消渴健脾胶囊挥发油提取及其β-环糊精包合工艺研究

目的 优选消渴健脾胶囊中挥发油的提取与包合工艺.方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,以提取量为指标,通过单因素试验考察浸泡时间,加水量、提取时间对提取工艺的影响;采用饱和水溶液法包合挥发油,以包合率为指标,通过正交试验考察挥发油与β-环糊精的比例,包合时间及包合温度对包合工艺的影响.结果 最佳提取工艺为加10倍量水提取6h;最佳包合工艺为挥发油与β-环糊精的比例1∶8,包合温度30℃,包合时间1h.结论 优选的挥发油提取与包合工艺条件稳定可行.     

原发性肝细胞癌组织中环氧化酶-2及E-钙黏蛋白的表达

目的：检测原发性肝细胞癌(HCC)组织中环氧化酶-2(COX-2)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。方法：采用免疫组化法检测64例HCC组织及12例正常肝组织中COX-2及E-cadherin的表达,并分析二者在HCC组织中的关联性及与临床病理特征的关系。结果：HCC组织中COX-2的表达高于正常肝组织(7...     

Twist、上皮性钙黏附素和神经性钙黏附素在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的观察肝细胞肝癌（HCC）组织中Twist、上皮性钙黏附素（E—cadherin）、神经性钙黏附素（N—cadherin）的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测64例HCC组织及20例癌旁组织中Twist、E—cadherin、N—cadherin的表达,并分析其I临床病理意义。结果Twist及N—cadherin在肝细胞癌组织中的表达率均高于癌旁组织（68．8％,40．0％VS62．5％,35．0％,P〈0．05）;E—cadherin的表达率分别为51．6％、75．0％,差异有统计学意义（P〈0．05）。HCC组织中,Twist与E—cadherin的表达呈负相关（r=-0．343,P〈0．05）,与N—cadherin的表达呈正相关（r=0．329,P〈0．05）,E—cadherin及N—cadherin的表达呈负相关（r=-0．272,P〈0．05）。三者表达水平均与组织分级、肿瘤转移有关（P〈0．05）。结论Twist和N—cadherin的高表达及E—cadherin的低表达与HCC的发生、发展、浸润和转移相关。     

基于网络药理学方法探索麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎机制研究

目的:采用网络药理学方法探索麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的机制。方法:检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中国天然产物化学成分库,BATMAN-TCM等数据库检索麻杏石甘汤相关中药化学成分及潜在靶点,通过CTD、TTD、DrugBank数据库挖掘新型冠状病毒肺炎相关的作用靶点,两者取交集筛选,再进行富集分析。结果:筛选出麻杏石甘汤生物活性成分279个,预测出麻杏石甘汤相关的靶点1417个,新型冠状病毒肺炎相关的作用靶点49个,通过韦恩图取交集得到麻杏石甘汤中参与新型冠状病毒肺炎的靶点24个,靶点质相互作用网络构建筛选出关键靶点24个。DAVID富集分析显示,麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎的关键靶点主要参与美洲锥虫病通路、TNF信号通路、麻疹风疹通路、疟疾通路、乙型肝炎通路、炎症性肠病通路、PI3K-Akt信号通路、单纯疱疹病毒感染、甲型流感通路、人类嗜T淋巴细胞病毒I型(HTLV-I)感染通路、哮喘通路、肺结核通路、toll样受体信号通路、Jak-STAT信号通路、cGMP-PKG信号通路等重要通路。结论:麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎主要参与抗病毒、抗炎、调节免疫、抗疟、抗肺损伤等多靶点、多通路发挥作用。     

胃癌中LINC00659的表达及其通过调控PI3K/AKT信号通路影响胃癌细胞增殖

目的 探讨LINC00659在胃癌组织及胃癌细胞中的表达，并探讨其通过调控PI3K/AKT信号通路影响胃癌细胞增殖的分子机制。方法 采用qRT-PCR法检测LINC00659在胃癌组织及人胃癌细胞株中的表达情况；构建慢病毒介导LINC00659敲减或过表达胃癌细胞株模型，qRT-PCR法检测转染效率；CCK-8法检测LINC00659对胃癌细胞增殖能力的影响；克隆形成实验检测细胞集落形成能力；Western blot法检测敲减或过表达LINC00659后胃癌细胞中Ki-67、PCNA、PI3K和p-AKT蛋白表达水平。结果 LINC00659在胃癌组织和人胃癌细胞株中高表达(P<0.01);qRT-PCR结果显示，慢病毒感染胃癌细胞后，成功敲减或过表达LINC00659(P<0.01);CCK-8法结果显示：敲减LINC00659显著抑制胃癌AGS细胞的增殖活力，过表达LINC00659促进HGC-27细胞增殖活力(P<0.05);克隆形成实验结果显示，敲减LINC00659抑制AGS细胞的集落形成能力，过表达LINC00659促进胃癌HGC-27细胞集落形成能力(P...     

液基细胞学与HPV分型联合检测对早期宫颈癌的筛查意义

目的探讨液基细胞学(TCT)联合人乳头瘤病毒(HPV)分型检测对早期宫颈癌筛查的临床意义。方法选择慢性宫颈炎患者714例。TCT采用离心甩片法,HPV-DNA检测采用PCR-反向点杂交法,对TCT和HPV-DNA任一检测阳性或二者均阳性者进行阴道镜取活检检查。结果在HPV感染的各年龄组中,20~30岁组和51~60岁组的感染率较高,分别为36.7%和39.7%,各年龄组感染率差异有统计学意义(χ~2=14.974,P=0.039)。TCT检测的阳性率为25.8%,HPV-DNA检测的阳性率为29.7%,略高于TCT检测,但差异无统计学意义(P<0.05)。HPV-DNA高危型感染者中病理诊断为宫颈癌5例,占6.5%,高于HPV-DNA低危型感染者宫颈癌的发生率(0.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。TCT联合HPV-DNA分型检测诊断宫颈癌的敏感度高于TCT和HPV-DNA单独检测,特异度高于HPV-DNA单独检测,假阳性率低于HPV-DNA单独检测,假阴性率低于TCT和HPV-DNA单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TCT联合HPV-DNA分型检测可以提高诊断宫颈癌的敏感性和特异性,对宫颈癌的早发现、早治疗有重要临床意义。     

大鼠原代肝细胞的培养及鉴定

目的:探讨体外大鼠肝细胞的分离培养及纯化的方法。方法:采用胶原酶Ⅳ消化组织块法分离新生大鼠肝细胞,对大鼠肝细胞进行纯化、培养,并采用免疫组织化学方法对其进行鉴定。结果:培养24 h,有部分细胞贴壁,48 h有大量细胞贴壁,但含有较多杂细胞。经过4~5次传代后,细胞形态一致,可见许多双核细胞和多核细胞。采用抗大鼠细胞角蛋白(ck-18)的特异抗体进行免疫细胞化学鉴定,经SP染色DAB显色后,阳性着色部位在胞浆呈棕黄色颗粒,阴性对照未见着色。结论:成功地体外培养了大鼠肝细胞并对其进行了鉴定,为进一步的实验研究奠定了基础。     

心肺联合移植患者术后并发症的预防护理

对3例心肺联合移植术患者术后注重观察及处理排斥反应、肺部感染、缺血再灌注损伤及术后心肺功能衰竭,执行标准化无菌隔离流程及环境学监测、呼吸道管理策略,结合实验室检查与临床观察综合判断,及早发现病情改变及时处理。结果1例出院后375d因肺部感染死亡,2例生存质量较好。提出缜密的防护措施有利于患者平稳渡过手术期,促进康复。     

LINC00659在胃癌组织中的表达及其对人胃癌细胞侵袭、迁移和自噬的影响

目的:在胃癌组织中检测LINC00659的表达水平,并探讨LINC00659对人胃癌AGS、HGC-27细胞侵袭、迁移和自噬的影响。方法:收集宁夏回族自治区人民医院自2020年01月至11月的17例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qRT-PCR法检测人胃癌组织与癌旁组织中LINC00659的表达,Western blot法和免疫组化检测人胃癌与癌旁组织中自噬相关蛋白LC3、p62的表达;在AGS和HGC-27细胞株中分别构建敲减和过表达LINC00659胃癌稳转株细胞,分为Vector组、sh-LINC00659组、pEX-3组和LINC00659组。慢病毒转染48 h后通过倒置荧光显微镜和qRT-PCR检测转染效率;Transwell、细胞划痕实验法检测各组细胞的侵袭和迁移能力;Western blot、免疫荧光检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3、p62的相对表达水平。结果:LINC00659及自噬相关蛋白LC3在胃癌组织中的表达均显著高于癌旁组织,而自噬相关蛋白p62在胃癌组织中的表达要低于癌旁组织（均P＜0.05）。AGS、HGC-27细胞经慢病毒转染后,与空载组相比,敲减组中LINC00659相对表达水平明显降低,过表达组LINC00659相对表达水平明显升高（均P<0.01）;Transwell、细胞划痕实验结果显示,与对照组相比,AGS敲减组细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制,而HGC-27过表达组细胞的侵袭和迁移能力显著增强（均P＜0.05）;Western blot、免疫荧光结果显示,AGS敲减组细胞中自噬相关蛋白LC3的表达有所下调,而p62的表达则明显升高,且在HGC-27过表达组中自噬相关蛋白LC3、p62的表达水平与敲减组完全相反（均P<0.05）。结论:LINC00659在胃癌组织中高表达,且能够促进人胃癌细胞的侵袭、迁移和自噬。