌模型,给予马齿苋酰胺E(3、15mg/kg)进行干预,测定各组裸鼠肿瘤质量及体积,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织病理变化;采用Westernblotting法检测786-O细胞和荷瘤裸鼠瘤组织中细胞增殖标志物如Ki67、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclear antigen,PCNA)及凋亡标志物如活化半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、Cleaved Caspase-9及侵袭相关蛋白如基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9及希佩尔-林道抑癌基因(VonHippel-Lindau,VHL)/缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)通路相关蛋白VHL、HIF-1α的表达情况。结果马齿苋酰胺E显著抑制786-O细胞活力(P<0.05、0.01),下调Ki67、PCNA蛋白表达水平(P<0.05、0.01);明显促进786-O细胞凋亡(P<0.05、0.01),上调Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平(P<0.05、0.01);有效改善786-O细胞迁移与侵袭能力(P<0.05、0.01),显著降低MMP-2、MMP-9蛋白表达水平(P<0.05、0.01);显著上调VHL蛋白表达水平(P<0.05、0.01)并显著下调HIF-1α蛋白表达水平(P<0.01)。马齿苋酰胺E可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积(P<0.05、0.01),抑制肿瘤细胞增殖并促进其凋亡,显著下调Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05、0.01),显著上调Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、VHL蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论马齿苋酰胺E体外可有效抑制786-O细胞增殖、迁移与侵袭,促进786-O细胞凋亡,体内可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积,其作用机制可能与调控VHL/HIF通路及其下游蛋白表达有关。     

急诊手术治疗自发性小脑血肿59例分析

目的探讨自发性小脑出血的外科治疗方式。方法回顾性分析采用不同手术方式治疗59例自发性小脑出血患者的临床资料。采用后后颅窝开颅小脑内血肿清除及去骨瓣减压术29例。采用CT引导定位血肿穿刺引流术22例,单纯脑室外引流治疗8例,结果按GOS标准评估预后,死亡4例,重残5例,恢复良好50例。结论对自发性小脑出血患者,要根据发病病因、病情轻重、头颅CT表现,选择不同的手术方式;及时手术可以取得良好的治疗效果。     

内脏转移性去势抵抗性前列腺癌患者的基因突变特征分析

目的探讨内脏转移性去势抵抗性前列腺癌（mCRPC-VM）患者的基因突变特征。方法选取2017年1月至2019年12月在温州医科大学附属第一医院泌尿外科确诊为mCRPC-VM的患者33例，均完善前列腺易感基因二代测序。采用生物信息学分析mCRPC-VM患者的基因突变特征，并与SU2C-PCF数据库的444例转移性去势抵抗性前列腺癌患者基因组数据进行比较。结果33例mCRPC-VM患者突变频率从高到低的基因分别为TP53（45.45%）、AR（42.42%）、NCOR2（15.15%）、PTEN（15.15%）、FOXA1（15.15%）、PIK3CA（15.15%）、RB1（15.15%）。3例（9.09%）患者携带胚系突变，均发生于DNA损伤修复通路基因。肝转移患者AR、FOXA1突变频率均高于非肝转移患者（均P＜0.05）。TP53、NCOR2、PTEN、FOXA1、PIK3CA突变类型占比最高均为错义突变，AR突变类型占比最高为基因扩增，RB1突变类型占比最高为移码突变。基因缺失突变主要发生在肺转移患者（71.43%），扩增突变主要发生在肝转移患者（66.67%）。与SU2C-PCF数据库比较，本院患者PTEN突变频率明显较低（P＜0.05）；而AR、TP53、NCOR2、FOXA1、PIK3CA、RB1等基因突变频率比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论mCRPC-VM患者的高频率突变基因为TP53、AR，高频率突变基因的类型以错义突变为主。     

听神经瘤手术治疗探讨

目的 分析和探讨听神经瘤手术治疗技巧，以提高手术疗效。方法 回顾手术治疗31例听神经瘤，采用经岩乙状窦前入路20例，枕下乙状窦后入路11例，显微手术16例，术中可清晰辩识面神经26例。结果 全切除肿瘤29例，次全切除2例，术后死亡1例，面神经解剖保留24例，面肌功能保留8例。结论 两种手术方法均可全切任何大小听神经瘤，枕下乙状窦后入路因其对岩骨侵袭小、手术便捷、术后并发症少，应为听神经瘤手术首选入路。显微手术和术的经验及对桥小脑角显微解剖知识，对提高手术效果很有帮助。     

腹腔镜手术切除射精管囊肿三例报告

随着腹腔镜设备改善和技术成熟,腹腔镜逐渐应用到精囊囊肿手术[1],为腹腔镜下射精管囊肿切除术提供了可能.2003年4月至2004年3月,我们成功行腹腔镜下射精管囊肿切除术3例.现报告如下.     

23例垂体腺瘤手术治疗体会

我院 1988年 5月至 2 0 0 1年 9月对 2 3例不同大小垂体腺瘤施行手术治疗 2 4例次 ,其中显微镜下切除 15例 ,取得较满意效果 ,报告如下。1　资料与方法1.1　一般资料 :本组男 12例 ,女 11例。年龄最小16岁 ,最大 6 5岁 ,30～ 5 0岁 18例 (78 3% ) ,平均39 1岁。病程 4个月～ 10年 ,平均 2 4年。1.2　临床症状及体征 :13例出现内分泌紊乱 ,其中停经 8例 ,泌乳 5例 ,婚后不孕 4例 ,阳萎或性欲下降 3例 ,肢端肥大 3例 ,多饮多尿 4例 ,甲亢及糖尿病各 1例。 16例出现头痛 ,17例有视力障碍 ,其中完全失明 1例 ,7例单眼或双眼数指 1米 ,颞侧对称…     

持续性植物状态

近年来 ,在脑外科、神经科等科室中 ,常可见到持续性植物状态 (persistent vegetative state,PVS)的患者。据粗略估计 ,我国 PVS患者约 7万～ 1 0万 [1]。此类患者死亡率高 ,致残严重且缺乏有效治疗 ,给社会及家庭带来巨大的负担。由于目前对PVS的认识尚未统一 ,对诊断、评定及治疗带来一定困难 ,严重残疾所引起的社会及医学伦理方面的问题也越来越受到人们的重视。1　持续性植物状态的定义　　 1 972年 ,Jennet和 Plum首选提出 PVS,并用来描述严重脑损伤患者表现出的无意识功能而保持睡眠—觉醒周期、原始姿势反射和眼球运动的状态 ,…