mTOR通路增强宫颈癌紫杉醇耐药细胞株HeLa/PTX对紫杉醇的敏感性

目的探讨mTOR在宫颈癌紫杉醇耐药中的作用及mTORC1/2双重抑制剂OSI-027联用紫杉醇后HeLa/PTX细胞对紫杉醇(paclitaxel,PTX)敏感性的变化并对相关机制进行研究。方法用sh-RNA-Raptor及sh-RNA-Rictor质粒转染HeLa/PTX细胞以下调Rictor及Raptor的表达,采用western blot法检测mTOR信号通路相关蛋白(Raptor、Rictor、p-Akt(ser473)、Akt和p-p70S6K)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达情况;采用平板克隆形成实验、CCK-8法及Western blot法检测单用mTORC1/2双重抑制剂(OSI-027)、PTX及联用OSI-027和PTX后细胞克隆形成能力、增殖活力的变化并计算药物联用指数(combination index,CI)及mTOR信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,在HeLa/PTX细胞中下调Raptor后p-p70S6K表达显著降低(P<0.001),p-Akt(ser473)/Akt比率显著升高(P<0.001),Bcl-2/Bax比值无显著差异(P>0.05)。下调Rictor后p-p70S6K蛋白表达、p-Akt(ser473)/Akt及Bcl-2/Bax比值均显著降低(P<0.001);与单独使用OSI-027或PTX相比,联合用药组细胞的克隆形成能力及增殖活力均明显下降且两药联用具有协同作用;与空白对照组相比,单用PTX处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率略降低(P<0.05),p-p70S6K表达无明显变化(P>0.05),而单用OSI-027处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比率及p-p70S6K表达均显著降低(P<0.001);与单用OSI-027及PTX相比,联合用药处理HeLa/PTX细胞后p-Akt(ser473)/Akt比值、Bcl-2/Bax比值及p-p70S6K蛋白表达均显著降低(P<0.001)。结论抑制mTORC2信号通路的活性可减弱mTORC1抑制引起的p-Akt(ser473)反馈激活可成为克服紫杉醇耐药的有效靶点;mTORC1/2双重抑制剂OSI-027与紫杉醇联用可产生协同抗肿瘤作用。     

多途径联合用药治疗广泛耐药鲍曼不动杆菌颅内感染1例报告并文献复习

目的探讨广泛耐药鲍曼不动杆菌颅内感染的早期诊断及治疗方案。方法分析1例颅脑外伤术后广泛耐药鲍曼不动杆菌颅内感染患者的临床资料;并结合文献复习,分析广泛耐药鲍曼不动杆菌颅内感染的治疗方案。结果本例患者住院过程中,采用二代测序技术及降钙素原检测脑脊液辅助诊断;抗生素使用方案为亚胺培南+替加环素+多粘菌素B静脉注射,以及联合腰大池引流庆大霉素冲洗和多粘菌素B+替加环素鞘内注射。治疗2周后患者颅内感染好转,脑脊液细菌培养阴性。结论对于广泛耐药鲍曼不动杆菌颅内感染,替加环素+多粘菌素B静脉用药,联合腰大池引流庆大霉素冲洗和多粘菌素B+替加环素鞘内注射有较好的治疗效果。     

醋酸吲哚实验在卡他莫拉菌快速鉴定中的临床应用

目的通过对醋酸吲哚酚(ACIND)实验与经典生化鉴定结果的一致性分析,评价ACIND的临床应用价值。方法选取某院分离的273株卡他莫拉菌(MC)疑似菌株为实验菌株,同时应用ACIND与VITEK-2compact进行鉴定,对鉴定结果进行统计学分析,结合药物敏感性数据,评价其快速检测结果对临床用药的参考价值。结果 273株疑似菌株经生化鉴定为257株MC及16株非MC,257株MC经ACIND鉴定有254株显阳性,而16株非MC中也有6株显阳性或弱阳性。ACIND对MC的灵敏度与特异度分别为98.83%(254/257)与62.50%(10/16),阳性预测值与阴性预测值分别为96.15%(254/260)及76.92%(10/13),Kappa值为0.672。该菌β-内酰胺酶阳性率为99.22%(255/257),对复方磺胺甲噁唑、头孢克诺及头孢呋辛的不敏感率均在20%～30%,对其他抗菌药物不敏感率低于5%。结论 ACIND鉴定结果与经典生化鉴定结果具有较好一致性,结合该地区MC耐药监测数据对临床用药具有较好的指导作用及临床应用前景。     

神经内科299株病原菌的临床分布及耐药性分析

目的:分析某院神经内科临床分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性,为临床抗感染治疗和预防耐药菌的产生提供理论依据。方法:采用纸片扩散法或自动化仪器法对神经内科近两年的临床分离菌进行药敏试验,并按美国临床和实验室标准化协会(CLSI) 2016版标准对结果进行判断;用WHONET5. 6进行数据分析。结果:共299株病原菌,其中革兰阳性菌106株,占35. 5%;革兰阴性菌193株,占64. 5%。前5位病原菌依次是大肠埃希菌(27. 76%)、金黄色葡萄球菌(12. 71%)、肺炎克雷伯菌(9. 70%)、凝固酶阴性葡萄球菌(Co NS)(9. 70%)、铜绿假单胞菌(9. 03%)。送检标本细菌分离率由高到低依次为尿液42. 47%(127/299)、呼吸道标本40. 13%(120/299)、血标本13. 04%(39/299)。MRSA检出率76. 3%,MRCNS检出率75. 9%,屎肠球菌中VRE检出率12. 5%,大肠埃希菌和克雷伯菌属中ESBLs的检出率分别为49. 4%和17. 2%,肠杆菌科细菌中CRE菌株的检出率0. 8%,肺炎克雷伯菌中XDR菌株的检出率为3. 4%,鲍曼不动杆菌中XDR菌株的检出率为31. 2%,铜绿假单胞菌中XDR株检出率为3. 7%。结论:神经内科住院患者的病情重,治疗难,要合理选择抗生素,防止抗生素不合理使用导致的耐药菌株的出现。     

逆转肿瘤细胞多药耐药活性的天然产物研究进展

肿瘤细胞多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,故寻找高效低毒的相关逆转剂是该领域急需解决的难题。体外实验被证明具有逆转肿瘤细胞多药耐药活性的化合物或生物制剂很多,但真正进入临床研究的只有异搏定、环孢菌素A等极少数,而且疗效不理想,近年来许多研究者将多药耐药逆转剂的研究转到低毒的天然产物,并从中发现具有相关作用的活性成分,本文将对此进行概述。     

82例四肢骨折内固定手术患者术后感染病原菌的特点及其耐药情况分析

目的:探究四肢骨折内固定手术患者术后感染病原菌的特点及其耐药情况。方法:抽取2017年11月—2019年5月期间收治的四肢骨折内固定手术患者82例资料,统计其临床采集标本中细菌培养、鉴定和体外药敏试验结果,分析其不同标本中分离病原菌谱的特点分布及其对15种抗菌药物的体外耐药情况。结果:82例患者标本中分离出致病菌87株,主要来自痰液(49株)、尿液(17株)、伤口分泌物(13株)等标本中,导致感染的病原菌主要是肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌;革兰阳性菌对青霉素的耐药性为最强,其对万古霉素的耐药性为最弱;革兰阴性菌对头孢唑林的耐药性为最强,而其对美罗培南的耐药性为最弱。结论:四肢骨折内固定患者术后发生感染致病菌主要以革兰阴性菌中肺炎克雷伯菌为最常见,多数致病菌为多重耐药菌,且对临床常使用的抗菌药物均由较高的耐药率;建议临床对术后感染患者尽早采集标本做细菌培养与药敏试验,及时调整用药方案,合理选用抗菌药物治疗,以确保其用药的有效性。     

ICU患者多药耐药肺炎克雷伯菌感染的影响因素及预防措施研究

目的探讨重症监护室(ICU)患者发生多药耐药肺炎克雷伯菌感染的影响因素及预防措施。方法选取2017年3月-2018年3月医院ICU发生多药耐药肺炎克雷伯菌感染患者90例为研究组,同期选取270例非多药耐药肺炎克雷伯菌感染患者为对照组,回顾性分析两组患者临床资料,单因素及多因素logistic回归分析患者多药耐药肺炎克雷伯菌感染的影响因素。结果 90株多药耐药肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶占91.11%,产碳青霉烯酶占8.89%;研究组患者入住ICU前抗菌药物使用种类>2种、入住ICU前抗菌药物使用时间≥3d、机械通气时间≥7d、合并肾功能不全和糖尿病比例分别为67.78%、75.56%、67.78%、57.78%和37.78%均高于对照组(P<0.05);logistic回归分析结果显示:入住ICU前抗菌药物使用种类>2种、机械通气时间≥7d、合并肾功能不全是ICU患者发生多药耐药肺炎克雷伯菌感染的影响因素(OR=2.440、2.487和1.542,P<0.05)。结论 ICU患者发生多药耐药肺炎克雷伯菌感染与抗菌药物使用、机械通气及肾功能有关,应采取针对性措施以减少多药耐药肺炎克雷伯菌感染的发生。