巨核细胞酶标染色法在贫血鉴别诊断中的应用价值

目的：探讨酶标法检测骨髓小巨核细胞在贫血诊断和鉴别诊断中的意义。方法：单纯性贫血患者共计123例，其中，骨髓增生异常综合征26例，缺铁性贫血20例，巨幼细胞性贫血10例，溶血性贫血18例，多发性骨髓瘤21例，骨髓纤维化9例，肾性贫血7例，纯红细胞再生障碍性贫血3例，慢性病贫血5例，慢性再生障碍性贫血4例。分别应用巨核细胞酶标染色法（APAAP）和瑞特染色法，计数患者骨髓涂片中巨核细胞的总数（包括小巨核细胞），并对小巨核细胞进行分类计数。结果：APAAP法较瑞特染色法检测的巨核细胞的数量多，差异有统计学意义（P〈0．05）；且APAAP法较瑞特染色法检测小巨核细胞的阳性率高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：APAAP法检测骨髓小巨核细胞，其结果明显优于瑞特染色法，阳性率高且特异性强，在单纯性贫血的鉴别诊断中有重要的应用价值。     

GSTT1和GSTM1基因多态性和PAH-DNA加合物与多发性骨髓瘤发病的关系研究

目的:分析代谢酶基因谷胱甘肽硫转移酶(GST)T1和M1基因多态性及多环芳烃(PAH)-DNA加合物与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发病的关系。方法:收集37例初诊MM患者及52例对照人群的骨髓液样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定骨髓液中GSTT1和GSTM1基因多态性,并进一步分析其与MM临床指标相关关系;采用竞争性酶联免疫吸附法(ELISA)检测PAH-DNA加合物浓度。结果:GSTT1缺失型基因型个体患MM的风险是非缺失型者的2.57倍(P=0.035),GSTM1缺失型个体患MM风险是非缺失型者的1.37倍,但差异无统计学意义(P0.05);在MM患者中,Ⅲ期GSTT1缺失型基因型明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P=0.038),而GSTT1基因多态性在不同年龄、类型、血红蛋白、β2-MG、白蛋白中的分布无显著性差异(P0.05)。初诊Hb85 g/L与Hb≥85 g/L的M M患者相比,其GSTM1缺失型基因型明显增加(P=0.017);MM患者的PAH-DNA加合物浓度明显高于对照人群(2 358±1 182 pg/ml vs 1 853±996 pg/m L)(P=0.032);GSTT1缺失型个体DNA加合物水平高于(或等于)2 100 pg/ml时,患MM的风险升高(OR=4.500,P=0.01)。结论:G STT1缺失型基因型有可能增加M M的危险性,并且GSTT1基因多态性与MM分期相关,G STM1基因多态性与M M血红蛋白水平相关,PAH-DNA加合物可能参与M M的发病,并且GSTT1缺失型个体DNA加合物水平高,更容易增加MM危险性。     

格列卫对慢性粒细胞白血病病人Foxo3a和bcr-abl融合基因表达影响

目的探讨初发及格列卫治疗的慢性粒细胞白血病（CML）病人骨髓中转录因子Foxo3a和bcr-abl融合基因的表达及其临床意义。方法采用SYBR GreenⅠ建立的实时荧光RT-PCR的方法,检测18例初发及10例格列卫治疗的CML病人骨髓样本中Foxo3a和bcr-abl融合基因的表达,以GAPDH为内参基因,以行骨髓穿刺排除诊断的非血液病病人的骨髓为对照组;各实验组基因表达水平的差异采用ΔΔCT相对定量法计算。结果初发CML病人骨髓bcr-abl融合基因的表达水平与格列卫治疗组比较差异有显著性（χ2=4.25,P〈0.05）;3组骨髓样本中Foxo3a的表达水平比较差异均有显著性（χ2=5.73～13.73,P〈0.01）;且初发CML病人的bcr-abl融合基因的高表达与转录因子Foxo3a的低表达呈明显负相关（r=-0.674,P〈0.01）。结论格列卫降低CML病人bcr-abl融合基因表达的同时可以增加Foxo3a的表达;转录因子Foxo3a的低表达与bcr-abl融合基因的高表达密切相关,二者可能共同参与CML的发生。     

TNF-α在Ⅱ型糖尿病中的作用

对细胞因子的研究已渗透到各个领域,近年来发现肿瘤坏死因子(TNF-α)参与了与肥胖有关的Ⅱ型糖尿病(MDDM)的生理,病理过程,且该病患者TNF-α过度表达与胰岛素抵抗(IR)程度呈正相关.     

骨髓坏死28例临床分析

骨髓坏死是指骨髓造血组织和基质组织大片坏死，骨髓涂片出现嗜酸性结构不清的无定形物。恶性疾病，尤其是血液系统疾病是其最常见的原发病，也可见于镰状细胞病、重症感染、败血症等疾病，预后差，临床较少见。1984年1月-2004年12月，我们诊治骨髓坏死病人28例，现分析报告如下。     

急性髓细胞白血病病人骨髓geminin和cdt1基因表达及意义

目的 探讨急性髓细胞白血病(AML)病人骨髓细胞中geminin和cdt1基因表达水平及其与AML发病和预后关系.方法 采用SYBR Green实时定量逆转录聚合酶链反应(SYBR-RT-PCR)技术,检测47例不同病程AML病人(包括25例初治者,16例完全缓解者,6例未缓解或复发者)骨髓细胞中geminin和cdt1 mRNA的表达,并对25例初治病人进行6个月随访.结果 初治、未缓解或复发AML病人geminin和cdt1表达较对照组及完全缓解组高,差异有显著性(H=4.95、3.22,Z=2.67～4.95,P＜0.01);完全缓解组geminin和cdt1表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).AML病人骨髓细胞中geminin和cdt1的表达呈明显正相关(r=0.59,P＜0.01);且初治组、完全缓解组及未缓解或复发组两者的表达均呈明显正相关(r=0.49～0.87,P＜0.05).25例AML初治病人随访6个月,死亡6例,存活19例,死亡组geminin表达高于存活组,差异有统计学意义(t=2.16,P＜0.05),而两组cdt1表达差异无显著性(t=0.61,P＞0.05).结论 AML病人骨髓细胞中geminin和cdt1表达可能与AML的病程有关;geminin在初治病人中的高表达可能是AML病人的不良预后因子.     

格列卫对慢性粒细胞白血病病人Foxo3a和bcr-abl融合基因表达影响

目的 探讨初发及格列卫治疗的慢性粒细胞白血病(CML)病人骨髓中转录因子Foxo3a和bcr-abl融合基因的表达及其临床意义.方法 采用SYBR Green Ⅰ建立的实时荧光RT-PCR的方法,检测18例初发及10例格列卫治疗的CML病人骨髓样本中Foxo3a和ber-abl融合基因的表达,以GAPDH为内参基因,以行骨髓穿刺排除诊断的非血液病病人的骨髓为对照组;各实验组基因表达水平的差异采用AACT相对定量法计算.结果 初发CML病人骨髓bcr-abl融合基因的表达水平与格列卫治疗组比较差异有显著性(X<'2>=4.25,P<0.05);3组骨髓样本中Foxo3a的表达水平比较差异均有显著性(X<'2>=5.73～13.73,P<0.01);且初发CML病人的ber-abl融合基因的高表达与转录因子Foxo3a的低表达呈明显负相关(r=-0.674,P<0.01).结论 格列卫降低CML病人bcr-abl融合基因表达的同时可以增加Foxo3a的表达;转录因子Foxo3a的低表达与bcr-abl融合基因的高表达密切相关,二者可能共同参与CML的发生.     

多发性骨髓瘤患者血清血管内皮生长因子和白介素-17水平变化的临床意义

本研究旨在探讨多发性骨髓瘤患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-17(IL-17)水平变化的临床意义。初治MM患者40例,其中临床Ⅰ期9例,Ⅱ期18例,Ⅲ期13例。在40例中25例采用长春新碱、阿霉素和地塞米松(VAD)方案治疗,15例采用硼替佐米和地塞米松(BD)方案治疗。正常对照组20例。用ELISA方法检测化疗前后血清VEGF和IL-17的水平。结果表明,MM组的VEGF和IL-17水平明显高于正常对照组(P<0.01),且随着临床分期,VEGF水平和IL-17水平呈递增趋势(P<0.05)。VEGF和IL-17水平在Ⅲ期高于Ⅰ期组和Ⅱ期组(P<0.05)。MM患者血清VEGF水平、血肌酐、血轻链λ、尿轻链λ、IL-17水平、C反应蛋白、血钙、β2-微球蛋白水平等均明显高于正常对照组(P<0.01)。治疗后VEGF和IL-17水平较治疗前明显下降(P<0.05),BD方案化疗效果较VAD方案更为显著(P<0.05)。结论:检测血清VEGF和IL-17水平对于MM患者的临床分期、病情判断和疗效观察具有重要意义。     

淋巴瘤患者多环芳烃-DNA加合物及代谢酶基因细胞色素氧化酶P4501A1与谷胱苷肽硫转移酶M1基因多态性的研究

目的 探讨多环芳烃（PAH）-DNA加合物和代谢酶基因细胞色素氧化酶P4501A1（CYP1A1）与谷胱苷肽硫转移酶M1（GSTM1）基因多态性与淋巴瘤发病的关系.方法 通过竞争性酶联免疫吸附法测定54例淋巴瘤患者及34例对照组骨髓液中PAH-DNA加合物含量,采用限制性片段长度多态性PCR法（PCR-RFLP）测定上述标本CYP1A1、GSTM1基因多态性.结果 淋巴瘤患者骨髓液中PAH-DNA加合物含量为（2498±1 250） pg/ml,较对照组的（1 882±797） pg/ml增加,差异有统计学意义（t=0.006,P＜0.05）;淋巴瘤患者GSTM1基因型缺失占85.2％,对照组占58.8％,差异有统计学意义（x2=7.73,P＜0.05）,GSTM1基因型缺失者患淋巴瘤风险是GSTM1表达者的4.03倍（95％ CI1.51～10.76,P＜ 0.05）;CYP1A1变异型是野生型患淋巴瘤风险的1.36倍（95％CI 0.56～ 3.31,P＞ 0.05）,GSTM1缺失者PAH-DNA加合物水平≥2 200 pg/ml时患淋巴瘤的危险性增加（OR=9.53,95％CI 2.397～ 37.990,P＜ 0.05）.结论 PAH-DNA加合物可能参与淋巴瘤的发病,GSTM1缺失与淋巴瘤发生有关,并且增加患淋巴瘤的风险.