我国疟原虫PCR常用检测技术研究进展

疟疾是由疟原虫经按蚊叮咬传播的寄生虫病,属全球关注的重要传染病之一。近年来,随着我国消除疟疾工作开展,疟疾本地感染病例得到有效控制,但输入性病例仍不断增加,采取快速准确诊断技术及时发现病例,对遏制疟疾的传播具有重要的意义。我国目前常用的疟疾诊断方法主要有显微镜镜检技术、血清学快速诊断检测和PCR检测技术。显微镜镜检技术虽然操作方法简单,便于现场使用,但对于低原虫密度和使用过抗疟药物等患者较容易漏诊或误诊;血清学快速诊断检测技术操作简单、快速,但未能对疟原虫进行分型和混合感染诊断;PCR技术检测疟原虫具有较高的敏感性和特异性,特别是较容易检测出低密度疟原虫。为此,本文就我国PCR检测疟原虫技术研究进展作一综述。     

库蚊属库状蚊亚属一新种（双翅目：蚊科）

本文报道采自云南思茅库的蚊属库状蚊亚属一新种,讨论了新种与近似种鉴别特征.标本保存在云南省寄生虫病防治所.     

云南省芒市埃及伊蚊分布调查

目的 了解埃及伊蚊在芒市的分布,为登革热媒介控制提供科学依据.方法 采用人工诱捕法对定点或不定点村寨进行成蚊采集,以了解当地白天成蚊种类组成及分布情况;对村内外的各类积水容器进行蚊幼虫采集,以观察当地蚊幼虫阳性容器指数、布雷图指数、房屋指数、千人指数情况.结果 在定点村寨,共捕获成蚊4种38只,其中白纹伊蚊18只(47.37％);检查各类积水容器408个,伊蚊幼虫阳性积水容器7个,阳性容器指数为1.72,布雷图指数0.92,房屋指数1.23,千人指数12.26;在不定点村寨,共捕获成蚊4132只,其中埃及伊蚊7只(0.17％),白纹伊蚊2614只(63.26％);野外竹林调查各类幼虫积水容器170个,其中阳性容器20个,阳性容器指数11.76;居民点共调查31户,幼虫各类积水容器152个,其中阳性积水容器9个,阳性容器指数5.92,布雷图指数6.12,房屋指数22.58,千人指数60.80.结论 首次在芒市发现埃及伊蚊分布,白纹伊蚊分布较广并属于当地的优势蚊种,建议有关部门加强登革热疫情及其媒介监测工作.     

登革热血清学诊断研究进展

登革热（dengue fever,DF）是由黄病毒属的登革病毒（dengue virus,DENV）通过埃及伊蚊或白纹伊蚊叮咬传播引起的一种急性蚊媒传播疾病,现已成为全球性的严重公共卫生问题。目前登革病毒诊断方法主要包括病毒分离、分子生物学检测和血     

中国云南湄公河上游乙型脑炎传播媒介生物学及行为的研究

目的 探讨乙型脑炎病毒媒介在人房的季节消长、嗜血习性和叮人行为，以及其幼虫相关的生物学习性，从而制定出有效的媒介控制措施。方法 2001年6～12月，在云南南部湄公河上游，选取一个种植场，采用CDC诱蚊灯和人工诱捕的方法捕蚊；蚊胃血源环状沉淀法鉴定其嗜血习性以及孳生地调查幼虫孳生习性。结果 共捕获乙脑病毒媒介蚊虫5属、11种、5726只。无论是诱蚊灯还是人工诱蚊法，三带喙库蚊、伪杂鳞库蚊、棕头库蚊和中华按蚊的季节密度高峰都出现于6～8月的雨季；3种库蚊在村内和村外有整夜叮咬活动，但中华按蚊的叮人高峰出现在21：00之前。人房室内诱蚊灯捕蚊与室外人诱观察发现，室内捕捉乙脑病媒数量远高于室外。蚊胃血检测结果发现它们的人血指数都比较高；幼虫具有明显的特征性分布。结论 湄公河上游地区人房优势蚊种三带喙库蚊、伪杂鳞库蚊、棕头库蚊和中华按蚊的生物学及行为与以往畜圈调查的结果存在着差异。     

中缅边境地区不明原因发热病人蚊媒病毒性疾病分子流行病学调查北大核心CSCD

目的了解中缅边境地区不明原因发热病人感染的蚊媒病毒种类,为当地蚊媒传染病防控提供科学依据。方法采用实时荧光RT-PCR法对2014-2015年在瑞丽市采集的1738份登革病毒NS1抗原检测阴性的不明原因发热病人血清进行Dengue virus(DENV)、Chikungunya virus(CHIKV)、Zika virus(ZIKV)、Sindbis virus(SINV)、Banna virus(BAV)、Batai virus(BATV)和Tahyna virus(TAHV)的检测,并将阳性标本接种于C6/36白纹伊蚊细胞进行病毒分离和鉴定,对阳性血清或新分离病毒株提取病毒RNA进行E基因RT-PCR扩增,测序后进行同源性和进化分析。结果从2015年采集的血清标本中检出1份ZIKV阳性,17份DENV阳性(6份DENV-1,6份DENV-2,未分型5份),从2014年采集的标本中检出1份DENV-1阳性。病毒分离得到1株ZIKV,2株DENV-1和2株DENV-2。对新分离ZIKV病毒株进行E基因测序,属于亚洲基因型,与2019年输入云南的缅甸株(2019YNZIKV02)进化关系较近。对2015年DENV阳性血清PCR产物测序,获得3条DENV-1E基因序列(本地病例),均属于基因1型,与2015年缅甸输入株进化关系较近;3条DENV-2均属于亚洲基因型(Asian Genotype),其中2条来源于本地病例序列和1条缅甸病例序列均与2015年缅甸输入的DENV-2亲缘关系较近。结论从中缅边境地区不明原因发热病人血清中检测和分离到ZIKV,并发现登革热漏检病例,提示亟待提高当地临床医生对寨卡病毒病的诊断意识并积极开展寨卡病毒病的常规监测,对疑似登革热病人需采用抗原和DENV、ZIKV病毒核酸检测方法联检以避免漏检。     

云南湄公河流域上游河谷地区疟疾媒介传疟作用研究

目的通过观察蚊媒季节消长、嗜血习性、叮咬行为和疟疾子孢子率以研究出它们在云南湄公河上游河谷地带传疟作用的关系。方法村内采取诱蚊灯和人工诱捕方法捕蚊；现场采取显微镜解剖蚊虫的方法观察唾腺子孢子，实验室采用ELISA技术检测蚊虫体内环子孢子蛋白（CSP）。结果村内共捕获16种按蚊。现场显微镜解剖7种按蚊，1010只经产蚊中，发现了7只唾液腺感染子孢子；ELISA方法检测现场捕回的8种按蚊，5154只各龄期蚊中，发现11只环子孢子蛋白阳性蚊。微小按蚊、中华按蚊、多斑按蚊子孢子阳性率（包括ELISA环子孢子蛋白阳性和镜检唾腺子孢子感染蚊）分别是0．37％、0．22％、0．32％，昆虫接种率分别估算为9．82、3．97、2．69。这些蚊媒叮咬活动起始于黄昏，并整夜有活动，但微小按蚊夜间活动高峰出现于于夜，中华按蚊和多斑按蚊的高峰则在21：00之前。它们的人血指数都在80％以上。结论以上结果显示微小按蚊、中华按蚊和多斑按蚊是湄公河上游河谷地带的重要传疟媒介。     

云南省蚊媒病毒分离物的初步鉴定

本研究对前期从云南蚊虫获得的病毒分离物作进一步鉴定,以明确其分类地位。采用甲病毒通用引物进行RT－PCR检测,在5株病毒分离物扩增出目的基因片段。新分离株4株来自三带喙库蚊,1株来自中华按蚊。它们可使白蚊伊蚊细胞（C6／36）、猴肾细胞（Vero）及金黄地鼠肾细胞（BHK－21）发生规律性细胞病变。核苷酸序列分析显示5株病毒与盖塔病毒（ Getah virus, GETV）同源性最高,与GETV中国云南YN0540株、河北株 HB0234、海南株 M1及南韩株、 LEIV MPR 株、鹭山病毒的同源性为96．4％～99．2％,5株病毒之间的同源性为98．4％～100％。系统进化分析结果显示,新分离株与上述GETV处于同一进化分支。以上结果证实5株病毒分离物为盖塔病毒。     

云南省蚊虫媒介与蚊传虫媒病毒研究现状

虫媒病毒是指通过吸血昆虫叮咬敏感的脊椎动物而传播疾病的一类病毒,目前全世界已发现537种,其中蚊虫传播虫媒病毒有300余种,占总数的50%以上[1]。蚊传虫媒病毒可以引起人、畜共患病,如引起脑炎的虫媒病毒黄病毒科黄病毒属流行性乙型脑炎     

ELISA检测云南按蚊环子孢子蛋白的评价

目的　采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测疟疾媒介按蚊环子孢子蛋白(CSP),评价ELISA用于云南疟疾媒介按蚊传疟效能调查的可行性。　方法　现场捕获疟疾媒介按蚊经产蚊,每只蚊镜检3叶唾腺子孢子感染率,ELISA检测另3叶唾腺CSP;用含间日疟原虫配子体的患者血人工喂饲微小按蚊,11d后同法镜检唾腺子孢子感染率及ELISA检测唾腺CSP。在种植场捕获8种按蚊(微小按蚊、中华按蚊、多斑按蚊、迷糊按蚊、可赫按蚊、带足按蚊、菲律宾按蚊和须喙按蚊 )各龄成蚊,ELISA检测唾腺CSP。　结果　①现场捕获经产蚊1010只,镜检唾腺子孢子阳性7只,阳性率为0.69%;ELISA检测唾腺CSP阳性8只,阳性率为0.79%;其中6只蚊两项检测均为阳性,阳性率为0.59%。两法比较,差异无显著性意义(P>0.05)。②人工感染36只微小按蚊,镜检唾腺子孢子阳性27只,阳性率为75.0%;ELISA检测唾腺CSP阳性29只,阳性率为80.6%;其中有26只蚊两项检测(Pv2 10CSP)均阳性,阳性率为72.2%。两法比较,差异无显著性意义(P>0.05)。③种植场捕获8种按蚊各龄成蚊4675只,ELISA检测唾腺CSP阳性11只,阳性率为0.24%;其中Pv210阳性9只,Pf2A10阳性2只;微小按蚊、中华按蚊和多斑按蚊ELISA检测阳性