基于“实验设计”的临床酶学参考方法测量不确定度评定模型的建立

目的 以血清γ-谷氨酰基转移酶(GGT)催化活性参考方法测量不确定度评定为例,建立临床酶学催化活性测量参考方法的不确定度评定模型.方法 依据GGT参考方法测量流程,以GGT催化活性浓度为核心评价指标,确立影响GGT催化活性浓度测量的主要因素.采用实验和理论评估相结合的方法对已确认的各因素对GGT催化活性测量的影响量进行...     

血清CK常规方法测量结果的正确性评价与系统偏倚的修正

血清CK测量是临床实验室测量频率极高的项目之一,是骨骼肌、心肌等疾病诊断、治疗监测的重要指标[1].既往研究表明,血清CK常规方法测量结果各实验室间缺乏可比性[2-3],已影响临床诊断和治疗.根据ISO 15189[4]要求,各实验室测量结果应准确并可溯源.按ISO 18153文件要求,血清CK测量结果应溯源至国际临床化学学会(IFCC)参考方法[5].在我国,临床实验室多采用基于自动生化分析仪的常规方法测量血清CK活性,这类方法测量结果的正确性与校准直接相关[6-8].本研究采用厂家校准品校准、人血清基质国家二级标准物质校准[9-10]和选配校准品校准3种模式在日立7170生化分析仪上同时测量40份不同浓度的冷冻血清,测量结果与IFCC参考方法比较,判定不同校准模式下各方法测量结果的正确性.对存在系统偏倚的方法用国家二级标准物质进行厂家认定值修正,并采用31份新鲜单人份血清验证修正后该方法测量结果的正确性.     

CRP定量检测异常在感染及肿瘤诊断中的意义

目的探讨CRP定量检测在感染及肿瘤诊断中的价值。方法用免疫沉淀法定量测定376例感染患者及295名恶性肿瘤患者（其中血液系统肿瘤123例、实体瘤172例）血液中CRP水平,以CRP〉10mg/L设为阳性。结果感染组及肿瘤组阳性率分别为87.8%,65.8%（血液系统肿瘤组及实体瘤组的阳性率分别为67.5%、64.5%）;患者的CRP定量均值分别为：感染组58.79mg/L、肿瘤组51.05mg/L,血液系统肿瘤组48.53mg/L,实体瘤组52.93mg/L。结论感染及肿瘤的CRP阳性率无显著性差异,感染患者CRP定量检测均值高于肿瘤患者,但血液系统肿瘤与实体瘤之间差别不大,CRP定量检测对恶性肿瘤及感染的诊断具有一定的意义。     

不同方法检测尿中白细胞结果的比较与分析

尿常规检测是临床最常应用的检测项目之一，尿中自细胞测定是判断泌尿系统有无病变的重要指标，目前各实验室用不同方法检测尿中自细胞，结果差异很大，有些方法存在严重的漏诊现象，应引起临床高度重视。     

维生素C对TRINDER反应的干扰

目的 分析Vitc干扰Trinder反应的原因。方法 采用比较分析法，分析干扰类型。结果 Vitc对Trinder反应的干扰来自于两个方面：1．vitc与Trinder色原的反应。2 Vitc与H2O2的反应。均造成明显的负干扰。结论 实验室克服其干扰有一定困难。建议临床医师选择适当时间测定病人血糖(GLU)、胆固醇(CHOL)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、尿酸(UA)等生化检验项目。     

在Hela细胞中验证miRNA-21对TLR4的调控

背景：miRNA通过调节特异靶基因的表达,在疾病的发展及预后中起着重要作用。 目的：探索miRNA-21在宫颈癌Hela细胞中对TLR4基因的调控关系。 方法：通过miRNA靶基因预测网站寻找可能与miRNA-21相互作用的靶基因,利用已构建的携带pri-miRNA-21基因重组腺病毒载体,包装并大量扩增病毒感染Hela细胞,检测荧光蛋白的表达水平,提取感染48 h蛋白,通过Western印迹检测TLR4蛋白表达。从蛋白水平验证在Hela细胞中miRNA-21与靶基因TLR4的靶向调控关系。 结果与结论：100 MOI的重组腺病毒pAd/pri-miRNA-21、pAd/neg可以成功感染Hela细胞。生物信息学方法显示miRNA-21和TLR4存在可能的结合位点。发现感染pAd/pri-miRNA-21组与对照组pAd/neg及空白组相比,TLR4蛋白的表达量明显降低。证实了miRNA-21可以负调节靶基因TLR4的表达。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

日立7170A全自动生化分析仪反应槽温度准确性及波动的检测

目的:检测日立7170A全自动生化分析仪反应槽温度准确性及波动。方法:用精度为0.001℃的Fluke点温计测定反应槽水浴温度,共测10min,每隔18s记录一次温度,计算所有次温度值的平均值和最大值与最小值之差。平均值(T)为温度准确性;最大值与最小值之差(△T)为温度波动。结果:T=36.960℃;△T=0.064。结论:所检测的日立7170A全自动生化分析仪反应槽温度准确性及波动符合国家标准。     

参考实验室外部质量评估计划样品天冬氨酸氨基转移酶稳定性评价

摘要：目的：评价2014年参考实验室外部质量评估计划（RELA）样品天冬氨酸氨基转移酶（AST）的稳定性。 方法：按说明书要求溶解2014年RELA-A样品,用棕色小瓶分装后立即－80 ℃冻存。将分装后的样品从－80 ℃低温冰箱取出,置于2~8 ℃冰箱1、2、4、6、8、16、24、48 h,用国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）列表AST一级参考方法测量样品,每份测量3次,以1 h结果均值为基准值,计算2、4、6、8、16、24、48 h AST结果均值相对1 h结果均值的偏移。 结果：2、4、6、8、16、24、48 h AST结果均值相对1 h结果均值的偏移分别为+0.39%、+0.96%、+0.80%、+1.72%、+2.21%、+3.04%、+4.47%。 结论：2014年RELA-A样品2~8 ℃保存时AST催化活性呈逐渐增加趋势,建议各实验室尽量缩短RELA样品在2~8 ℃的存放时间。     

响应面分析法在胆碱酯酶测量条件优化中的应用

目的筛选胆碱酯酶(ChE)的最佳测量条件。方法选择5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)法(DTNB)测量ChE的关键影响因子,用单因素分析法确定响应面分析法(RSM)的理想实验区域,用RSM的中央合成设计建立相应的反应面模型,获得影响因子响应值的关系方程。用Minitab 15软件进行RSM测量条件优化,筛选出ChE最佳测量条件并进行验证。结果 ChE测量的关键影响因子为缓冲液pH值(A)、丁酰硫代胆碱浓度(B)、DTNB浓度(C)。RSM的理想实验区域为缓冲液pH值7.6~9.2;丁酰硫代胆碱浓度6.7~20.1 mmol/L;DTNB浓度0.2~0.4 mmol/L。各影响因子与响应值(Y)的关系方程为Y=8 476.13-73.29A+20.00B-4.56C-126.86A2+32.85B2+71.48C2-55.47AB-1.06AC-16.34BC。ChE的最佳测量条件为缓冲液pH值8.10;丁酰硫代胆碱浓度13.40 mmol/L;DTNB浓度0.29 mmol/L,此条件下ChE催化活性为8 755 U/L,相当于理论最高酶活性的95%以上。结论用RSM成功筛选出ChE最佳测量条件,建立了合理可行的ChE测量影响因子的RSM多因子分析模型。     

不同混匀模式对乳酸脱氢酶参考方法测量结果的影响

目的观察不同混匀模式对乳酸脱氢酶(LDH)参考方法测量结果的影响。方法将LDH参考测量过程分为3个阶段:温育期、延迟期、测定期。温育期不混匀,按延迟期和测定期的混匀时间和混匀时机,设计A~K共11种不同混匀模式,用LDH参考方法分别对具有良好互换性的2012年国际比对样本RELA-2012B进行测量,每种模式重复测量3次。以国际临床化学协会(IFCC)公布的LDH RELA-2012B结果靶值为标准,分别计算不同混匀模式下测量均值与靶值的相对偏移。以Minitab15软件绘制散点图,IFCC允许的等效限为±4.50%,选择出较为合适的混匀模式。结果在A~K不同混匀模式下,测量结果均值与靶值的相对偏移分别为-4.15%、-3.50%、-3.38%、-1.76%、-1.12%、-0.16%、-2.85%、4.37%、3.67%、3.52%、2.39%。结论不同混匀模式对乳酸脱氢酶参考方法测量结果有影响,F混匀模式相对于其他混匀模式对测量结果的影响更小。