基于问卷调查的中医药高等院校知识产权教育分析

目的为国内中医药高等院校的知识产权教育工作提供借鉴。方法对国内5所中医药高等院校中药学专业在读研究生进行问卷调查,汇总及分析调查数据,辅以网络信息检索,研究知识产权教育对中药学研究生的重要性,分析中药学专业研究生的知识产权教育现状。结果目前国内中医药高等院校知识产权教育存在课程设置欠缺、课后实践不够、讲座举办不足等诸多问题。结论认识知识产权教育对中药学研究生的重要性,建议从建立培养机制、明确教育重点及完善实验室保密制度等方面对中药学专业研究生进行知识产权教育。     

《中药化学专论》研究生优质课程的建设与思考

[目的]探讨研究生《中药化学专论》优质课程的建设模式与方法。[方法]基于课程教学是研究生教育的重要环节,通过对浙江中医药大学《中药化学专论》课程在教学内容、教学手段、教学资源、网站平台、教师素质等多方面的系列改革进行分析,归纳总结优质课程建设的具体模式与实施方法。[结果]《中药化学专论》课程以对本科阶段《中药化学》课程知识的归纳和提升为基础,重点讲授中药化学成分提取、分离、鉴定的新技术,借助课程网站平台,融合线下实验操作、线上虚拟仿真,以翻转课堂式的幻灯片(powerpoint,PPT)汇报作为课程评价体系的主要组成部分,并在教学过程中不断提升教师素质,从而有效拓展了研究生课题研究的广度和深度,研究生对课题方案的设计能力、口头表述能力乃至PPT的制作能力也得以大大提升,为后续开题报告、论文的撰写和课题实验的实施提供了良好的保障。[结论]《中药化学专论》优质课程建设过程中所形成的课程体系和讲授模式,全方位保证了研究生培养的质量,为中药学研究生专业技能和科研能力的提升提供了新的借鉴。     

中药学硕士专业学位研究生培养的问题与对策

提升中药学硕士专业学位研究生培养质量,对于中医药产业的发展,有着重要的意义.以地方院校的C中医药大学为样本,通过对中药学硕士专业学位研究生培养现状进行分析,分析培养过程中出现的问题,提出提升人才培养质量的策略.     

玉竹提取物A对1型糖尿病小鼠的免疫干预作用

目的:观察百合科黄精属中草药玉竹经水醇法提取而来的玉竹提取物A对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠血糖、T淋巴细胞亚群及外周血细胞因子的影响。方法:①实验于2004-05/2004-12在锦州医学院医学实验中心完成。选用C57BL小鼠60只。随机抽取9只作为正常对照组小鼠(只注射等体积枸橼酸钠缓冲液),其余小鼠应用4g/L链脲佐菌素溶液,按40mg/kg剂量腹腔注射制备1型糖尿病模型,1次/d,连续5d,以血糖≥11.4mmol/L,尿糖以上2周,为造模成功,低于此值弃去,造模成功36只。将其随机分为4组,每组9只:模型组,玉竹提取物A1,2,4g/kg组。②正常对照组与模型组腹腔注射生理盐水0.5mL,1次/d,共4周;玉竹提取物A1,2,4g/kg组,分别按1,2,4g/kg剂量腹腔注射0.5mL玉竹提取物A(由锦州医学院免疫教研室潘兴瑜教授提供,玉竹的干燥根茎经水醇法提取而得),1次/d,共4周。③用药4周监测血糖变化,应用流式细胞仪检测用药后1型糖尿病小鼠脾T淋巴细胞亚群含量变化;采用酶联免疫分析法检测用药后1型糖尿病小鼠血清白介素4、白介素10、干扰素γ水平变化。④组间比较采用方差分析。结果:造模失败15只,正常小鼠9只及造模成功小鼠36只进入结果分析。①空腹血糖水平:用药前各组差异不明显(P>0.05),用药后,玉竹提取物各剂量组明显低于模型组(P<0.05～0.01)。②CD4 T淋巴细胞含量和CD4 与CD8 T淋巴细胞比值:模型组明显高于正常对照组和玉竹提取物各剂量组(P<0.05～0.01),CD8 T淋巴细胞含量:模型组明显低于正常对照组和玉竹提取物各剂量组(P<0.05～0.01)。③血清白细胞介素4和10水平:模型组明显低于正常对照组和玉竹提取物各剂量组(P<0.05～0.01),血清干扰素γ水平:模型组明显高于正常对照组和玉竹提取物各剂量组(P<0.05～0.01)。结论:玉竹提取物A经腹腔注射能明显降低1型糖尿病小鼠血糖,其机制与恢复CD4 和CD8 T淋巴细胞亚群平衡,调节发病过程中细胞因子水平有关。     

两种双壳贝提取物抗疲劳作用比较

目的：通过观察扇贝提取物与翡翠贻贝提取物喂养的实验小鼠的负重游泳时间、血尿素氮水平和肝糖原含量。比较两种贝类提取物对小鼠的抗疲劳作用。方法：实验于2005—02／06在广东医学院实验动物中心和生物化学与分子生物学研究所完成。①选用SPF级昆明种雄性小鼠240只。实验用扇贝和翡翠贻贝均为市售，两种贝类经提取，过柱，浓缩及干燥得到浅黄色粉末。两种提取物经急性毒性实验证明安全无毒。②小鼠负重游泳试验：选用小鼠80只，随机分为2组：扇贝提取物组和翡翠贻贝提取物组，每组40只；每个处理组再随机分为4个亚组：10，20和40g／L扇贝提取物和翡翠贻贝提取物组（分别给予10。20和40g/L扇贝提取物和翡翠贻贝提取物水溶液自由喂养），对照组用白开水作为饮水自由喂养。喂养30d后。鼠尾根部负荷5％体质量的铅丝，置小鼠在游泳池中游泳，水温（25&;#177;1）℃。记录小鼠自游泳开始至沉入水中的时间，作为小鼠负重游泳时间。③小鼠血尿紊测定：动物分组同前，处死小鼠后，采用二乙酰一肟显色法测定小鼠血尿素水平。④小鼠肝糖原测定：动物分组同前，处死小鼠后，采用氧化酶法测定小鼠肝糖原含量。⑤计量资料差异比较采用t检验，方差不齐时采用t’检验。结果：小鼠240只均进入结果分析。①扇贝提取物20和40g／L组小鼠负重游泳时间明显长于对照组（P〈0．05，0．01）。翡翠贻见提取物20和40g/L组小鼠负重游泳时间明显长于对照组（P〈0．05，0．01）。扇贝提取物40g／L组小鼠负重游泳时间明显长于翡翠贻贝提取物40g／L组（P〈0．05）。②扇贝提取物40g/L组和翡翠贻贝提取物20g／L组小鼠血尿素氮水平明显低于对照组（P〈0．05）。扇贝提取物40∥L组小鼠血尿素氨水平明显低于翡翠贻贝提取物40g／L组（P〈0．05）。③20和40g／L扇贝取物及翡翠贻贝提取物组小鼠肝糖原含量明显高于对照组（P〈0．05）。同样质量浓度的扇贝提取物与翡翠贻贝提取物组小鼠肝糖原含量比较，差异不明显（P〉0．05）。结论：扇贝提取物和翡翠贻贝提取物均对小鼠有抗疲劳作用，且扇贝提取物对小鼠的抗疲劳作用稍优于翡翠贻贝提取物。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左心室肥厚心肌细胞凋亡蛋白的作用

目的:观察丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚心肌凋亡蛋白的作用。方法:实验于2005-03/2005-07在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。①选用8周龄自发性高血压大鼠18只。随机将大鼠分为3组:对照组、丹参酮组、高血压组,每组6只。②对照组:饲养至第8周处死;丹参酮组:从饲养至第8周开始,丹参酮ⅡA(中国药品生物制品检定所,批号S02001300,1kg/包)以1mL/(kg·d)剂量腹腔注射,持续用药10周,第18周处死;高血压组:以相同容量蒸馏水替代丹参酮ⅡA腹腔注射,余同丹参酮组。③用药结束后用MRS2Ⅲ型大鼠电脑血压心率测量仪测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压。④处死后,迅速取出心脏,称量左心室(包括室间隔)的湿重,计算左室质量指数犤左室质量(mg)/体质量(g)犦。⑤采用免疫印迹法检测心肌细胞Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:自发性高血压大鼠18只均进入结果分析。①高血压组大鼠左心室心肌组织Bcl-2蛋白表达明显低于对照组(t=2.405,P<0.05),而p53和Bax蛋白表达明显高于对照组(t=14.51,10.26,P<0.01)。丹参酮组Bcl-2表达明显高于高血压组(t=2.359,P<0.05),而p53和Bax蛋白表达明显少于高血压组(t=11.74,7.13,P<0.01)。②高血压组大鼠的收缩压和左室质量指数明显高于对照组(t=6.68,3.84,P<0.01),左室质量指数明显高于丹参酮组(t=2.80,P<0.05)。结论:长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、下调Bax蛋白及抑制p53蛋白的表达有关。     

红花黄色素对特发性水肿患者血液流变学指标及血清一氧化氮的影响

目的：观察特发性水肿患者经红花注射液干预后，血液流变学指标和血清一氧化氮含量及其合酶活性的变化，探讨红花注射液对特发忡水肿的治疗机制。方法：①选择2000—01／2001—12河北北方学院（原张家口医学院）附属第一医院心血管内科门诊就诊的特发性水肿患者50例为特发性水肿组，均为女性，均对治疗方案及榆测项目知情同意。选择同期本院接受健康体检的学生及医务人员30人为对照组，均为女性。②应用红花注射液（主要成分为红花黄色素，太原华卫药业有限公司生产，批号：010302，2mL支）对特发性水肿组患者进行治疗，将红花注射液6～8mL溶于500mL葡萄糖注射液中，静脉滴注，1次／d，15d为1个疗程。治疗1个疗程。对照组未进行干预。③应用硝酸还原酶法、化学显色法对特发性水肿患者治疗前后及对照组采用由南京建成生物工程研究所提供的一氧化氮定量试剂盒、一氧化氮合酶分型试剂盒检测NO2^-/NO3^-含量及一氧化氮台酶、诱导型一氧化氮台酶活性；同时在治疗前后。LBY—N6B型全自动模块式血流变仪测定全血黏度的变化，以LBY—F200B型全自动微量血浆黏度计测定血浆黏度。④多组间计量资料差异比较采用单因素方差分析，组内计量资料差异比较采用配对t检验。结果：特发性水肿患者50例和健康体检者30人均进入结果分析。①全血黏度、血浆黏度：特发性水肿组治疗前明显高于对照组（t=1．694-2．067．P〈0．05-0．01）；治疗后明显低于治疗前（t=1．811～1．929，P〈0.05）。②血清一氧化氮含量及其合酶活性：特发性水肿组治疗前明显低于对照组（t=2．600-3．031，P〈0．01）；治疗后明显高于治疗前（t=1．995，1．725，1．939，P〈0．05）。结论：红花注射液通过改善特发性水肿患者血液流变学指标及提升一氧化氮含量及其台酶活性起到治疗作用。     

雷公藤对豚鼠表皮c-fos基因表达及表皮再生能力的调节

目的:观察雷公藤甲素对豚鼠皮肤原癌基因c-fos表达的影响,探讨雷公藤甲素的有效作用浓度。方法:实验于2004-01/08在泸州医学院组织学与胚胎学实验室进行。将20只雄性豚鼠随机分成为4个实验组,分别为对照组、雷公藤甲素5mg/L组、雷公藤甲素10mg/L组和雷公藤甲素20mg/L组,每组5只。使用雷公藤甲素5,10,20mg/L3种浓度对局部皮肤真皮注射处理,免疫组织化学方法显示c-fos阳性细胞,用光学显微镜和图像分析仪对结果进行观察和分析。结果:20只豚鼠均进入结果分析。与对照组比较,雷公藤甲素5,10,20mg/L组豚鼠表皮角质细胞c-fos表达明显增强(149,162,144,87个/视野,P<0.05),吸光度明显增高(0.142±0.025,0.157±0.066,0.159±0.079,0.107±0.076,P<0.05)。不同浓度药物之间作用差异无显著性意义(P>0.05)。结论:雷公藤甲素对豚鼠皮肤原癌基因c-fos表达具有调节作用,其有效作用浓度范围较实验采用的5～20mg/L大。     

中药猫眼草抑癌作用的动物实验

目的:探讨中药猫眼草对Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长、免疫调节、血液系统的影响,及其对肿瘤细胞周期的作用。方法:①实验于2004-11/2005-01在青岛海洋大学食品与药物研究所实验室(山东省重点实验室)完成。选用C57BL/6J纯系小鼠70只。将70只小鼠随机分为7组:空白对照组,模型组,猫眼草水提物7.5,15,30,60g/kg组及顺铂1mg/kg组,每组10只。②除空白对照组外,其他各组小鼠均于右腋部皮下注射传代后14d的Lewis肺癌瘤源小鼠瘤细胞悬液0.2mL以建立荷瘤小鼠模型。③从接种肿瘤次日开始猫眼草水提物犤猫眼草全草:购自青岛同仁堂大药房,产地江苏,产品批号:040901;北京京兴中药饮片厂生产(生产许可证号:冀Y20040006);猫眼草水提物:猫眼草生药500g加水煮沸,过滤,浓缩,制成口服液,每1mL含生药1.0g犦7.5,15,30,60g/kg组按每日7.5,15,30,60g/kg灌胃给予猫眼草水提物,连续12d;顺铂1mg/kg组每日按1mg/kg剂量腹腔注射给药1次,连续7d。每天观察小鼠饮食及肿瘤生长情况。④末次灌胃给药后24h,小鼠称重,处死,剥取瘤块称重,并计算抑瘤率犤(模型组平均瘤重-治疗组瘤重)/模型组平均瘤重×100%犦。小鼠连续灌胃给药12d后,处死,取胸腺及脾脏称重,计算脾指数犤脾质量/体质量(mg/g)犦及胸腺指数犤胸腺重量/体质量(mg/g)(体质量为小鼠体质量减去肿瘤质量后的差值)犦。⑤小鼠连续灌胃给药12d后,取眼球血,应用血细胞分析仪进行血细胞分析。⑥采用流式细胞仪FACSort检测瘤组织细胞周期及凋亡率。⑦组内计量资料差异比较采用方差分析,组间差异比较采用配对t检验。结果:小鼠70只均进入结果分析。①结果显示猫眼草水提物30和60g/kg组及顺铂1mg/kg组瘤重明显小于模型组(P<0.05～0.01),且猫眼草水提物7.5,15,30,60g/kg组抑瘤率分别为0.608%,16.931%,32.806%和58.255%,即随药物剂量的增加而增加。②猫眼草水提物各剂量组对荷瘤小鼠胸腺指数无明显影响,猫眼草水提物30和60g/kg组荷瘤小鼠脾指数明显低于模型组(P<0.05)。③猫眼草水提物各剂量组白细胞数、红细胞数、血小板数、血红蛋白与模型组比较,差异不明显(P>0.05);顺铂1mg/kg组白细胞数明显低于模型组(P<0.01)。④猫眼草30和60g/kg组和顺铂组的细胞在DNA合成期的比例高于模型组,静止期～DNA合成前期的比例低于模型组,猫眼草30和60g/kg组和顺铂1mg/kg组细胞凋亡率明显高于模型组(P<0.05)。结论:猫眼草水提物对Lewis肺癌有明显的抑制作用,且该种作用随剂量的增加而增高,有一定的免疫调节作用,并对小鼠血液系统无明显毒副作用,其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

中药消痤霜对兔耳痤疮实验模型的干预效果

目的:建立兔耳痤疮动物实验模型,用中药制剂消痤霜外涂,观察其疗效。方法:①实验于2003-07/08在北华大学医学院实验动物中心实验室完成。选用成年家兔20只。②建立兔耳痤疮动物模型:于每只家兔左右耳内侧耳管开口处2cm×2cm范围,每日涂煤焦油1次,每次0.5mL,连续2周。③将20只家兔随机分为2组:实验组与对照组,各10只,实验组右耳痤疮模型用消痤霜擦剂(主要成分为大黄、黄连、金银花、龙葵、积雪草等,由本院中药制剂室制备成外涂水剂,呈淡黄色),2次/d,每次约1mL擦涂,连续2周。对照组涂抹生理盐水。④14d后对两组兔右耳及实验组兔左耳痤疮模型处皮肤做肉眼观察及病理活检,进行组织学观察。痤疮模型组织学判定分级标准:0级为无痤疮表现;1级为毛囊漏斗部可见少量致密角化物质;2级为毛囊漏斗部可见中等致密角化物质,并向皮脂腺延伸;3级为扩张的毛囊内有广泛的角化物质,人类痤疮相似。⑤计量资料差异比较采用t检验。结果:实验过程中对照组死亡1只,最终进入结果分析19只。①实验组涂抹消痤霜2周后,肉眼见:局部毛囊角栓减少,部分角栓脱落后遗留点状凹陷的毛囊,丘疹变平减少;组织学观察见:表皮增厚明显减轻,真皮炎症细胞明显减少,但仍见毛囊口轻度扩张,有少量疏松角化物质充填。②对照组实验2周后肉眼仍可见明显的毛囊角栓,但丘疹减轻或变平;组织学观察见:角化过度,真皮内仍见较多的炎症细胞浸润,毛囊口及漏斗部仍见角化物质堆积,漏斗部扩大如壶状。③实验组治疗后痤疮模型组织学级别明显低于对照组犤(0.6±0.52),(2.5±0.53)级,P<0.01犦。结论:中药制剂消痤霜对兔耳痤疮实验模型具有减少毛囊的角栓、减轻真皮炎症和抑制瘢痕形成的作用。