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目的:检测华中某癌症高发地区环境水样有机提取物诱导人肝细胞系L-02细胞转化的能力,并初步探讨其诱导细胞转化的表观遗传学机制。方法:分别采集研究地区河水、离河较近(约1 km)及离河较远(约20 km)的浅井水(约10 m),用固相萃取方法提取其中的有机物。用台盼蓝染色计数法和单细胞凝胶电泳试验检测受试物的细胞毒性和致DNA损伤效应,以受试物对L-02细胞进行长期染毒并利用软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验检测受试物诱导L-02细胞转化的能力。采用甲基化特异性PCR(methyrlation specific PCR,MSP)技术检测转化细胞中O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O~6-methylguanine-DNA methyhransferase,MGMT)基因启动子区甲基化状况,并分别用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转化细胞MGMT mRNA和蛋白的表达水平。结果:河水、离河较近的井水、离河较远的井水的有机提取物处理L-02细胞24 h后,细胞存活率达70%的处理浓度分别为每毫升培养基30、150、200ml原水,且均含有致DNA损伤的物质。以此作为最高剂量对细胞进行长期染毒,12周以后各处理组细胞软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验均显示转化特性。MSP结果显示转化细胞中MGMT基因启动子区发生高甲基化,与DMSO溶剂对照组比较,转化细胞中MGMT mRNA和蛋白表达水平均下调(P0.05)。结论:研究地区环境水样有机提取物具有诱导L-02细胞转化的能力,MGMT基因启动子区的高甲基化可能参与有机物诱导的细胞转化过程。 相似文献
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目的应用核糖体多肽表达法结合肺癌活体细胞从设计的多肽库中筛选出特异性抗肺癌多肽,以建立1种简便、更有效的寻找抗肺癌多肽方法。方法选择已知可在肿瘤细胞膜上穿孔的阳性对照多肽Mast21和MastoparanX与肺癌细胞株(NCI—H460)进行筛选可行性试验,证实核糖体多肽表达法结合肺癌活体细胞可筛选出肺癌穿孔多肽。组建可直接用于体外多肽表达的DNA库,应用核糖体表达法结合肺癌细胞株(NCI—H460)进行抗肺癌多肽筛选。应用MTT法检测筛选的多肽在体外抗肿瘤效果。结果应用核糖体体外表达法和肺癌细胞株(NCI—H460)成功地从设计的肽库中筛选出一些肽,分析DNA序列编码多肽,选择合成肽链进行抗肺癌试验,证实能抑制非小细胞肺癌细胞株(NCI—H460)生长,而对正常人体红细胞影响有限。结论核糖体表达法结合肺癌细胞株,可从肽库中筛选出选择性抗肺癌多肽。从而有望建立1种简便、有效的寻找抗肺癌多肽的方法,为开发作用机制完全不同的抗肺癌新药奠定基础。 相似文献
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利用世界卫生组织(WHO)推荐的神经行为核心测试组合(NCTB)对103名职业性混苯暴露工人,以及72名无职业性有害因素接触的同厂工人进行测试。结果发现:暴露组在情感状态(POMS)、手工敏捷度、数字广度、数字译码、目标追踪等项目得分都低于对照组,其中优势手手工敏捷度、目标追踪两项得分差异具显著性。按车间混苯浓度分为高暴露组和低暴露组,多因素分析发现:高暴露组情感状态(POMS)中的抑郁-沮丧和有力-好动、数字广度、手工敏捷度(优势手和非优势手)、数字译码、目标追踪等项显著低于对照组和低暴露组。提示混苯暴露使工人神经行为功能表现某些方面的改变,如心情趋于抑郁、缺乏活动性,短时记忆力、理解力、运动速度、协调性等方面表现较差。 相似文献
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目的 观察体外无细胞核糖体表达系统筛选得到的、能与细菌膜结合的多肽的体外抑菌活性变化,初步评价该筛选系统的可行性.方法 采用核糖体展示系统和细胞膜模型筛选可结合于细胞膜的多肽,对筛选的多肽进行结构预测分析.选择形成α-螺旋结构可能性大、溶解性尚可的多肽(C13)进行合成.利用改良的微量肉汤稀释法测定C13和硫酸庆大霉素对G+(金黄色葡萄球菌)和G-(大肠杆菌、伤寒杆菌)细菌的抗菌活性--最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果 C13对试验细菌的MIC均为400 mg/L,但在现有浓度范围对试验菌的MBC则未测得.结论 体外无细胞核糖体表达系统筛选的抗菌肽C13具有一定的抑菌活性,表明利用人工膜模型和核糖体表达进行抗菌肽筛选的方法是可行的,但有效抗菌肽的筛选需进一步的抑菌试验证实. 相似文献
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某高校二次供水水质卫生状况的调查 总被引:5,自引:3,他引:2
饮用水的卫生安全直接影响着人们的健康。目前绝大多数建筑的三楼及以上的供水为二次供水方式。随着高层建筑蓄水池的推广,方便了广大居民,但由于早期对二次洪水卫生的疏忽,引致了水质量的下降(1-3)。因此,对于国家制定了《二次供水卫生管理办法》。为了解某校区内高层建筑二次供水存在的问题,给二次供水卫生管理提供决策依据,我们对其进行了调查。1对象与方法1.1调查对象 在某校区内随机抽取有顶层蓄水池的高楼12幢,采集顶层水池水(下称水池水)10份;随机采集经顶层水池输送到各用户的末梢水(下称末梢水)12份及… 相似文献
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风险评估方法是保障人类健康和环境安全的必要技术手段。基于动物实验获取毒性数据的传统风险评估,由于动物实验通量低、周期长、成本高和高剂量外推至人类暴露剂量的不确定性等问题,难以满足大量化学品亟需开展风险评估的需求。毒作用模式(MOA)和有害结局路径(AOP)风险评估框架的提出为我们开发新型、高效的评价方法指明了方向。本综述介绍了MOA和AOP的基本概念、内容以及两者之间的关系,并以丙烯酰胺(AA)为例,简述MOA/AOP框架在化学物风险评估中的具体应用,以期为更好运用MOA/AOP框架进行化学物风险评估提供理论指导。 相似文献
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目的:研究SV40 Large T(LT)对淋巴细胞转化的影响。方法:将逆转录病毒载体质粒pBabe-SV40LT转入外周血单核细胞。倒置显微镜观察细胞形态变化,蛋白印迹明确LT蛋白表达,流式细胞仪分析膜表面分子的表达,G显代染色体确定核型,生长曲线判别细胞生长状态。软琼脂实验检测细胞恶性变。结果:导入SV40LT后的淋巴细胞形态发生明显改变,由悬浮生长变为贴壁生长。转染细胞中可以检测到LT抗原的表达,有67%细胞表达CD56+分子,核型为异倍体,可在软琼脂上形成细胞集落。结论:用SV40LT转染获得一株可稳定传代且具有CD56+的异倍体恶性淋巴细胞。 相似文献
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白花蛇舌草提取物对鼻咽癌细胞株CNE1的毒性及其机制 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨白花蛇舌草提取物对鼻咽癌细胞株CNE1的细胞毒性及其机制。方法:体外培养鼻咽癌细胞株CNE1,分别用不同浓度的白花蛇舌草水溶性提取物、脂溶性提取物和多糖提取物作用24、48h,通过CCK-8法检测细胞存活率。分别用不同质量浓度的脂溶性提取物作用24、48h,用Annexin V.FITC凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡的情况。结果:3种白花蛇舌草提取物对鼻咽癌细胞株CNE1均有增殖抑制的作用,在一定的浓度范围内,呈剂量.效应关系,并存在时间.效应关系。3种提取物中,脂溶性提取物对鼻咽癌细胞株CNE1毒性最大,水溶性提取物次之,组间两两比较差异有统计学意义(P〈0.05)。脂溶性提取物可诱导鼻咽癌细胞株CNE1凋亡,存在剂量-效应关系和时间-效应关系。结论:白花蛇舌草对鼻咽癌细胞株CNE1有显著的增殖抑制作用,其中以亲脂类提取物的作用最为明显,作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。 相似文献