CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达

有研究证实,霍乱毒素(CT)A1亚基与葡萄球菌G蛋白的D肽偶联构建的融合蛋白CTA1-DD具有良好的佐剂效果。为了获得重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达,将CTA1-DD基因连接到表达载体pHT43中,构建重组枯草杆菌表达载体pHT43-CTA1-DD。将重组载体转化到枯草芽胞杆菌WB600中,用IPTG诱导重组菌表达,发酵液离心后取上清液,通过SDS-PAGE和Western blot方法分析蛋白表达情况。发酵上清液经Ni-IDA琼脂糖树脂纯化,与流感病毒HA抗原混合后共同滴鼻免疫小鼠后采集小鼠血清和支气管肺泡灌洗液检测IgG和IgA的抗体水平。结果显示：重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中能够分泌表达,在发酵罐中发酵36 h情况下蛋白表达量最高,目的蛋白大小在42 kDa左右,蛋白产量最高能到700μg/mL,Western blot检测目的蛋白正确表达。重组蛋白经过Ni-IDA琼脂亲和层析纯化后与HA抗原混和滴鼻免疫小鼠,ELISA结果显示CTA1-DD蛋白组针对HA抗原能够诱导更高的血清IgG和黏膜IgA抗体水平,说明枯草芽胞杆菌表达的CTA1-DD蛋白具有佐剂活性...     

巨大芽胞杆菌YB-3的筛选、鉴定及其对生姜青枯病的生防效果研究

青枯病（bacterial wilt）是生姜上的一种细菌土传毁灭性病害,化学防治易污染环境且常规化学药剂很难在土壤中起到持续控病的作用,生物防治是其理想的防治方法。为开发对生姜青枯病有效的生防措施,对从生姜根际土壤中分离的一株生防细菌YB-3进行了鉴定,并对其生物学特性及生防效果进行了研究,以丰富生防菌株资源库。采用抑菌圈法筛选拮抗细菌,对效果最好的拮抗菌株做盆栽试验,测定其对生姜青枯病的防治效果,根据形态特征、生理生化特性以及16S rDNA序列对筛选得到的优良菌株进行鉴定。试验结果表明,该拮抗菌在平皿上对青枯菌的抑菌率为50.67%,盆栽试验对青枯病的防治效果为60.86%;经16S rDNA序列分析,并结合形态学和生理生化特征,将菌株YB-3鉴定为巨大芽胞杆菌Bacillus megaterium。YB-3是一株具有开发利用价值的姜青枯病生防菌株。     

杀线虫苏云金芽胞杆菌NBIN-863高含量悬浮剂的研制

目前我国微生物农药原药生产技术已达到甚至超过发达国家水平,但制剂技术却存在较大差距,主要体现在剂型结构不合理、制剂质量差、农药助剂种类及品种少、剂型加工工艺总体水平还比较落后等方面。苏云金芽胞杆菌（Bt）等功能微生物产品的市场容量及应用效果与剂型是密切相关的。为了明确新型生物杀线剂NBIN-863的最佳施用剂型,特开展此试验。通过对防腐剂、分散剂、悬浮剂等不同助剂的选择,研制了一种高含量Bt悬浮剂（5.2×10⁹～7.9×10⁹CFU/mL）。配方优化试验表明,在Bt发酵液中加入0.4%防腐剂山梨酸钾、1.0%分散剂硅酸镁铝、4.0%悬浮剂木质素磺酸钙,用盐酸调节pH至4.5,54℃热储前芽胞数最高为7.9×10⁹ CFU/mL,对秀丽隐杆线虫活性最高,LC₅₀为2.83 mg/L,对黄瓜根结线虫田间防效达68.64%。综合各指标,尤其是对秀丽隐杆线虫的半致死浓度,杀线虫NBIN-863悬浮剂（7.9×10⁹ CFU/mL）效果最好,不仅流动性好,而且耐贮藏,是防治作物根结线虫病的理想药剂。     

红花组织培养快繁的研究

<正>红花又称草红花,双子叶植物,菊科,具有特异香气,味微苦[1]。以花片长、色鲜红、质柔软者为佳,主产于河南、浙江、四川等地。古往今来,关于红花在医药方面的研究已引起广泛关注[2]。临床上常用红花治疗子宫充血、心血管、血栓形成等疾病,也作为止痛、消炎剂等应用[3]。因红花丝中含有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、健胃等药用成分,使其具有较高的药用价值和经济价值。由于红花用种量大,在自然状态下,红花不能进行有性生殖,只能以球茎进行无性     

井冈山厚皮香生长发育生物学特性的研究

井冈山厚皮香是罗霄山脉的特有植物，在园林树种配置，盆景制作，红木家具等方面具有很高的应用价值，本文主要对它的生长发育生物学特性进行研究，为进一步开发利用这一资源提供信息。     

桤木采穗圃无性系管理技术研究

研究表明:桤木无性系植株嫩枝总芽数主要取决于树龄和无性系遗传特性,同时与无性系植株定干高度、修枝、施肥等密切相关。在桤木无性系采穗圃中,无性系植株定干高度以90 cm为宜,无性系植株枝条宜进行轻短截,并加强施肥管理,既可提高嫩枝总芽数,又能扩大树冠,增强树势,提高采穗圃穗条的产量和质量。     

针叶树组织培养繁殖技术研究进展

针叶树组织培养繁殖技术的建立 ,对快速繁殖针叶树种苗木起到了重要的作用。该文论述了针叶树组织培养的现状 ;重点介绍了影响外植体分化的因子———外植体、培养基、激素等 ,以及外植体芽的诱导和增殖及其植株再生方面的内容。     

余甘子丛生芽诱导和快速繁殖研究

本试验以余甘子嫩芽和嫩枝茎段为外植体 ,在 MS培养基中进行离体繁殖和培养试验。结果表明 ,添加细胞分裂素 BA对丛生芽诱导有明显促进作用 ,激素组合以 BA与 NAA为最好 ,嫩芽外植体诱导丛生芽的最适培养基为 MS BA0 .5 mg/ L NAA 0 .1mg/ L,分化率达 90 %以上 ;嫩枝茎段旅导丛生芽所需的 BA浓度相对高些 ,最适培养基为 MS BA 2 .0 mg/ L NAA 0 .1mg/ L,分化率达 5 6 .7% ,丛生芽增殖生长培养基为 MS BA 0 .1mg/ L NAA 0 .1mg/ L Na H2 PO45 0 mg/ L。生根培养基为 1/ 2MS NAA 0 .2 5 mg/ L IBA 0 .2 5 mg/ L ,生根率在 30 %左右     

芦荟吸芽离体培养和植株再生

芦荟吸芽在MS＋BA3－4mg/L＋NAA 0.5-0.7mg/L的培养基中，产生丛生芽；转入MS＋BA 2.0-3 NAA0.5-0.7mg/L继代培养时，芽生长健壮；切割不定芽在1／2MS＋ABT1.5-2.0mg/L培养基中可诱导生根，生根率达90％以上。每年3－6月，9－10月移栽于河沙：Luo石为3：1的基质内，移栽成活率达80％以上。     

樟子松成熟胚的离体培养与不定芽的形成

沙藏45d的樟子松种子,剥胚培养在5个系列17种培养基上.在6BA0.2～2.0(mg/L,单位下同)+NAA0.05～0.5以及6BA1.0+IAA0.2～0.5的激素配比范围内,可诱导胚形成不定芽.KT与NAA或IAA配合时无不定芽形成.不定芽分化部位明显受激素种类控制,6BA与NAA配合可诱导胚轴分化出不定芽,而6BA与IAA配合,则可从子叶顶端和基部诱导出不定芽。